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MTB快速液體培養(yǎng)和改良L-J培養(yǎng)INH藥敏結(jié)果不一致原因探討

發(fā)布時(shí)間:2017-05-11 23:09

  本文關(guān)鍵詞:MTB快速液體培養(yǎng)和改良L-J培養(yǎng)INH藥敏結(jié)果不一致原因探討,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的探討結(jié)核分枝桿菌BACTEC MGIT960快速液體培養(yǎng)和改良羅氏培養(yǎng)法異煙肼藥敏結(jié)果不一致的原因。 方法(1)采取的標(biāo)本是BACTEC MGIT960快速液體培養(yǎng)法和改良L-J培養(yǎng)法異煙肼藥敏結(jié)果不一致的20對臨床分離株,每對菌株分為a茵(BACTEC MGIT960快速培養(yǎng)結(jié)果為異煙肼耐藥)和b菌(改良L-J培養(yǎng)法結(jié)果為異煙肼敏感)。(2)聯(lián)合應(yīng)用VNTR和Spoligotyping兩種基因分型方法對20對結(jié)核分枝桿菌菌株進(jìn)行基因分型鑒定,判斷是否為同源菌株。(3)通過對結(jié)核分枝桿菌INH耐藥基因測序鑒定是否為異煙肼耐藥。(4)通過Brooth7H9液體培養(yǎng)和改良羅氏培養(yǎng)兩種方法分別對同一患者同次送痰的20對BACTEC MGIT960快速液體培養(yǎng)和改良羅氏培養(yǎng)法藥敏檢測結(jié)果不一致的結(jié)核分枝桿菌菌株進(jìn)行異煙肼的MIC測定。 結(jié)果(1)基因分型結(jié)果:在本研究的20對結(jié)核分枝桿菌臨床分離株中,基因分型相同菌株16對,基因分型不同菌株4對。(2)異煙肼耐藥基因測序結(jié)果:在16對基因分型相同菌株中, INH耐藥基因突變菌株12對,無INH耐藥基因突變菌株3對,1對結(jié)果不確定;在4對基因分型不同的菌株中, INH耐藥基因突變菌株3對,無INH耐藥基因突變菌株1對。MGIT960系統(tǒng)總的符合率為π=12/15=80%。改良L-J總的符合率為π=3/15=20%(3)異煙肼MIC值結(jié)果:a組菌分別用7H9液體培養(yǎng)及L-J固體培養(yǎng)比較異煙肼MIC值,P值為0.0000.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;b組菌分別用7H9液體培養(yǎng)及L-J固體培養(yǎng)法比較異煙肼MIC值, P值為0.0000.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 結(jié)論(1)16對菌株Spoligotyping與VNTR基因分型均一致,說明為同源菌株;4對結(jié)核分枝桿菌菌株基因分型不同,說明為非同源菌株,病人可能存在多重感染。(2)在16對同源菌株中:有12對同源菌株發(fā)生了INH耐藥基因突變,說明這12對菌株為INH耐藥,且與BACTTEC MGIT960系統(tǒng)的藥敏檢測結(jié)果相符合;有3對同源菌株未發(fā)生INH耐藥基因突變,說明這3對菌株為INH敏感,且與改良L-J培養(yǎng)方法的藥敏檢測結(jié)果相符合;有1對結(jié)果不確定。(3)12對同源菌株BACTEC MGIT960快速培養(yǎng)法和改良L-J培養(yǎng)法異煙肼MIC值結(jié)果不一致,且L-J固體培養(yǎng)法測得的INH MIC值比用7H9液體培養(yǎng)法測得的明顯高。對于這些特殊結(jié)核分枝桿菌,當(dāng)不同方法測得的藥敏結(jié)果不一致時(shí)需要考慮到特殊細(xì)菌的不同方法檢測的MIC值及藥敏臨界值不同的問題。(4)對于藥敏結(jié)果存在差羿的部分特殊耐藥結(jié)核分枝桿菌菌株,在進(jìn)行耐藥性評價(jià)時(shí)應(yīng)考慮是否存在多重感染、羿質(zhì)性耐藥及藥敏方法的不同,了解其耐藥程度,更好地指導(dǎo)臨床用藥、個(gè)體化治療,更有效地控制結(jié)核病及耐藥結(jié)核病的傳播。
【關(guān)鍵詞】:結(jié)核分枝桿菌 藥物敏感性 MGIT液體培養(yǎng) 改良羅氏培養(yǎng) 基因分型最低抑菌濃度 (MIC)異質(zhì)性耐藥
【學(xué)位授予單位】:天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R378.911;R446.5
【目錄】:
  • 中文摘要4-6
  • Abstract6-10
  • 縮略語/符號說明10-12
  • 前言12-15
  • 研究現(xiàn)狀、成果12-14
  • 研究目的、方法14-15
  • 1 材料15-18
  • 1.1 菌株情況15
  • 1.2 培養(yǎng)基配制15-16
  • 1.3 常用試劑配制16
  • 1.4 主要試劑16
  • 1.5 主要儀器及設(shè)備16-17
  • 1.6 引物設(shè)計(jì)17-18
  • 2 方法18-24
  • 2.1 技術(shù)路線18-19
  • 2.2 結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)及滅活19
  • 2.3 主要試劑19
  • 2.4 試驗(yàn)步驟19-24
  • 2.4.1 菌種鑒定19-20
  • 2.4.2 Spoligotyping和MIRU-VNTR基因分型方法20-23
  • 2.4.3 異煙肼耐藥基因測序23
  • 2.4.4 結(jié)核分枝桿菌異煙肼MIC測定23-24
  • 2.4.5 數(shù)據(jù)處理24
  • 3 結(jié)果24-36
  • 3.1 患者基本情況24-25
  • 3.2 Spoligotyping和MIRU-VNTR基因分型結(jié)果25-28
  • 3.3 異煙肼耐藥基因測序28-31
  • 3.4 12對結(jié)核分枝桿菌異煙肼MIC測定結(jié)果31-35
  • 3.5 結(jié)果小結(jié)35-36
  • 4 討論36-46
  • 4.1 Spoligotyping和MIRU-VNTR的結(jié)果討論36-38
  • 4.2 結(jié)核分枝桿菌耐INH機(jī)制及INH耐藥基因測序結(jié)果討論38-41
  • 4.3 12對同源結(jié)核分枝桿菌7H9液體培養(yǎng)法和改良L-J培養(yǎng)法INH MIC測定結(jié)果討論41-46
  • 結(jié)論46-47
  • 參考文獻(xiàn)47-52
  • 發(fā)表論文和參加科研情況說明52-53
  • 附錄53-55
  • 綜述55-73
  • 綜述參考文獻(xiàn)68-73
  • 致謝73

【參考文獻(xiàn)】

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中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 李霞;張鷹;高謙;桂曉紅;沈鑫;梅建;;利用基因型分型技術(shù)研究有治療史的結(jié)核病患者耐藥產(chǎn)生的原因[A];中華醫(yī)學(xué)會結(jié)核病學(xué)分會2006年學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2006年


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本文編號:358261

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