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兔牙髓細胞體外增殖及鑒定的實驗研究

發(fā)布時間:2017-05-09 05:53

  本文關鍵詞:兔牙髓細胞體外增殖及鑒定的實驗研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:體外分離培養(yǎng)兔牙髓細胞,研究兔牙髓細胞體外增殖特性及表面標志物的鑒定。方法:酶解組織塊法培養(yǎng)兔牙髓原代細胞,有限稀釋化克隆培養(yǎng)兔傳代細胞,顯微鏡下觀察原代細胞及傳代細胞形態(tài)變化。取第3-6代細胞進行細胞活率的檢測。取2代細胞進行細胞克隆計數(shù)。取第2、4、6、8、10代細胞繪制生長曲線。流式細胞儀對第2、4、6、8、10代細胞進行細胞周期的檢測。取第2代細胞進行牙髓干細胞表面標志物vimentin、CD44、osteonectin、DSP的鑒定。結果:采用酶解組織塊法培養(yǎng)的兔原代牙髓細胞、有限稀釋化克隆培養(yǎng)的兔牙髓細胞形態(tài)學無明顯差異。從第3代到第6代細胞活率細胞數(shù)比分別為:94.7%、95.8%、95.2%、95.3%。兔牙髓細胞克隆形成率為8-26個/2000個細胞。不同代細胞之間增殖率有差異,LSD-t檢驗示第2、4和6代DPCs間無統(tǒng)計學差異,第8代和10代DPCs與其他各代細胞之間的差異均有統(tǒng)計學意義。隨著細胞傳代,s期細胞比例增加。LSD-t檢驗示第2、4和6代DPCs的各期細胞比例無統(tǒng)計學差異(P>0.05),第8和10代DPCs與其他各代細胞之間均有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。牙髓干細胞表面標志物vimentin、CD44、osteonectin、DSP均為陽性。結論:體外分離培養(yǎng)的兔牙髓細胞具有較強的增殖活性、免疫細胞化學vimentin、CD44、osteonectin、DSP均為陽性表達,,證實兔牙髓細胞可分離培養(yǎng)出牙髓干細胞,為牙組織工程提供了新型種子細胞。
【關鍵詞】: 牙髓細胞 體外增殖 鑒定
【學位授予單位】:新疆醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2013
【分類號】:R329.2
【目錄】:
  • 摘要8-9
  • ABSTRACT9-10
  • 前言10-12
  • 內(nèi)容與方法12-18
  • 1. 研究對象及目的12
  • 2. 主要試劑、儀器與試劑的配制12
  • 2.1 主要試劑及儀器12
  • 2.2 試劑的配制12
  • 3. 兔牙髓細胞的分離、培養(yǎng)、傳代、凍存12-14
  • 3.1 兔牙髓細胞原代分離培養(yǎng)12-13
  • 3.2 兔牙髓細胞的傳代培養(yǎng)13
  • 3.3 兔牙髓細胞的凍存與復蘇13-14
  • 4. 兔牙髓細胞生長動力學研究與鑒定14-16
  • 4.1 細胞生長狀況和形態(tài)觀察14
  • 4.2 細胞活率的計數(shù)14
  • 4.3 細胞克隆形成率14
  • 4.4 細胞生長曲線的測14
  • 4.5 細胞周期的測定14
  • 4.6 免疫細胞化學鑒定干細胞表面抗原14-16
  • 5. 質量控制16-17
  • 5.1 污染控制16-17
  • 5.2 操作控制17
  • 6. 統(tǒng)計學分析17-18
  • 結果18-21
  • 討論21-26
  • 小結26-27
  • 致謝27-28
  • 參考文獻28-34
  • 附錄34-37
  • 綜述37-42
  • 參考文獻39-42
  • 攻讀碩士期間發(fā)表的文章42-43
  • 導師評閱表43

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 劉俊,李玉晶;應用不同方法進行人牙髓細胞原代培養(yǎng)的比較研究[J];北京口腔醫(yī)學;2005年03期

2 鄭穎;王曉穎;張春梅;;小型豬乳牙牙髓干細胞體外分離培養(yǎng)及鑒定[J];北京口腔醫(yī)學;2010年03期

3 何飛,譚穎徽,張綱;人牙髓干細胞的體外培養(yǎng)和鑒定[J];華西口腔醫(yī)學雜志;2005年01期

4 張小恒;余占海;張國英;楊倩;杜建東;何福德;;轉化生長因子-β1對大鼠牙周組織中白細胞介素-6、骨鈣素水平的影響[J];口腔醫(yī)學研究;2010年02期

5 楊雪超,樊明文;體外持續(xù)培養(yǎng)對人牙髓細胞分化能力的影響[J];牙體牙髓牙周病學雜志;2003年02期

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  本文關鍵詞:兔牙髓細胞體外增殖及鑒定的實驗研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號:351883

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