本文關鍵詞：旋毛形線蟲肌幼蟲代謝分泌抗原中血清學抗原的鑒定，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：采用免疫共沉淀偶聯(lián)質(zhì)譜技術分離和鑒定旋毛形線蟲肌幼蟲代謝分泌抗原,為篩選和鑒定旋毛形線蟲病的有效診斷抗原及疫苗候選分子奠定基礎。 方法：1.旋毛形線蟲感染新西蘭兔,采用硫酸銨沉淀法分離血清IgG；從感染肌肉中分離純化肌幼蟲并培養(yǎng)收集代謝分泌抗原。2.免疫共沉淀和SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分離代謝分泌抗原。3.質(zhì)譜技術鑒定各蛋白質(zhì)條帶,利用肽片段質(zhì)譜圖分析鑒定血清學抗原。 結果：1.間接酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測旋毛形線蟲感染新西蘭兔的血清抗體達1：6400以上；采用硫酸銨沉淀法使兔血清IgG得到有效的分離。2.制備的代謝分泌抗原經(jīng)電泳分離鑒定在約175kDa、83kDa、60kDa、32kDa處存在4條較清晰的蛋白質(zhì)條帶,提示旋毛形線蟲肌幼蟲培養(yǎng)24h后獲得了代謝分泌抗原。3.免疫共沉淀的旋毛形線蟲肌幼蟲代謝分泌抗原經(jīng)電泳分離獲得5條較清晰的蛋白質(zhì)條帶,免疫印跡分析發(fā)現(xiàn)在40kDa至60kDa之間存在旋毛形線蟲感染血清識別、正常兔血清不識別的2條較強的蛋白質(zhì)條帶。4.切取約40kDa和約55kDa處的蛋白質(zhì)條帶進行酶解和串聯(lián)質(zhì)譜分析,獲得4種蛋白質(zhì)分子,分別為絲氨酸蛋白酶、肌幼蟲特異性絲氨酸蛋白酶、43kDa分泌糖蛋白、53kDa代謝分泌抗原。 結論：1.旋毛形線蟲肌幼蟲代謝分泌抗原經(jīng)分離和鑒定獲得4種蛋白質(zhì)分子,分別為絲氨酸蛋白酶、肌幼蟲特異性絲氨酸蛋白酶、43kDa分泌糖蛋白、53kDa代謝分泌抗原。2.免疫共沉淀偶聯(lián)質(zhì)譜技術可有效分離和鑒定旋毛形線蟲肌幼蟲代謝分泌抗原。
【關鍵詞】：旋毛形線蟲 代謝分泌抗原 質(zhì)譜技術 免疫共沉淀
【學位授予單位】：遵義醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R383.15
【目錄】：

• 英漢縮略詞對照表4-5
• 中文摘要5-6
• Abstract6-8
• 前言8-10
• 材料與方法10-19
• 結果19-24
• 討論24-28
• 結論28-29
• 參考文獻29-32
• 綜述：旋毛形線蟲抗原研究32-46
• 參考文獻41-46
• 致謝46-47
• 作者簡介47

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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  本文關鍵詞：旋毛形線蟲肌幼蟲代謝分泌抗原中血清學抗原的鑒定，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：346065