發(fā)布時間：2022-01-02 06:25

　　目的:使用化學(xué)致癌劑4-硝基喹啉-1-氧化物（4-nitro-quinoline 1-oxide,4-NQO）誘導(dǎo)并建立C57BL/6小鼠口腔鱗癌病變模型。方法:將4-NQO加入小鼠飲水,觀察小鼠口腔黏膜的變化。于第12、16、20、24周處死,采集病變組織的樣本,確定病變性質(zhì),并分離、培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞。結(jié)果:實驗組小鼠在16周后口腔黏膜有明顯的外生性腫物發(fā)生,直徑約0.2 mm。小鼠口腔黏膜腫物H-E染色結(jié)果顯示,腫物呈外生性或浸潤性生長,可見角化珠和明顯的核分裂象。細(xì)胞呈多邊形,貼壁牢固,CK、Ki-67染色陽性,表明此細(xì)胞為鱗癌細(xì)胞。結(jié)論:該模型誘導(dǎo)過程與人口腔鱗癌發(fā)病過程相似,是理想的研究口腔鱗癌發(fā)生、發(fā)展機(jī)制的動物模型。 

【文章來源】：中國口腔頜面外科雜志. 2019,17(04)

【文章頁數(shù)】：4 頁

【部分圖文】：

JC1細(xì)胞在正常培養(yǎng)下的凋亡情況Figure6ApoptoticrateofJC1cellsunderregularcultureconditions

殖標(biāo)志物Ki-67染色均為陽性（圖3）。2.3小鼠原代腫瘤細(xì)胞鑒定對小鼠原代腫瘤細(xì)胞進(jìn)行特異性生物標(biāo)志物檢測，鑒定細(xì)胞來源。應(yīng)用免疫熒光技術(shù)對小鼠原代腫瘤細(xì)胞進(jìn)行染色，染色結(jié)果顯示，上皮特異性生物標(biāo)志物CK、上皮細(xì)胞間充質(zhì)轉(zhuǎn)化標(biāo)志物Vimentin和增殖標(biāo)志物Ki-67染色均為陽性（圖4）。2.4小鼠原代腫瘤細(xì)胞增殖與遷移檢測結(jié)果應(yīng)用RCTA1.2軟件對小鼠原代腫瘤細(xì)胞進(jìn)行增殖與遷移的檢測。應(yīng)用RTCA1.2軟件繪制細(xì)胞增殖曲線，曲線呈典型的“S”形，對數(shù)生長期大約在5～10h（圖5A）。應(yīng)用RTCA1.2軟件進(jìn)行細(xì)胞遷移檢測，并繪制遷移曲線（圖5B）。2.5小鼠原代腫瘤細(xì)胞凋亡檢測結(jié)果應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)檢測小鼠原代腫瘤細(xì)胞凋亡情況，結(jié)果顯示，在常規(guī)DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)24h后，小鼠原代腫瘤細(xì)胞出現(xiàn)凋亡，且以晚期凋亡為主，占14.5%（Q2），早期凋亡占4.72%（Q3）。與其他口腔腫瘤細(xì)胞系的凋亡情況相近，也進(jìn)一步證明了該細(xì)胞擁有口腔腫瘤細(xì)胞特性（圖6）。3討論本實驗選用4-NQO作為誘癌劑，C57BL/6小鼠作為實驗對象，成功構(gòu)建了口腔鱗癌模型。誘導(dǎo)方法自然、簡便，選用的小鼠親緣性更接近于人類，誘導(dǎo)出的腫瘤能夠較好地反映人類口腔鱗癌的生物學(xué)特征[10]。目前已有多種轉(zhuǎn)基因或基因敲除小鼠，但用于圖6JC1細(xì)胞在正常培養(yǎng)下的凋亡情況Figure6ApoptoticrateofJC1cellsunderregularcultureconditions圖4JC1細(xì)胞的免疫熒光染色(比例尺為100μm)Figure4ImmunofluorescencestainingofJC1cells(scalebar=100μm)圖3免疫組織化學(xué)CK、Ki-67?


本文編號：3563656