隨著轉(zhuǎn)基因作物的快速發(fā)展,轉(zhuǎn)基因食品的安全性成為人民群眾關(guān)心的問題,其中,轉(zhuǎn)基因食品引起食物過敏的可能性是人們關(guān)注的焦點之一。目前,使用動物模型和細(xì)胞模型評價轉(zhuǎn)基因作物的致敏性是國際上研究和開發(fā)的熱點領(lǐng)域,正確應(yīng)用動物模型和細(xì)胞模型,以及其他評價方法能夠有效地對轉(zhuǎn)基因食品致敏性進(jìn)行評價。本研究應(yīng)用已知致敏原卵清蛋白（OVA）建立腹腔注射致敏BALB/c小鼠模型,并使用不同致敏強(qiáng)度的蛋白（花生凝集素、p-乳球蛋白和馬鈴薯酸性磷酸酶）來驗證該模型的可行性；此外,本研究還對RBL-2H3細(xì)胞作為轉(zhuǎn)基因食品致敏細(xì)胞模型的可行性進(jìn)行了初步探討。 1. BALB/c小鼠致敏模型的建立 目的：建立BALB/c、鼠致敏動物模型,探討腹腔注射途徑下BALB/c小鼠模型的最佳致敏劑量和致敏頻次,研究最適致敏周期和動物性別。 方法：（1）致敏劑量實驗：64只BALB/c小鼠隨機(jī)分成4組,每組16只,雌雄各半。分別腹腔注射給予0.25mL含0mg、0.05mg、0.5mg和5mg OVA的PBS溶液（濃度為Omg/mL、0.2mg/mL、2mg/mL和20mg/mL）,注射時間為第0、3、6... 

【文章頁數(shù)】：118 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
本課題受資助情況
目錄
縮略詞表
摘要
Abstract
前言
    1 食物過敏
    2 轉(zhuǎn)基因食品安全性評價
    3 小結(jié)
    4 本研究目的及意義
第一章 BALB/c小鼠致敏模型的建立
    引言
    1 材料與試劑
        1.1 實驗動物
        1.2 主要試劑
        1.3 試劑配制
    2 實驗方法
        2.1 動物分組
        2.2 血樣處理方式
        2.3 血清中OVA特異性IgE測定
        2.4 血清中OVA特異性IgG1測定
    3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計和分析
    4 實驗結(jié)果
        4.1 劑量實驗
        4.2 致敏次數(shù)實驗
        4.3 致敏周期實驗
        4.4 性別比較實驗
    5 討論
        5.1 致敏劑量分析
        5.2 致敏次數(shù)分析
        5.3 致敏周期分析
        5.4 性別分析
    6 本章小結(jié)
第二章 BALB/c小鼠致敏模型的驗證
    引言
    1 材料與試劑
        1.1 實驗動物
        1.2 主要試劑和儀器
        1.3 試劑配制
    2 實驗方法
        2.1 動物分組及處理方式
        2.2 血清中蛋白特異性IgE測定
        2.3 血清中蛋白特異性IgG測定
        2.4 血清中蛋白特異性IgG1測定
        2.5 脾細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞因子測定
        2.6 小鼠激發(fā)后進(jìn)行肛溫測定和臨床癥狀觀察
        2.7 血漿中組胺的測定
        2.8 組織病理檢查
    3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計和分析
    4 實驗結(jié)果
        4.1 血清中蛋白特異性IgE
        4.2 血清中蛋白特異性IgG
        4.3 血清中蛋白特異性IgG1
        4.4 細(xì)胞因子-IL-4和IFN-γ
        4.5 激發(fā)后小鼠過敏反應(yīng)臨床癥狀
        4.6 激發(fā)后小鼠的肛溫
        4.7 血漿中的組胺
        4.8 組織病理檢查
    5 討論
        5.1 細(xì)胞因子分析
        5.2 致敏原特異性IgE、IgG和IgG1分析
        5.3 組胺分析
        5.4 肛溫分析
        5.5 組織病理分析
    6 本章小結(jié)
第三章 RBL-2H3細(xì)胞模型的初步探索
    引言
    1 材料與試劑
        1.1 實驗動物血清
        1.2 實驗細(xì)胞
        1.3 主要試劑和儀器
        1.4 試劑配制
    2 實驗方法
        2.1 細(xì)胞準(zhǔn)備
        2.2 實驗步驟
    3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計和分析
    4 實驗結(jié)果
        4.1 RBL-2H3細(xì)胞的正常形態(tài)
        4.2 β-氨基己糖苷酶測定的可靠性
        4.3 β-氨基己糖苷酶釋放率
    5 討論
    6 本章小結(jié)
結(jié)論
    1 BALB/C小鼠致敏模型的建立
    2 BALB/c小鼠致敏模型的驗證
    3 RBL-2H3細(xì)胞模型的初步探索
參考文獻(xiàn)
致謝
個人簡歷
文章附錄
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]轉(zhuǎn)基因作物產(chǎn)業(yè)化現(xiàn)狀及我國的發(fā)展策略[J]. 李建平,肖琴,周振亞,耿瑜.  農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)問題. 2012(01)
[2]轉(zhuǎn)基因食品致敏性評價嚙齒類動物模型研究進(jìn)展[J]. 孫拿拿,彭于發(fā),賈旭東,李寧.  中國食品衛(wèi)生雜志. 2009(05)
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[6]轉(zhuǎn)基因食品致敏性評價[J]. 賈旭東.  衛(wèi)生毒理學(xué)雜志. 2005(02)
[7]食品過敏原體外激發(fā)小鼠致敏肥大細(xì)胞組胺釋放[J]. 向軍儉,張在軍,毛露甜,鄧寧,楊紅宇.  廣東醫(yī)學(xué). 2005(05)
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碩士論文
[1]轉(zhuǎn)基因食品致敏性評價嚙齒類動物模型（BN大鼠和C3H/HeJ小鼠）研究[D]. 孫拿拿.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2010
[2]利用RBL-2H3細(xì)胞研究雙黃連等中藥注射液的過敏性[D]. 羅霞.廣州中醫(yī)藥大學(xué) 2009



本文編號：3689049