目的水的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)對維持細(xì)胞的正常代謝具有重要作用。水通道蛋白（Aquaporins, AQPs）作為水選擇性通道家族,在體內(nèi)扮演著重要角色。其中AQP1是發(fā)現(xiàn)最早研究最多的水通道蛋白,參與滲透壓驅(qū)動(dòng)下的水的轉(zhuǎn)運(yùn),介導(dǎo)藥理作用和參與水腫的形成等。它在腎臟、肺、腦,和眼均有表達(dá),其調(diào)節(jié)機(jī)制是復(fù)雜的。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用微管蛋白抑制劑諾考達(dá)唑（Nocodazole）、磷酸肌酸激酶抑制劑碘乙酰胺（Iodacetamide）和呼吸鏈抑制劑分別作用于Balb/c 3T3小鼠成纖維細(xì)胞并觀察AQP1的表達(dá)量的變化,探討能量代謝對AQP1的影響。方法采用體外培養(yǎng)的Balb/c 3T3小鼠成纖維細(xì)胞株。微管蛋白抑制劑諾考達(dá)唑（Nocodazole）、磷酸肌酸激酶抑制劑碘乙酰胺（Iodacetamide）和呼吸鏈抑制劑：一氧化氮（Nitric oxide）、抗霉素A （Antimycin A）、疊氮化鈉（Sodium azide）分別作用于該細(xì)胞,應(yīng)用Western blotting分別檢測細(xì)胞在0小時(shí)、4小時(shí)、6小時(shí)及0小時(shí)、2小時(shí)、4小時(shí)、6小時(shí)、8小時(shí)AQP1的表達(dá).結(jié)果諾考達(dá)唑、碘乙酰胺、一氧化氮、抗霉素A... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：39 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

Noeodazole對成纖維細(xì)胞AQpl表達(dá)的作用

B圖4，IA對成纖維細(xì)胞AQPI表達(dá)的作用。A.不同濃度IA(10娜ol/m20娜。靦l、30娜01/ml)對AQpl表達(dá)的影響(westemblotting)。B.柱狀圖各組AQPI與0h組的相對百分比。相對密度分析表明成纖維細(xì)胞與10娜ol/m作用4h，6h后AQPI表達(dá)量分別增加36.20，0，86.1%;與20腳01/mlIA作用6h后AQPI表達(dá)量分別增加100%，147.7%;與30林mol/mlIA作用4h，6h后A表達(dá)量分別增加224.9%，290.8%。三、呼吸鏈抑制劑對AQPI表達(dá)的影響(一)疊氮化鈉誘導(dǎo)的AQPI表達(dá)呼吸鏈抑制劑疊氮化鈉(Sodiulnazide)與成纖維細(xì)胞作用后，顯微鏡下無明顯形態(tài)學(xué)改變(見圖5)。Westemblotting結(jié)果顯示:sodiumazide與細(xì)胞

Time(Hours)B圖6， Sodiumazide對成纖維細(xì)胞AQPI表達(dá)的作用。A.疊氮化鈉(20Inlnol)與成纖維細(xì)胞孵育oh，Zh，4h，6h，sh之后AQpl的表達(dá) (westernblotting)。B.相對密度分析表明成纖維細(xì)胞與 sodiulnaxide作用2h，4h，6h

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3543410