本文關(guān)鍵詞：白色念珠菌感染兔模型中Sap2和Hsp90抗原抗體產(chǎn)生情況的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：白色念珠菌是一種條件致病菌，是臨床真菌感染中最常見的病原菌。目前,侵襲性白色念珠菌感染的發(fā)病率呈逐漸上升趨勢,其發(fā)病機制復(fù)雜。近年來，臨床白色念珠菌感染的比例明顯增加，但是由于白色念珠菌感染情況復(fù)雜且缺乏明顯的臨床癥狀，導(dǎo)致檢測困難。目前對于白色念珠菌感染的診斷還沒有形成一種被廣泛認(rèn)可的，有效、簡單、無創(chuàng)的病理學(xué)診斷方法。 Hsp90和Sap2是白色念珠菌重要的毒性分子，，能夠誘導(dǎo)機體產(chǎn)生保護(hù)性抗體，在白色念珠菌感染過程中起著重要的作用。Sap2是一種蛋白水解酶，在感染的早期發(fā)揮作用，參與降解宿主組織、逃避免疫保護(hù)等。Hsp90是白色念珠菌感染后產(chǎn)生的毒性分子，作為分子伴侶，在白色念珠菌感染過程中發(fā)揮重要作用。近幾年的研究表明Hsp90和Sap2在白色念珠菌的診斷、治療和免疫保護(hù)等方面起著重要作用。 本實驗利用課題組構(gòu)建保存的pET28a-Sap2、pET28a-Hsp90原核表達(dá)載體，制備出了純度較高的Hsp90和Sap2重組蛋白。利用制備的重組蛋白成功獲得了特異性較高的多克隆抗體。選擇體重相似的大耳白兔16只，向14只免疫抑制的實驗組白兔耳緣靜脈注1ml5107個白色念珠菌，向2只對照組注射1ml生理鹽水，建立白色念珠菌感染動物模型。利用間接ELISA的方法檢測了感染過程中兔體內(nèi)抗體的變化情況，利用間接競爭ELISA的方法檢測了抗原的變化。實驗發(fā)現(xiàn)，對照組的Hsp90和Sap2抗原、抗體水平無顯著變化，實驗組在感染周期Hsp90和Sap2抗原及其抗體各自產(chǎn)生規(guī)律性的變化。通過分析兩種抗原、抗體出現(xiàn)時間的特點，可以推斷疾病的進(jìn)展程度，對白色念珠菌的早期檢測具有重要的意義
【關(guān)鍵詞】：白色念珠菌感染 Sap2 Hsp90 抗原抗體檢測
【學(xué)位授予單位】：東北師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R378
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-6
• 目錄6-8
• 引言8-13
• 1．白色念珠菌感染8
• 2．白色念珠菌的兩種免疫優(yōu)勢抗原——Sap2 和 Hsp908-11
• 2.1 Sap2 的研究現(xiàn)狀8-9
• 2.2 Hsp90 的研究現(xiàn)狀9-11
• 3.白色念珠菌感染檢測的研究進(jìn)展11-12
• 3.1 免疫學(xué)診斷方法11
• 3.2 分子生物學(xué)診斷方法11-12
• 4.本研究的內(nèi)容及意義12-13
• 實驗材料與方法13-19
• 1.實驗材料13
• 2.實驗儀器及試劑13-14
• 2.1 實驗儀器13
• 2.2 常用生化試劑13-14
• 2.3 主要器械與耗材14
• 3.實驗方法14-19
• 3.1 Sap2 和 Hsp90 重組蛋白的制備及純化14-15
• 3.2 Sap2 和 Hsp90 重組蛋白的抗原性分析15
• 3.3 Sap2 和 Hsp90 多克隆抗體的制備及純化15-16
• 3.4 白色念珠菌感染兔模型的構(gòu)建16-17
• 3.5 血清中白色念珠菌 Sap2 和 Hsp90 抗原、抗體的檢測17-19
• 實驗結(jié)果與分析19-32
• 1. Sap2 和 Hsp90 重組蛋白的純化及抗原性分析19-20
• 1.1 Sap2 和 Hsp90 重組蛋白的純化19
• 1.2 Sap2 和 Hsp90 重組蛋白的抗原性分析19-20
• 2. Sap2 和 Hsp90 多克隆抗體的效價測定及純化20-23
• 2.1 抗 Sap2 和 Hsp90 血清效價的測定20-22
• 2.2 Sap2 和 Hsp90 多克隆抗體的純化22
• 2.3 多克隆抗體的特異性鑒定22-23
• 3. 利用 ELISA 方法測定白色念珠菌感染兔模型中 Sap2 和 Hsp90 抗原抗體產(chǎn)生情況23-32
• 3.1 成功構(gòu)建白色念珠菌感染兔模型23
• 3.2 白色念珠菌感染兔模型中 Sap2 和 Hsp90 抗體產(chǎn)生規(guī)律的測定23-25
• 3.3 白色念珠菌感染兔模型中 Sap2 和 Hsp90 抗原產(chǎn)生規(guī)律的測定25-28
• 3.4 Sap2 抗原和抗體以及 Hsp90 抗原和抗體變化情況的綜合分析28-32
• 討論32-36
• 結(jié)論36-37
• 參考文獻(xiàn)37-41
• 致謝41

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 趙丹慧,張艷,袁越,李成文;重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2抗體的制備及純化[J];中國生物工程雜志;2005年07期

2 劉飛,金伯泉,朱勇,歐陽為明,張新海,謝鑫,陳麗華;Notch信號途徑效應(yīng)分子HES1的原核表達(dá)及其多克隆抗體的制備與鑒定[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2002年04期

  本文關(guān)鍵詞：白色念珠菌感染兔模型中Sap2和Hsp90抗原抗體產(chǎn)生情況的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：356497