目的探討高鈉飲食對(duì)小鼠腎臟鉀通道蛋白（renal outer medullary potassium channel, ROMK）表達(dá)的調(diào)控作用及其分子機(jī)制。方法雄性FVB小鼠分為兩組,分別給與鈉鹽含量4%的高鈉飲食和鈉鹽含量0.4%的普鈉飲食2周,收集小鼠24h尿液,生化分析儀檢測(cè)小鼠24h尿鈉、尿鉀情況,Western blot和Real time PCR分析高鈉飲食小鼠腎臟ROMK表達(dá),免疫沉淀探討高鈉飲食小鼠腎臟ROMK蛋白泛素化修飾水平。利用蛋白酶體抑制劑MG132處理高鈉飲食小鼠三天,分別應(yīng)用20S蛋白酶體活性檢測(cè)法、Western blot和免疫沉淀分析MG132對(duì)高鈉飲食小鼠腎臟蛋白酶體活性、ROMK蛋白表達(dá)及泛素化修飾水平的影響。結(jié)果高鈉飲食2周后,小鼠24h尿量、尿鈉及尿鉀排泄明顯增加,腎臟ROMK蛋白及其mRNA表達(dá)顯著增高,ROMK蛋白泛素化水平顯著降低。應(yīng)用蛋白酶體抑制劑MG132后,高鈉飲食小鼠腎臟蛋白酶體活性降低,ROMK蛋白表達(dá)及泛素化修飾水平均增加。結(jié)論高鈉飲食引起尿鉀排泄增多與上調(diào)小鼠腎臟Romk基因轉(zhuǎn)錄水平、下調(diào)ROMK蛋白泛素化修飾水平,抑制RO... 

【文章來(lái)源】：解剖科學(xué)進(jìn)展. 2019,25(05)

【文章頁(yè)數(shù)】：4 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
    1.2 小鼠飼養(yǎng)及處理
    1.3 Western blot
    1.4 Real time PCR
    1.5 免疫沉淀
    1.6 蛋白酶體活性檢測(cè)
2 結(jié)果
    2.1 高鈉飲食后小鼠尿排泄情況
    2.2 高鈉飲食小鼠腎臟ROMK蛋白的表達(dá)
    2.3 高鈉飲食小鼠腎臟Romk基因mRNA的表達(dá)
    2.4 高鈉飲食小鼠腎臟ROMK蛋白的泛素化修飾水平
    2.5 泛素化修飾ROMK蛋白經(jīng)蛋白酶體途徑降解
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