一、H2O2對MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠脾臟的影響目的腦缺血再灌注早期,脾臟中有大量炎癥介質(zhì)浸潤,導致腦缺血再灌注后脾細胞出現(xiàn)大量凋亡,嚴重影響腦缺血再灌注病人的預后。用H202誘導WT小鼠及MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠脾細胞和線粒體,并觀察抗氧化劑NAC和SOD抑制劑DETC對其的干預作用。探討外源性H2O2對小鼠脾細胞活力的影響及NAC、DETC、 MT-Ⅰ/Ⅱ?qū)2O2誘導的脾細胞氧化應激損傷的作用,為保護腦缺血再灌注后脾細胞免受氧化應激損傷尋求新的思路。方法1.制備WT小鼠及MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠脾細胞懸液,將細胞分為不同濃度H2O2（0,0.1,0.2,0.5,1,2mM）處理組,2h后MTT比色法檢測細胞活力；2.熒光探針MitoSOX對不同濃度H2O2（0,0.1,0.2,0.5,1,2mM）處理2h的脾細胞進行染色,在熒光顯微鏡下對比觀察各濃度組熒光強度；3.在細胞水平上,用0.5mM H2O2誘導WT小鼠及MT-Ⅰ/ⅡKO小鼠脾細胞,并分別用NAC、DETC作干預處理,2h后MTT比色法檢測細胞活力；4.分別檢測NAC、DETC處理的0.5mM H2O2誘導的WT小鼠及MT-Ⅰ... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學天津市211工程院校

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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
符號說明
前言
    一、H_2O_2對MT-1/n K0小鼠脾臟的影響
        研究現(xiàn)狀、成果
        研究目的、方法
    二、碘過量對MT-I/IIK0小鼠脾臟的影響
        研究現(xiàn)狀、成果
        研究目的、方法
一、H_2O_2對MT-Ⅰ/ⅡKO小鼠脾臟的影響
    實驗一 不同濃度H_2O_2對MT-Ⅰ/ⅡKO小鼠脾細胞活力的影響
        1.1 對象和方法
            1.1.1 實驗動物的來源及飼養(yǎng)繁育
            1.1.2 主要儀器
            1.1.3 主要試劑
            1.1.4 主要溶液的配制
            1.1.5 脾細胞懸液的制備
            1.1.6 MTT檢測細胞活力
            1.1.7 觀察線粒體超氧化物的量
            1.1.8 統(tǒng)計方法
        1.2 結(jié)果
            1.2.1 MTT檢測結(jié)果
            1.2.2 觀察線粒體超氧化物的量
        1.3 討論
        1.4 小結(jié)
    實驗二 抗氧化劑NAC對MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠脾細胞氧化應激損傷的影響
        2.1 對象和方法
            2.1.1 主要儀器
            2.1.2 主要試劑
            2.1.3 主要溶液的配制
            2.1.4 MTT檢測細胞活力
            2.1.5 細胞損傷檢測
            2.1.6 觀察線粒體超氧化物的量
            2.1.7 脾細胞線粒體的制備
            2.1.8 線粒體腫脹檢測
            2.1.9 統(tǒng)計方法
        2.2 結(jié)果
            2.2.1 MTT檢測結(jié)果
            2.2.2 細胞損傷檢測結(jié)果
            2.2.3 觀察線粒體超氧化物的量
            2.2.4 線粒體腫脹檢測
        2.3 討論
        2.4 小結(jié)
    實驗三 SOD抑制劑DETC對MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠脾細胞氧化應激損傷的影響
        3.1 對象和方法
            3.1.1 主要儀器
            3.1.2 主要試劑
            3.1.3 主要溶液的配制
            3.1.4 MTT檢測細胞活力
            3.1.5 細胞損傷檢測
            3.1.6 觀察線粒體超氧化物的量
            3.1.7 線粒體腫脹檢測
            3.1.8 統(tǒng)計方法
        3.2 結(jié)果
            3.2.1 MTT檢測結(jié)果
            3.2.2 細胞損傷檢測結(jié)果
            3.2.3 觀察線粒體超氧化物的量
            3.2.4 線粒體腫脹檢測
        3.3 討論
        3.4 小結(jié)
二、碘過量對MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠脾臟的影響
    1 對象和方法
        1.1 實驗動物的來源、飼養(yǎng)及繁育
        1.2 主要儀器
        1.3 主要試劑
        1.4 主要溶液的配制
        1.5 動物模型的建立及分組
        1.6 取材和標本的制備
        1.7 HE化學染色
        1.8 統(tǒng)計方法
    2 結(jié)果
        2.1 脾臟的臟體比
        2.2 HE染色
    3 討論
    4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
發(fā)表論文和參加科研情況說明
附錄
綜述 金屬硫蛋白在多器官中的抗氧化作用
    綜述參考文獻
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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[2]Dietary zinc and metallothionein on small intestinal disaccharidases activity in mice[J]. Cuong D Tran,Johanna Cool,Cory J Xian.  World Journal of Gastroenterology. 2011(03)
[3]過氧化氫對FRTL細胞線粒體膜電位和超氧化物生成的影響[J]. 李敏,李蘭英,陳祖培,姚小梅.  天津醫(yī)藥. 2010(03)
[4]碘鹽與碘致甲狀腺疾病的現(xiàn)狀[J]. 符兆胤,張嘉越.  醫(yī)學綜述. 2009(10)
[5]低碘大鼠脾臟淋巴細胞超微結(jié)構(gòu)研究[J]. 李金茹,陳雪嫻.  天津醫(yī)科大學學報. 2001(03)
[6]碘對脾的形態(tài)學影響[J]. 陳雪嫻,劉金寶,王春艷,劉皓,張菊芳,韓頡.  中國地方病學雜志. 1994(01)



本文編號：3637497