本文關(guān)鍵詞：凍融—凍干法制備流感疫苗脂質(zhì)體及其細(xì)胞免疫研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：我們?cè)鴮?duì)薄膜分散法制備流感疫苗脂質(zhì)體凍干粉作了系統(tǒng)的研究,并考察了其體液免疫、粘膜免疫和細(xì)胞免疫的效果,免疫原性均有明顯提高。但薄膜分散法由于制備過程中有溫度升高過程,不適用于活疫苗的制備。 本課題在薄膜分散-凍干法的基礎(chǔ)上,進(jìn)行了凍融-凍干法制備工藝的研究,以適應(yīng)減毒活疫苗的制備要求。考察了脂質(zhì)體混懸液制備過程中主要影響因素,以包封率為主要指標(biāo),以正交實(shí)驗(yàn)篩選出最佳處方。對(duì)脂質(zhì)體混懸液和凍干粉的粒子形態(tài),粒徑分布進(jìn)行了分析。以顯微觀察外觀和包封率為指標(biāo)考察了脂質(zhì)體混懸液和凍干粉的穩(wěn)定性,并通過肺部灌注給藥方式免疫清潔級(jí)ICR小鼠,通過MTT法檢測(cè)脾淋巴細(xì)胞的增殖,通過流式細(xì)胞儀檢測(cè)CD4+與CD8+細(xì)胞及CD4/CD8的比值。并將凍融-凍干法與薄膜分散法制備的脂質(zhì)體疫苗的細(xì)胞免疫效果進(jìn)行對(duì)比。 根據(jù)最優(yōu)處方制備的流感疫苗脂質(zhì)體包封率為84.14%,成圓形或橢圓形,粒度分布均勻,平均粒徑1.91μm。考察了在不同的溫度(4℃、25±2℃、40±2℃)條件下的物理穩(wěn)定性。4℃儲(chǔ)存條件下,制備的凍干脂質(zhì)體180天的包封率無(wú)顯著變化,25℃制備的凍干脂質(zhì)體120天的包封率無(wú)顯著變化,穩(wěn)定性良好。而且凍融凍干法全程制備條件溫和,能適應(yīng)流感裂解疫苗脂質(zhì)體制備的特殊要求。細(xì)胞免疫實(shí)驗(yàn)表明凍融-凍干法制備的流感疫苗脂質(zhì)體與薄膜分散法制備的免疫效果無(wú)顯著性差異,均明顯高于疫苗原液腹腔注射給藥,表明凍融-凍干法是一種可行的制備流感疫苗脂質(zhì)體的工藝,為未來(lái)該工藝應(yīng)用于減毒活疫苗奠定了基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：凍融-凍干法 包封率 穩(wěn)定性 細(xì)胞免疫
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R392
【目錄】：

• 中文摘要6-7
• Abstract7-9
• 第一章 前言9-17
• 1 脂質(zhì)體佐劑9-11
• 2 脂質(zhì)體疫苗肺部給藥11-17
• 2.1 肺部藥物吸收的特點(diǎn)11-12
• 2.2 脂質(zhì)體肺部給藥方式及穩(wěn)定性12-15
• 2.3 脂質(zhì)體肺部給藥的安全性15-17
• 第二章 凍融凍干法制備流感疫苗脂質(zhì)體工藝及穩(wěn)定性研究17-32
• 1 材料17-18
• 1.1 流感疫苗17
• 1.2 實(shí)驗(yàn)試劑17
• 1.3 實(shí)驗(yàn)儀器17-18
• 2 方法18-25
• 2.1 凍融-凍干法制備流感疫苗脂質(zhì)體工藝影響因素實(shí)驗(yàn)18-20
• 2.2 凍融-凍干法正交試驗(yàn)處方篩選20-21
• 2.3 凍融-凍干法制備流感疫苗脂質(zhì)體凍干粉21-23
• 2.4 流感疫苗脂質(zhì)體形態(tài)觀察和粒度分布測(cè)定23
• 2.5 流感疫苗脂質(zhì)體包封率測(cè)定23-25
• 2.6 流感疫苗脂質(zhì)體物理穩(wěn)定性考察25
• 3 結(jié)果25-29
• 3.1 凍融-凍干法最優(yōu)處方25
• 3.2 流感疫苗脂質(zhì)體形態(tài)觀察和粒度分布測(cè)定25-27
• 3.3 凍融-凍干法制備疫苗脂質(zhì)體凍干粉包封率測(cè)定結(jié)果27-28
• 3.4 凍融-凍干法制備流感疫苗脂質(zhì)體物理穩(wěn)定性考察28-29
• 4 討論和小結(jié)29-32
• 4.1 凍融-凍干法制備脂質(zhì)體特點(diǎn)29-30
• 4.2 凍融-凍干法中包封藥物步驟的選擇30
• 4.3 兩種方法法制備脂質(zhì)體形態(tài)、粒徑、穩(wěn)定性比較30
• 4.4 疫苗脂質(zhì)體凍干粉可減輕傳統(tǒng)疫苗冷鏈運(yùn)輸壓力30-32
• 第三章 細(xì)胞免疫-薄膜分散法和凍融凍干法制備流感疫苗脂質(zhì)體干粉肺部給藥的對(duì)比32-47
• 1 材料32-34
• 1.1 流感疫苗32
• 1.2 實(shí)驗(yàn)試劑32-33
• 1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物33
• 1.4 實(shí)驗(yàn)儀器33-34
• 2 方法34-37
• 2.1 流感疫苗脂質(zhì)體制備34-35
• 2.2 脾淋巴細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)(MTT)35-37
• 2.3 T淋巴細(xì)胞表面標(biāo)記檢測(cè)實(shí)驗(yàn)37
• 3 結(jié)果37-46
• 3.1 脾淋巴細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)結(jié)果37-38
• 3.2 T淋巴細(xì)胞表面標(biāo)記檢測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果38-46
• 4. 討論46-47
• 參考文獻(xiàn)47-51
• 綜述 脂質(zhì)體應(yīng)用及研究進(jìn)展51-65
• 1 脂質(zhì)體制備方法51-54
• 1.1 機(jī)械分散法51-52
• 1.2 有機(jī)溶劑分散法52-53
• 1.3 逆相蒸發(fā)法53
• 1.4 鈣融合法53
• 1.5 微乳冷卻法53
• 1.6 凍融法53-54
• 2 脂質(zhì)體給藥特點(diǎn)54-55
• 2.1 淋巴系統(tǒng)定向性54
• 2.2 脂質(zhì)體藥物釋放具有選擇性54
• 2.3 使抗癌藥物在靶區(qū)具有滯留性54
• 2.4 脂質(zhì)體制劑在體內(nèi)的生物運(yùn)轉(zhuǎn)54-55
• 2.5 延緩釋藥55
• 2.6 控制藥物在組織內(nèi)的分布與在血液內(nèi)的清除率55
• 2.7 對(duì)瘤細(xì)胞的親和性55
• 3 脂質(zhì)體作為藥物載體的應(yīng)用55-57
• 3.1 在靶向藥物中的應(yīng)用55-56
• 3.2 在緩釋藥物系統(tǒng)中的應(yīng)用56
• 3.3 口服藥物中的應(yīng)用56-57
• 3.4 在藥物轉(zhuǎn)導(dǎo)中的應(yīng)用57
• 3.5 脂質(zhì)體霧化肺部吸入劑57
• 4 作為藥物佐劑57-61
• 4.1 脂質(zhì)體用作疫苗佐劑的作用機(jī)理57-58
• 4.2 脂質(zhì)體用作疫苗佐劑的優(yōu)點(diǎn)58-59
• 4.3 脂質(zhì)體作為疫苗佐劑的應(yīng)用59-61
• 5 存在問題61-62
• 參考文獻(xiàn)62-65
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況65-66
• 致謝66

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 周紅蕾;李春玲;王貴平;侯加法;;脂質(zhì)體作為疫苗免疫佐劑的應(yīng)用研究進(jìn)展[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2006年02期

2 陳吉祥,李廣林,薛飛群,趙青云;脂質(zhì)體在生物學(xué)中的應(yīng)用新進(jìn)展[J];甘肅畜牧獸醫(yī);2000年03期

3 魯衛(wèi)東;馬波;倪俊學(xué);李杰;;流感疫苗類脂質(zhì)體制備及穩(wěn)定性研究[J];揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版);2010年04期

4 朱亮,俞紅,冷紅文,趙林,陳功星,謝泰生,鄒偉民;抗乙肝免疫核糖核酸脂質(zhì)體前體對(duì)小鼠生物活性的研究[J];江西醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2000年03期

5 劉潔;馬波;魯衛(wèi)東;徐勇軍;林華;代云波;;單價(jià)流感疫苗脂質(zhì)體干粉細(xì)胞免疫研究[J];南京工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2011年06期

6 陳建雯;馬波;林華;喬建斌;王禮燕;魯衛(wèi)東;;流感疫苗脂質(zhì)體干粉制備方法對(duì)其免疫原性影響研究[J];南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2013年07期

7 王建英;楊桂文;田雪文;李云龍;;免疫佐劑及其作用機(jī)制[J];山東師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2006年01期

8 陸偉躍,劉敏,潘俊,力弘,馬俊;葉酸-脂質(zhì)體制備及對(duì)HeLa細(xì)胞靶向作用[J];上海醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2000年01期

9 謝景文,賈正平,任進(jìn)余,陳義,吳斌;脂質(zhì)體干擾素α對(duì)小鼠Lewis肺癌轉(zhuǎn)移及脾細(xì)胞增殖的影響[J];中國(guó)生化藥物雜志;1997年04期

10 羅云敬,劉海濤,李天劍,沈含熙;頭孢菌素類抗生素脂質(zhì)體的包封率測(cè)定與滲漏研究[J];中國(guó)生化藥物雜志;1999年01期

  本文關(guān)鍵詞：凍融—凍干法制備流感疫苗脂質(zhì)體及其細(xì)胞免疫研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：354007