本文關(guān)鍵詞：中性粒細(xì)胞外陷阱（NETs）殺滅金黃色葡萄球菌及糖皮質(zhì)激素對(duì)其影響的體外研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的： 評(píng)估中性粒細(xì)胞胞外陷阱(NETs)對(duì)金黃色葡萄球菌的體外殺滅作用,并探討糖皮質(zhì)激素對(duì)NETs形成和殺菌效率的影響。 方法： 從健康志愿者外周血中分離出中性粒細(xì)胞,加入一定濃度的金黃色葡萄球菌,免疫熒光染色觀察不同作用時(shí)間的NETs形成,利用IPP顯微鏡圖像分析軟件定量測(cè)定NETs形成率。通過細(xì)胞松弛素D抑制中性粒細(xì)胞的吞噬和脫顆粒,測(cè)定NETs的殺菌效率；以松弛素D預(yù)處理中性粒細(xì)胞后再用DNase破壞NETs結(jié)構(gòu),檢測(cè)無NETs作用下細(xì)菌負(fù)荷量,測(cè)定NETs殺菌效率,分析NETs形成率和NETs殺菌率之間的相關(guān)性。在此基礎(chǔ)上使用三種不同濃度的地塞米松(1,10,100μg/ml)處理中性粒細(xì)胞,加入金黃色葡萄球菌,以同樣方法測(cè)定NETs形成和殺菌效率,分析地塞米松對(duì)NETs形成率和NETs殺菌率的影響。 結(jié)果： 體外中性粒細(xì)胞在金黃色葡萄球菌的刺激下形成NETs,中性粒細(xì)胞在抗感染過程中吞噬作用和NETs同時(shí)存在,NETs的形成率與兩者作用時(shí)間呈正相關(guān),殺菌率在2小時(shí)內(nèi)呈正相關(guān),DNase水解NETs后殺菌率明顯下降。NETs的形成和殺菌率均受地塞米松的影響,中高濃度的地塞米松抑制了NETs的形成和殺菌率。 結(jié)論： 金黃色葡萄球菌能誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞形成NETs,中性粒細(xì)胞在抗感染過程中吞噬作用和NETs同時(shí)存在,NETs具有優(yōu)越的抗菌功能。NETs形成率和殺菌率在一定時(shí)間內(nèi)呈正相關(guān)；糖皮質(zhì)激素可能通過抑制NETs的形成從而抑制了中性粒細(xì)胞的抗感染作用。
【關(guān)鍵詞】：NETs 地塞米松 中性粒細(xì)胞 金黃色葡萄球菌
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R392
【目錄】：

• 致謝4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 縮略詞表9-10
• 目次10-12
• 前言12-14
• 1 材料和方法14-22
• 1.1 材料14-16
• 1.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑14-15
• 1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器15-16
• 1.2 方法16-21
• 1.2.1 細(xì)菌培養(yǎng)16
• 1.2.2 中性粒細(xì)胞分離(不連續(xù)的密度梯度血漿-Percoll離心法)16-17
• 1.2.3 金黃色葡萄球菌感染中性粒細(xì)胞觀察不同作用時(shí)間NETs形成率檢測(cè)17
• 1.2.4 金黃色葡萄球菌感染中性粒細(xì)胞觀察不同作用時(shí)間NETs殺菌率的檢測(cè)17-18
• 1.2.5 DNA酶(DNase Ⅰ)對(duì)NETs形成率的影響18
• 1.2.6 DNA酶(DNase Ⅰ)對(duì)NETs形成率的影響18-19
• 1.2.7 地塞米松對(duì)中性粒細(xì)胞NETs形成率的影響19
• 1.2.8 地塞米松對(duì)中性粒細(xì)胞NETs殺菌率的影響19-20
• 1.2.9 NETs免疫熒光染色20-21
• 1.3 NETs的定量方法21
• 1.4 統(tǒng)計(jì)分析21-22
• 2 結(jié)果22-34
• 2.1 Percoll離心法分離中性粒細(xì)胞22
• 2.2 中性粒細(xì)胞對(duì)金黃色葡萄球菌的吞噬作用22-23
• 2.3 NETs免疫熒光染色23-25
• 2.4 DNA酶(Dnase Ⅰ)對(duì)NETs的作用25-27
• 2.5 中性粒細(xì)胞和金黃色葡萄球菌作用不同時(shí)間NETs的形成率和殺菌率27-30
• 2.6 地塞米松對(duì)NETs形成率的影響30-33
• 2.7 地塞米松對(duì)NETs的殺菌效率的影響33-34
• 3 討論34-38
• 4 結(jié)論38-39
• 參考文獻(xiàn)39-42
• 綜述42-54
• 參考文獻(xiàn)51-54
• 作者簡(jiǎn)歷及在學(xué)期間所取得的科研成果54

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：354684