發(fā)布時間：2017-05-15 00:09

  本文關(guān)鍵詞：MPTP誘導(dǎo)小鼠帕金森病模型中CLK1參與神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞激活及神經(jīng)毒性的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：研究clk1對MPTP誘導(dǎo)的小鼠帕金森病模型中神經(jīng)元損傷以及膠質(zhì)細(xì)胞激活的影響及其機(jī)制。 方法：野生型和clk1缺失型C57BL小鼠（Mclk1+/-)采用亞急性帕金森病模型（MPTP，30mg/kg，5天)，利用行為學(xué)檢測，免疫組化和Western blotting方法分別檢測MPTP模型后小鼠的行為學(xué)改變、腦內(nèi)多巴胺能神經(jīng)元損傷及多黑質(zhì)部位膠質(zhì)細(xì)胞激活情況；體外原代培養(yǎng)星型膠質(zhì)細(xì)胞LPS/IFN-γ刺激，運(yùn)用Real-timePCR，ELISA，NO assay方法檢測星形膠質(zhì)細(xì)胞激活情況，同時采用熒光探針DCFH-DA和JC-1分別檢測原代星型膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)ROS的產(chǎn)生和線粒體膜電位的變化；利用LPS/IFN-γ刺激后的原代星型膠質(zhì)細(xì)胞上清與神經(jīng)元共培養(yǎng)，觀察原代星型膠質(zhì)細(xì)胞對神經(jīng)元的神經(jīng)毒性作用；最后利用Western blotting檢測腦組織和體外培養(yǎng)星形膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)HIF-1α蛋白水平表達(dá)的變化。 結(jié)果：基礎(chǔ)條件下，，與野生型比較，Mclk1+/-小鼠在行為學(xué)表現(xiàn)，多巴胺能神經(jīng)元損傷，膠質(zhì)細(xì)胞激活狀態(tài)及膠質(zhì)細(xì)胞線粒體功能方面無明顯差異，但是在MPTP模型后，與野生型相比，Mclk1+/-小鼠爬桿時間顯著延長，轉(zhuǎn)棒運(yùn)動時間顯著縮短；免疫組織熒光化學(xué)檢測發(fā)現(xiàn)中腦黑質(zhì)部位TH陽性細(xì)胞數(shù)量顯著減少以及鄰近的GFAP和Iba1陽性細(xì)胞激活水平顯著升高；體外原代培養(yǎng)的Mclk1+/-小鼠星型膠質(zhì)細(xì)胞在LPS/IFN-γ刺激后，TNF-α，NO的釋放和ROS生成顯著增加；線粒體膜電位檢測發(fā)現(xiàn)，LPS/IFN-γ刺激后，星型膠質(zhì)細(xì)胞線粒體膜電位顯著降低；膠質(zhì)細(xì)胞條件培養(yǎng)基與神經(jīng)元共培養(yǎng)實驗發(fā)現(xiàn)，Mclk1+/-小鼠星型膠質(zhì)細(xì)胞對神經(jīng)元的損傷作用加��；在炎癥環(huán)境中，與野生型相比，clk1缺失可明顯升高腦內(nèi)和星形膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)HIF-1α的表達(dá)。 結(jié)論：1. clk1缺失小鼠對MPTP誘導(dǎo)中腦多巴胺能神經(jīng)損傷更敏感。2.星型膠質(zhì)細(xì)胞過度激活參與clk1缺失小鼠對MPTP誘導(dǎo)神經(jīng)元損傷的敏感性。3. clk1缺失對MPTP誘導(dǎo)神經(jīng)元損傷敏感性的增加和星型膠質(zhì)細(xì)胞對炎癥刺激反應(yīng)性的增加可能與上調(diào)缺氧誘導(dǎo)因子HIF-1α有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：帕金森病 星型膠質(zhì)細(xì)胞 clk1 線粒體
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R-332;R742.5
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-8
• 前言8-13
• 實驗材料和方法13-22
• 1.實驗材料13-14
• 2.實驗方法14-22
• 實驗結(jié)果22-39
• 討論39-44
• 結(jié)論44-45
• 參考文獻(xiàn)45-49
• 附錄一：綜述49-56
• 參考文獻(xiàn)54-56
• 附錄二：英文縮寫詞56-57
• 致謝57-58

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王普清;孫圣剛;;黑質(zhì)小膠質(zhì)細(xì)胞主要組織相容性復(fù)合物Ⅱ的表達(dá)與帕金森病發(fā)生和進(jìn)展的關(guān)系[J];國際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志;2009年02期

2 呂風(fēng)月;趙詠梅;;星形膠質(zhì)細(xì)胞在帕金森病發(fā)病機(jī)制中的作用[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2008年05期

3 張琳;段德義;徐群淵;;神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞的相互作用與帕金森病[J];解剖科學(xué)進(jìn)展;2006年02期

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5 張克忠;蔣雨平;;單胺氧化酶B抑制劑在治療帕金森病中的研究[J];中國臨床神經(jīng)科學(xué);2008年02期

6 殷劍;仲林;鄒敬宇;湯寬妮;李淼;王璞;李s

本文編號：366507