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幽門(mén)螺桿菌Tipα蛋白經(jīng)C23/NF-κB途徑誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞分泌TNF-α和IL-8

發(fā)布時(shí)間:2021-11-26 13:02
  目的:觀(guān)察幽門(mén)螺桿菌(Helicobacter pylori,Hp)腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白(Tipα)誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞分泌TNF-α和IL-8的分子機(jī)制。方法:體外培養(yǎng)人單核細(xì)胞系THP-1,用佛波脂(PMA)誘導(dǎo)其分化為巨噬細(xì)胞后,采用30200μg/ml的Tipα刺激4h,實(shí)時(shí)定量PCR(real time PCR)檢測(cè)核仁素(C23)和Toll樣受體4(TLR4)m RNA的表達(dá);分別采用C23和TLR4 si RNA干擾巨噬細(xì)胞后,觀(guān)察其對(duì)Tipα誘導(dǎo)TNF-α和IL-8的影響;采用5μg/m L衣霉素預(yù)處理細(xì)胞抑制N-糖鏈合成,隨后用Tipα刺激24h,觀(guān)察其對(duì)TNF-α和IL-8分泌的影響;分別采用C23和Tipα抗體沉淀蛋白,隨后分別采用Tipα和C23抗體行Western blot分析;采用C23 si RNA干擾其表達(dá)后,Western blot分析IκB表達(dá)水平以及細(xì)胞核中p65含量;采用蛋白酶體抑制劑MG-132處理細(xì)胞,ELISA檢測(cè)其對(duì)TNF-α和IL-8的影響。結(jié)果:(1)Real time PCR結(jié)果顯示,30200... 

【文章來(lái)源】:南華大學(xué)湖南省

【文章頁(yè)數(shù)】:39 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

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實(shí)驗(yàn)材料
實(shí)驗(yàn)方法及步驟
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
研究成果及發(fā)表論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Role of Toll-like receptors in Helicobacter pylori infection and immunity[J]. Sinéad M Smith.  World Journal of Gastrointestinal Pathophysiology. 2014(03)
[2]Role of Helicobacter pylori virulence factor cytotoxin-associated gene A in gastric mucosa-associated lymphoid tissue lymphoma[J]. Hong-Ping Wang,Yong-Liang Zhu,Wei Shao.  World Journal of Gastroenterology. 2013(45)
[3]Helicobacter pylori tumor necrosis factor-α inducing protein promotes cytokine expression via nuclear factor-κB[J]. Chun-Li Tang,Bo Hao,Guo-Xin Zhang,Rui-Hua Shi,Wen-Fang Cheng.  World Journal of Gastroenterology. 2013(03)



本文編號(hào):3520202

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