發(fā)布時(shí)間：2022-01-12 16:41

　　目的建立人巨細(xì)胞病毒（Human cytomegalovirus,HCMV）原發(fā)感染BALB/c小鼠模型,觀察HCMV持續(xù)性感染對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶能力影響及小鼠的中樞神經(jīng)系統(tǒng)病理變化,初步探討HCMV感染導(dǎo)致小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙發(fā)生的可能時(shí)間,以期為HCMV感染與阿爾茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）的病因?qū)W研究及發(fā)生機(jī)制提供新的依據(jù)。方法將HCMV AD169株在人胚胎成纖維細(xì)胞（HF）上增殖傳代,并經(jīng)三次空斑技術(shù)純化后用作接種小鼠毒種;選用健康6⁸周齡SPF級(jí)BALB/c小鼠35只,隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組,即病毒感染組,對(duì)照組設(shè)為兩組,即滅活病毒組和HF細(xì)胞對(duì)照組。病毒感染組小鼠15只,每只腹腔注射1.8×107PFU的HCMV懸液;滅活病毒組小鼠10只,每只腹腔注射經(jīng)56℃,30min滅活的1.8×107PFU的HCMV懸液;HF細(xì)胞對(duì)照組小鼠10只,每只腹腔注射1×105同株同代HF細(xì)胞懸液。以上三組小鼠在屏蔽系統(tǒng)中繼續(xù)飼養(yǎng)3個(gè)月（期間密切觀察小鼠一般狀況和體重變化）后,通過(guò)自主活動(dòng)實(shí)驗(yàn)、Morris水迷宮、跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)小鼠行為學(xué)有無(wú)改變;在確定實(shí)驗(yàn)... 

【文章來(lái)源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

三組小鼠定位航行實(shí)驗(yàn)的軌跡圖

3.2.2.2 空間搜索實(shí)驗(yàn)結(jié)果訓(xùn)練的第7天，撤去水下平臺(tái)，將小鼠從原平臺(tái)所在區(qū)域相對(duì)的象限釋放入水。不同組小鼠進(jìn)行空間搜索實(shí)驗(yàn)的游泳軌跡，如圖4所示，HF細(xì)胞對(duì)照組與滅活病毒對(duì)照組的小鼠仍然會(huì)向原平臺(tái)區(qū)域進(jìn)行搜索，且在原平臺(tái)放置象限搜索時(shí)間較長(zhǎng)，能夠多次穿過(guò)原來(lái)平臺(tái)所在的位置（圖4A、B），而病毒感染組小鼠進(jìn)行的搜索，以原平臺(tái)所在象限外的區(qū)域?yàn)槎啵瑳]有穿過(guò)原來(lái)平臺(tái)所在的位置（圖4C）；圖4 三組小鼠空間搜索實(shí)驗(yàn)的軌跡圖Fig.4 The locus of probe trial test of mice in three groups空間搜索實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2，對(duì)小鼠第一次穿過(guò)原平臺(tái)的時(shí)間進(jìn)行分析，病毒感染組小鼠（69.26±31.40）s明顯長(zhǎng)于HF細(xì)胞對(duì)照組（41.07±27.07）s和滅活病毒組（41.91±23.94）s，三組間差異有顯著性（F＝4.141，P<0.05）

281 2 3 4 5 6 1 2 3 4 5 6圖5 三組小鼠大腦皮質(zhì)HCMV UL 83(A)和UL 54(B)基因PCR產(chǎn)物電泳結(jié)果Fig.5 Results of PCR product of HCMV UL83 (A) and UL54(B) gene in brain of mice泳道 1：DL 2000 DNA 分子量標(biāo)準(zhǔn) lane1：DL2000 DNAMarker泳道 2：PCR 陰性對(duì)照 lane2：negative control泳道 3：PCR 陽(yáng)性對(duì)照 lane3：positive control泳道 4：滅活病毒組大腦皮質(zhì) PCR 結(jié)果 lane4：PCR product of brain in inactivated HCMV group泳道 5：HF 對(duì)照組大腦皮質(zhì) PCR 結(jié)果 lane5：PCR product of brain in HF control group泳道 6：病毒感染組大腦皮質(zhì) PCR 結(jié)果 lane6：PCR product of brain in HCMV infectedgroup1 2 3 4 5 6 1 2 3 4 5 6圖6 三組小鼠大腦皮質(zhì)HCMV UL83(A)和UL54(B)基因RT-PCR產(chǎn)物電泳結(jié)果Fig.6 Results of RT-PCR product of HCMV UL83 (A) and UL54(B) gene in brain of mice泳道 1：DL 2000 DNA 分子量標(biāo)準(zhǔn) lane1：DL2000 DNAMarker250bpA BAB750bp750bp100bp100bp

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]人巨細(xì)胞病毒蝕斑實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化及在抗病毒物質(zhì)活性測(cè)定中的應(yīng)用[J]. 張俊玲,王明麗.  安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2007(05)
[2]人巨細(xì)胞病毒AD169株引起小鼠腦部畸形的初步探討[J]. 謝妮,陳利玉,戴橄,鄔國(guó)軍,羅敏華,袁建輝.  湖南醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2003(03)
[3]人巨細(xì)胞病毒先天性感染胎鼠致肝臟損傷的小鼠模型[J]. 湯正好,王明麗,袁中玉,李京培.  中華傳染病雜志. 2001(06)
[4]人巨細(xì)胞病毒先天性中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染小鼠模型的建立[J]. 王明麗,唐久來(lái),胡聞,史百芬,胡勇,畢克菊,李京培.  動(dòng)物學(xué)報(bào). 2000(02)
[5]人巨細(xì)胞病毒小鼠模型的建立[J]. 李天憲,趙林,馮鋒,陳繩亮,夏萍.  微生物學(xué)報(bào). 1996(04)



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