本文關鍵詞：長春地區(qū)EV71的分離鑒定及疏清顆粒的抗病毒藥效學研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：腸道病毒71型(Enterovirus71，EV71)歸屬于小RNA病毒科腸道病毒屬，為單正鏈RNA病毒。EV71是引起手足口病的最主要病原體之一，致病性強、致死率高。目前，手足口病已成為嚴重危害我國少年兒童的重要疾病，在中國被列為丙類傳染病。雖然手足口病已受到衛(wèi)生部門的高度關注，但由于尚缺乏疫苗及有效的抗EV71藥物，時常會有手足口病的局部爆發(fā)。吉林省長春地區(qū)2010年-2012年，每年都有手足口病散發(fā)病例，但尚未見針對這些病例的EV71病原學和藥物的抗EV71研究。傳統(tǒng)中藥具有價格低廉、廣譜抗病毒等優(yōu)點，以疏清顆粒為代表的抗病毒中藥在臨床應用中被發(fā)現(xiàn)有治療手足口病的作用，研究其抗病毒學藥效學作用，解釋其抗病毒機理將為手足口病的治療做出重要貢獻。因此，研究中藥抗病毒藥物或可成為對抗EV71病毒的新方法。 與長春市疾病預防控制中心合作，于2011年共采集到手足口病疑似病例咽拭子、糞便和皰疹液等樣本50份，經中國疾病預防控制中心推薦的EV71RNA檢測試劑盒（熒光PCR法）檢測，，檢出EV71陽性標本5份。將EV71陽性標本進行病毒的分離和鑒定：RD細胞分離培養(yǎng)，接種標本后均出現(xiàn)明顯的細胞病變效應（CPE）,具體表現(xiàn)為RD細胞形態(tài)逐漸變圓，體積縮小，排列較為分散，胞漿內顆粒增加，折光性增強，從培養(yǎng)瓶上脫落。提取病毒RNA，熒光PCR法結果顯示5株病毒均表達出陽性信號，而RT-PCR結果顯示只有1份樣本（EV71長春2011株，EV71CC2011）出現(xiàn)特異性條帶，陽性率為20%。測定CC2011EV71病毒滴度為10~(-6.32)TCID50/ml。疏清顆�？笶V71CC2011藥效學結果為：抑制50％細胞生長的藥物的濃度（CC50）為50.00±0.39mg.ml~(-1)；抑制EV71增殖的半數有效濃度（IC50）為0.136±0.022g·L~(-1)。 本研究成功地從長春地區(qū)感染EV71患兒體內分離出1株EV71臨床株，命名為EV71CC2011。疏清顆�？共《舅幮W研究結果顯示，該藥物具有毒性小，抗病毒作用強等優(yōu)點，且機制研究證實抗EV71作用與抑制EV71的吸附有關。
【關鍵詞】：EV71 病毒分離培養(yǎng) 疏清顆粒 抗病毒藥效學
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R373.2;R285
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-8
• 英文縮寫詞表8-9
• 第1章 緒論9-14
• 1.1 手足口病概述9
• 1.2 手足口病流行病學9
• 1.3 手足口病診斷9-10
• 1.4 EV71 病原學10-11
• 1.5 EV71 病毒復制與感染：11
• 1.6 EV71 的預防11
• 1.7 EV71 的治療11-12
• 1.8 傳統(tǒng)中藥的抗病毒作用12-14
• 第2章 實驗研究14-25
• 2.1 EV71 的病原學研究14-21
• 2.2 藥物抗 EV71 體外研究21-22
• 2.3 結果22-25
• 第3章 討論25-29
• 3.1 EV71 的流行病學25
• 3.2 EV71 分離情況分析25
• 3.3 EV71 抗病毒藥物25-27
• 3.4 藥物的抗病毒作用27-29
• 第4章 結論29-30
• 參考文獻30-33
• 致謝33

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