本文關(guān)鍵詞：FGFs在人和小鼠早期牙胚中表達模式的比較及其功能的初步研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：牙齒的發(fā)育是外胚層來源的上皮細胞和顱面神經(jīng)嵴來源的間充質(zhì)細胞間相互作用、相互誘導的極其復雜連續(xù)的過程,包括牙板期,蕾狀期,帽狀期,鐘狀期,分化期,分泌期及最后的牙齒萌發(fā)。目前對牙齒發(fā)育的認識大部分來源于以小鼠為模式生物的牙齒研究,而對人類牙齒發(fā)育的直接研究鮮有報道,同時人與小鼠牙齒無論從發(fā)育周期還是發(fā)育機制上差異都比較大,因此有必要對人的牙齒發(fā)育進行相關(guān)的研究,為再生牙齒提供數(shù)據(jù)支持和理論依據(jù)。 FGFs對多種細胞和組織的增殖和分化,生存和遷移有著重要的作用。以小鼠為牙齒發(fā)育模式動物的研究已經(jīng)證實FGFs在調(diào)控牙齒方面起著重要的作用。在牙齒發(fā)育過程中,幾乎涉及所有的Fgfs及Fgfrs 本研究主要內(nèi)容和結(jié)論如下：一、人類早期牙胚FGFs表達模式研究；運用原位雜交的方法,檢測FGF1,FGF2,FGF3,FGF4,FGF5,FGF7,FGF8,FGF9.FGF10, FGF15/19,FGF18,FGF20和FGF23在人牙齒發(fā)育早期的表達模式。結(jié)果發(fā)現(xiàn)FGF4,FGF7,FGF8,FGF9,FGF10,FGF15/19和FGF18在人類和小鼠早期牙胚表達模式存在較大差異。Fgf4在小鼠牙胚發(fā)育的過程只限定在帽狀期和鐘狀期的釉結(jié)節(jié)表達,而在人牙齒發(fā)育過程中,FGF4在帽狀期和鐘狀期的上皮和間充質(zhì)均有表達。Fgf7在小鼠牙胚發(fā)育的過程中幾乎不表達,而在人牙胚的帽狀期和鐘狀期的上皮和間充質(zhì)均有表達。Fgf8在小鼠牙齒發(fā)育起始時開始在牙上皮表達,到蕾狀期后便不再牙胚表達,而人牙胚中,FGF8在帽狀期和鐘狀期的上皮和間充質(zhì)均有強烈的表達。Fgf9在小鼠牙胚早期上皮和釉結(jié)節(jié)有較少量表達,而在人牙胚中,FGF9在帽狀期和鐘狀期上皮和間充質(zhì)均有強烈表達。Fgfl0在小鼠牙齒發(fā)育起始期就開始在牙胚上皮表達,在隨后的蕾狀期,帽狀期和鐘狀期則均在間充質(zhì)表達,而在人牙早期發(fā)育中幾乎不表達。Fgf15/19在小鼠牙板期開始表達,到蕾狀期不表達,帽狀期時則限制在釉結(jié)節(jié)表達,到鐘狀期,Fgf15/19的表達轉(zhuǎn)移到次生釉結(jié)節(jié)下方的間充質(zhì),而在人牙胚中,FGFl5/19在帽狀期和鐘狀期的上皮和間充質(zhì)均有表達。Fgf18在只在小鼠牙板期,蕾狀期和帽狀期的間充質(zhì)表達,而在人的帽狀期和鐘狀期上皮和間充質(zhì)均有強烈表達。二、FGFs在哺乳動物牙齒發(fā)育功能的研究。本研究利用慢病毒異位表達技術(shù),在小鼠牙胚異位表達Fgf7,Fgf9,Fgf17和Fgfl8。重組實驗證實Fgf18能夠延緩小鼠牙齒的發(fā)育速率,Fgf18可能是調(diào)控牙齒發(fā)育速率的關(guān)鍵因子之一。
【關(guān)鍵詞】：人類牙齒發(fā)育 FGF信號通路 FGF18 FGFs表達模式
【學位授予單位】：福建師范大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R329.2
【目錄】：

• 中文摘要2-4
• Abstract4-6
• 中文文摘6-9
• 目錄9-13
• 緒論13-27
• 1、牙齒發(fā)育13-27
• 1. 哺乳動物牙齒發(fā)育過程13-16
• 2. 哺乳動物牙齒發(fā)育機制16-24
• 2.1 顱面神經(jīng)嵴在牙齒早期發(fā)育中的作用16
• 2.2 牙齒發(fā)育早期牙上皮與牙間充質(zhì)相互作用16
• 2.3 牙齒發(fā)育的分子機制16-24
• 2.3.1 WNTs16
• 2.3.2 BMPs16-17
• 2.3.3 SHH17-18
• 2.3.4 FGFs18-23
• 2.3.5 信號通路間的交互作用23-24
• 2、原位雜交24-25
• 3、利用慢病毒進行過表達技術(shù)25-26
• 4、研究意義26-27
• 第1章 材料和方法27-43
• 1.1 材料27-31
• 1.1.1 材料來源27
• 1.1.2 實驗動物27
• 1.1.3 細胞27
• 1.1.4 菌株和質(zhì)粒載體27
• 1.1.5 主要實驗儀器27-28
• 1.1.6 主要實驗試劑28
• 1.1.7 常用培養(yǎng)基及緩沖液28-29
• 1.1.8 原位雜交試劑29-31
• 1.2 方法31-43
• 1.2.1 人/小鼠牙胚總RNA的提取31-32
• 1.2.2 總RNA反轉(zhuǎn)為cDNA32
• 1.2.3 RT-PCR(Reverse transcription-PCR)32-33
• 1.2.4 Real-time PCR33
• 1.2.5 重組質(zhì)粒構(gòu)建33-35
• 1.2.6 原位雜交35-38
• 1.2.7 慢病毒的生產(chǎn)38-40
• 1.2.7.1 大量提取慢病毒包裝質(zhì)粒38-39
• 1.2.7.2 293T細胞的培養(yǎng)39
• 1.2.7.3 磷酸鈣法轉(zhuǎn)染293T細胞產(chǎn)慢病毒39-40
• 1.2.7.4 慢病毒上清液的濃縮40
• 1.2.7.5 濃縮慢病毒滴度測定40
• 1.2.8 嵌合體過表達/重組技術(shù)40-41
• 1.2.8.1 E13.5小鼠牙胚間充質(zhì)細胞的分離40
• 1.2.8.2 慢病毒感染E13.5小鼠牙胚間充質(zhì)細胞40-41
• 1.2.8.3 E11.5小鼠牙胚上皮的分離41
• 1.2.8.4 嵌合體重組41
• 1.2.8.5 小鼠腎囊膜移植41
• 1.2.8.6 嵌合體取材、固定、包埋及切片41
• 1.2.9 HE(Hematoxylin and Eosin)和AZAN染色41-42
• 1.2.10 石蠟切片免疫組化42-43
• 第2章 結(jié)果43-65
• 2.1 人類早期牙胚FGFs表達模式研究43-57
• 2.1.1 人類早期牙胚FGFs表達模式的初步確定43-44
• 2.1.2 人FGFs基因的克隆及探針制備44-45
• 2.1.3 人類早期牙胚FGFs的表達模式檢測45-57
• 2.1.3.1 FGF1在人類早期牙胚的表達模式45-46
• 2.1.3.2 FGF2在人類早期牙胚的表達模式46-48
• 2.1.3.3 FGF3在人類早期牙胚的表達模式48-49
• 2.1.3.4 FGF4在人類早期牙胚的表達模式49-50
• 2.1.3.6 FGF7在人類早期牙胚的表達模式50-51
• 2.1.3.7 FGF8在人類早期牙胚的表達模式51-53
• 2.1.3.8 FGF9在人類早期牙胚的表達模式53-54
• 2.1.3.9 FGF10在人類早期牙胚的表達模式54-55
• 2.1.3.10 FGF15/19在人類早期牙胚的表達模式55-56
• 2.1.3.11 FGF18在人類早期牙胚的表達模式56-57
• 2.2 FGFs在哺乳動物牙齒發(fā)育功能的研究57-65
• 2.2.1 慢病毒質(zhì)粒載體的構(gòu)建及慢病毒的制備57-59
• 2.2.2 小鼠間充質(zhì)分別過表達Fgf7,Fgf9,Fgf17和Fgf18體系的建立59-61
• 2.2.3 Fgf7,Fgf9,Fgf17和Fgf18在小鼠牙齒發(fā)育功能的初步研究61-65
• 2.2.3.1 Fgf7的過表達并未明顯影響小鼠牙齒的發(fā)育61-62
• 2.2.3.2 Fgf9的過表達并未明顯影響小鼠牙齒的發(fā)育62
• 2.2.3.3 Fgf17的過表達并未明顯影響小鼠牙齒的發(fā)育62
• 2.2.3.4 FgF18的達能夠明顯延緩小鼠牙齒的發(fā)育速率62-65
• 第3章 分析與討論65-71
• 3.1 FGFs參與調(diào)控哺乳動物牙齒發(fā)育的調(diào)控65-68
• 3.2 FGF18參與調(diào)控小鼠牙齒發(fā)育速率68-69
• 3.3 研究人類牙齒發(fā)育特性的重要性69-71
• 第4章 結(jié)論71-73
• 4.1 FGFs參與調(diào)控哺乳動物牙齒發(fā)育的調(diào)控71
• 4.2 FGF18參與調(diào)控小鼠牙齒發(fā)育速率71-73
• 附錄73-89
• 附錄1 基因和蛋白質(zhì)符號說明73-74
• 附錄2 引物74-76
• 附錄3 質(zhì)粒載體76-77
• 附錄4 測序報告單77-89
• 參考文獻89-99
• 攻讀學位期間承擔的科研任務(wù)與主要成果99-101
• 致謝101-105
• 個人簡歷105-107

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 Audrey Rakian;Wu-Chen Yang;Jelica Gluhak-Heinrich;Yong Cui;Marie A Harris;Demitri Villarreal;Jerry Q Feng;Mary MacDougall;Stephen E Harris;;Bone morphogenetic protein-2 gene controls tooth root development in coordination with formation of the periodontium[J];International Journal of Oral Science;2013年02期

2 ;Making a tooth:growth factors,transcription factors,and stem cells[J];Cell Research;2005年05期

  本文關(guān)鍵詞：FGFs在人和小鼠早期牙胚中表達模式的比較及其功能的初步研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：358773