我國遼寧病毒分離鑒定及其分子特征研究
本文關(guān)鍵詞:我國遼寧病毒分離鑒定及其分子特征研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:遼寧病毒(Liao ning virus,LNV)屬于呼腸孤病毒科(Reoviridae) Seadorna病毒屬,為12節(jié)段dsRNA無包膜病毒。遼寧病毒于1997年首次分離自東北吉林白城附近的黑水鎮(zhèn)的背點伊蚊,之后又陸續(xù)在我國的新疆、山西、青海、甘肅地區(qū)的背點伊蚊及兇小庫蚊等多種蚊蟲媒介中分離到。目前研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),遼寧病毒可分為2個基因型(Genotype1和Genotype2,代表株分別為NE97-12、NE97-31)。其中Genotype2自1997年分離自我國吉林地區(qū)后,至今未再次分離到。為進一步了解遼寧病毒分布變遷規(guī)律及分子特征,本課題選取遼寧、新疆及云南3省(自治區(qū))的部分地區(qū)進行遼寧病毒調(diào)查,并對新分離的遼寧病毒進行分子特征分析。 1.我國遼寧、新疆及云南省遼寧病毒調(diào)查 選擇適合蚊蟲繁殖的季節(jié),使用誘蚊燈等采集工具進行蚊蟲標(biāo)本采集,將采集到的蚊蟲標(biāo)本進行分類裝管、冷鏈運輸、液氮保存,經(jīng)研磨后接種細胞C6/36細胞系及BHK-21細胞系進行病毒分離,細胞陽性分離物用分子生物學(xué)的方法進行鑒定。結(jié)果2012年8月,在遼寧省共采集到蚊蟲標(biāo)本3292只,其中中華按蚊(2552只,77.5%)為優(yōu)勢蚊種,從這些標(biāo)本中共分離到2株遼寧病毒,分別來自中華按蚊、背點伊蚊。2011年5-8月,在新疆維吾爾自治區(qū)喀什地區(qū)采集到蚊蟲標(biāo)本26155只,從這些標(biāo)本中共得到共得到19株遼寧病毒,分別來自黃背伊蚊、里海伊蚊及尖音庫蚊。2011年4月及8月,在云南省西雙版納州共采獲蚊蟲5屬29種共13337只,其中三帶喙庫蚊(10667只)為當(dāng)?shù)貎?yōu)勢蚊種,在標(biāo)本中未檢測到遼寧病毒核酸也未分離到該病毒;也未檢測到流行性乙型腦炎病毒、版納病毒、甲病毒屬、環(huán)狀病毒等多種蟲媒病毒核酸。以往研究結(jié)果表明遼寧病毒只分布在我國高緯度地區(qū),本次在2011年云南省西雙版納州的蚊蟲標(biāo)本中未檢測到該病毒的結(jié)果與此相符。這些新分離遼寧病毒中,新疆分離株與NE97-12同源性高于NE97-31,而遼寧省分離株與NE97-31的同源性最高。本研究系首次明確報道在尖音庫蚊、黃背伊蚊、里海伊蚊及中華按蚊中分離到遼寧病毒。 2.新分離遼寧病毒分子特征研究 將新分離遼寧病毒株匯總,使用分離生物學(xué)方法測得所有毒株第10片段及第12片段的序列,使用生物信息學(xué)軟件對毒株的核苷酸、氨基酸序列進行分子特征分析及系統(tǒng)進化分析。結(jié)果顯示新疆新分離遼寧病毒株屬Genotype1;遼寧省新分離株屬Genotype2。系統(tǒng)進化分析結(jié)果顯示新疆地區(qū)新分離遼寧病毒株屬Genotype1,遼寧地區(qū)分離株屬Genotype2;這是1997年首次在東北地區(qū)分離遼寧病毒近15年后再次分離到該病毒,同時也是1997年以后在我國首次分離到Genotype2毒株;此外初步判斷該病毒在我國高緯度地區(qū)的分布特征,證實該病毒有與病毒分布特征相一致的進化特征。 本課題的意義 本課題對遼寧、新疆和云南省部分地區(qū)進行了遼寧病毒調(diào)查,在遼寧省首次分離到遼寧病毒,也是1997年后在我國再次分離到基因2型遼寧病毒株。此外在新疆分離到多株遼寧病毒。說明當(dāng)?shù)匚孟x中一直存在遼寧病毒的流行并進一步證實該病毒在我國高緯度地區(qū)分布的規(guī)律。這些數(shù)據(jù)豐富了我國遼寧病毒的研究,為了解遼寧病毒遺傳變異及遷徙提供了重要的信息。對我國新分離到的遼寧病毒進行分子特征分析,明確了這些病毒的分類地位及與國內(nèi)外分離株之間的分子生物學(xué)差異。此項研究是多年以來對當(dāng)?shù)叵x媒病毒調(diào)查的基礎(chǔ)上的持續(xù)研究,將為我國遼寧病毒的變遷,遺傳變異及其與當(dāng)?shù)丶膊×餍嘘P(guān)系提供重要的科學(xué)數(shù)據(jù),疾病的預(yù)防與控制具有重要科學(xué)意義。
【關(guān)鍵詞】:遼寧病毒 蟲媒病毒 遼寧省 新疆 云南省 分子特征
【學(xué)位授予單位】:中國疾病預(yù)防控制中心
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R373
【目錄】:
- 英文縮略語5-6
- 中文摘要6-8
- Abstract8-11
- 前言11-12
- 第一章 遼寧、新疆及云南省遼寧病毒分離鑒定12-46
- 第一節(jié) 2012年遼寧省部分地區(qū)遼寧病毒分離鑒定12-27
- 1 材料和方法13-20
- 2 結(jié)果與分析20-24
- 3 病毒鑒定24-25
- 4 討論25-27
- 第二節(jié) 2011年新疆部分地區(qū)遼寧病毒分離鑒定27-39
- 1 材料和方法27-30
- 2 結(jié)果與分析30-35
- 3 病毒鑒定35-36
- 4 討論36-39
- 第三節(jié) 2011年云南省部分地區(qū)遼寧病毒分離鑒定39-45
- 1 材料和方法39-42
- 2 結(jié)果與分析42-44
- 3 病毒檢測44
- 4 討論44-45
- 本章小結(jié)45-46
- 第二章 我國遼寧及新疆新分離遼寧病毒分子特征研究46-89
- 1 材料和方法46-48
- 2 結(jié)果與分析48-86
- 3 討論86-87
- 本章總結(jié)87-89
- 參考文獻89-94
- 綜述94-103
- 參考文獻98-103
- 附錄103-130
- 個人簡歷130-131
- 致謝131-132
【參考文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
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本文關(guān)鍵詞:我國遼寧病毒分離鑒定及其分子特征研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號:356227
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