一、H2O2對(duì)MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠脾臟的影響目的腦缺血再灌注早期,脾臟中有大量炎癥介質(zhì)浸潤(rùn),導(dǎo)致腦缺血再灌注后脾細(xì)胞出現(xiàn)大量凋亡,嚴(yán)重影響腦缺血再灌注病人的預(yù)后。用H202誘導(dǎo)WT小鼠及MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠脾細(xì)胞和線粒體,并觀察抗氧化劑NAC和SOD抑制劑DETC對(duì)其的干預(yù)作用。探討外源性H2O2對(duì)小鼠脾細(xì)胞活力的影響及NAC、DETC、 MT-Ⅰ/Ⅱ?qū)2O2誘導(dǎo)的脾細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的作用,為保護(hù)腦缺血再灌注后脾細(xì)胞免受氧化應(yīng)激損傷尋求新的思路。方法1.制備WT小鼠及MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠脾細(xì)胞懸液,將細(xì)胞分為不同濃度H2O2（0,0.1,0.2,0.5,1,2mM）處理組,2h后MTT比色法檢測(cè)細(xì)胞活力；2.熒光探針MitoSOX對(duì)不同濃度H2O2（0,0.1,0.2,0.5,1,2mM）處理2h的脾細(xì)胞進(jìn)行染色,在熒光顯微鏡下對(duì)比觀察各濃度組熒光強(qiáng)度；3.在細(xì)胞水平上,用0.5mM H2O2誘導(dǎo)WT小鼠及MT-Ⅰ/ⅡKO小鼠脾細(xì)胞,并分別用NAC、DETC作干預(yù)處理,2h后MTT比色法檢測(cè)細(xì)胞活力；4.分別檢測(cè)NAC、DETC處理的0.5mM H2O2誘導(dǎo)的WT小鼠及MT-Ⅰ... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市211工程院校

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
符號(hào)說明
前言
    一、H_2O_2對(duì)MT-1/n K0小鼠脾臟的影響
        研究現(xiàn)狀、成果
        研究目的、方法
    二、碘過量對(duì)MT-I/IIK0小鼠脾臟的影響
        研究現(xiàn)狀、成果
        研究目的、方法
一、H_2O_2對(duì)MT-Ⅰ/ⅡKO小鼠脾臟的影響
    實(shí)驗(yàn)一 不同濃度H_2O_2對(duì)MT-Ⅰ/ⅡKO小鼠脾細(xì)胞活力的影響
        1.1 對(duì)象和方法
            1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的來源及飼養(yǎng)繁育
            1.1.2 主要儀器
            1.1.3 主要試劑
            1.1.4 主要溶液的配制
            1.1.5 脾細(xì)胞懸液的制備
            1.1.6 MTT檢測(cè)細(xì)胞活力
            1.1.7 觀察線粒體超氧化物的量
            1.1.8 統(tǒng)計(jì)方法
        1.2 結(jié)果
            1.2.1 MTT檢測(cè)結(jié)果
            1.2.2 觀察線粒體超氧化物的量
        1.3 討論
        1.4 小結(jié)
    實(shí)驗(yàn)二 抗氧化劑NAC對(duì)MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠脾細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的影響
        2.1 對(duì)象和方法
            2.1.1 主要儀器
            2.1.2 主要試劑
            2.1.3 主要溶液的配制
            2.1.4 MTT檢測(cè)細(xì)胞活力
            2.1.5 細(xì)胞損傷檢測(cè)
            2.1.6 觀察線粒體超氧化物的量
            2.1.7 脾細(xì)胞線粒體的制備
            2.1.8 線粒體腫脹檢測(cè)
            2.1.9 統(tǒng)計(jì)方法
        2.2 結(jié)果
            2.2.1 MTT檢測(cè)結(jié)果
            2.2.2 細(xì)胞損傷檢測(cè)結(jié)果
            2.2.3 觀察線粒體超氧化物的量
            2.2.4 線粒體腫脹檢測(cè)
        2.3 討論
        2.4 小結(jié)
    實(shí)驗(yàn)三 SOD抑制劑DETC對(duì)MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠脾細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的影響
        3.1 對(duì)象和方法
            3.1.1 主要儀器
            3.1.2 主要試劑
            3.1.3 主要溶液的配制
            3.1.4 MTT檢測(cè)細(xì)胞活力
            3.1.5 細(xì)胞損傷檢測(cè)
            3.1.6 觀察線粒體超氧化物的量
            3.1.7 線粒體腫脹檢測(cè)
            3.1.8 統(tǒng)計(jì)方法
        3.2 結(jié)果
            3.2.1 MTT檢測(cè)結(jié)果
            3.2.2 細(xì)胞損傷檢測(cè)結(jié)果
            3.2.3 觀察線粒體超氧化物的量
            3.2.4 線粒體腫脹檢測(cè)
        3.3 討論
        3.4 小結(jié)
二、碘過量對(duì)MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠脾臟的影響
    1 對(duì)象和方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的來源、飼養(yǎng)及繁育
        1.2 主要儀器
        1.3 主要試劑
        1.4 主要溶液的配制
        1.5 動(dòng)物模型的建立及分組
        1.6 取材和標(biāo)本的制備
        1.7 HE化學(xué)染色
        1.8 統(tǒng)計(jì)方法
    2 結(jié)果
        2.1 脾臟的臟體比
        2.2 HE染色
    3 討論
    4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
附錄
綜述 金屬硫蛋白在多器官中的抗氧化作用
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]Dietary zinc and metallothionein on small intestinal disaccharidases activity in mice[J]. Cuong D Tran,Johanna Cool,Cory J Xian.  World Journal of Gastroenterology. 2011(03)
[3]過氧化氫對(duì)FRTL細(xì)胞線粒體膜電位和超氧化物生成的影響[J]. 李敏,李蘭英,陳祖培,姚小梅.  天津醫(yī)藥. 2010(03)
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