本文關(guān)鍵詞：慢性應(yīng)激性抑郁樣行為發(fā)生中海馬α7AchRs的作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：抑郁癥(Depression)不僅是對人的身心健康影響巨大的精神障礙性疾病,且具有高發(fā)生率、高自殺率等特性。因此,關(guān)于抑郁癥發(fā)病原因、發(fā)病機(jī)制及防治策略方面的研究已經(jīng)受到廣泛關(guān)注。大量研究表明,抑郁癥的發(fā)生與慢性應(yīng)激相關(guān),建立慢性不可預(yù)見性溫和應(yīng)激(Chronic unpredictable mild stress, CUMS)抑郁模型是抗抑郁藥物篩選、抗抑郁藥物作用機(jī)理研究和抑郁癥發(fā)生的病理生理學(xué)研究的重要方法之一。也有研究表明,海馬作為邊緣系統(tǒng)的重要組成部分,也是與應(yīng)激性反應(yīng)高度相關(guān)的腦區(qū),而5-羥色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、谷氨酸(Glutamic acid, Glu)等神經(jīng)遞質(zhì)及受體均與抑郁的發(fā)生密切相關(guān)。 a7nAChRs是煙堿樣乙酰膽堿受體(Nicotinic ACh receptor, nAChR)中同源五聚體亞型之一,主要分布在海馬、大腦皮層、下丘腦及一些腦干核團(tuán)中。有研究發(fā)現(xiàn)海馬內(nèi)的乙酰膽堿酯酶(Acetylcholine esterase, Acl1E)與抑郁發(fā)生有關(guān),nAChRs已作為精神病治療藥物的潛在目標(biāo),但其相關(guān)研究一直習(xí)慣性地集中于認(rèn)知障礙性疾病的發(fā)生機(jī)制及治療方面,而最近的科學(xué)研究及臨床實(shí)驗(yàn)證據(jù)則證明nAChRs與抑郁癥發(fā)生有關(guān)。研究表明,5-HT能神經(jīng)元上含有a7nAChRs受體亞型,尼古丁通過激活a7nAChRs增加中縫背側(cè)核中5-HT的釋放頻率,同時(shí)也可以增加前額葉幾個(gè)區(qū)域5-HT的釋放。也有研究證明,對Ca2+高滲透的同源性a7nAChRs主要位于谷氨酸神經(jīng)終端,可以維持或促進(jìn)Glu的釋放,如Ach激發(fā)大鼠小腦中Glu的釋放就是由突觸前a7nAChRs調(diào)節(jié)的。a7nAChRs的激活可以使海馬內(nèi)Glu水平升高,而選擇性a7nAChRs阻斷劑美加明和α-銀環(huán)蛇毒則可以通過阻止谷氨酸的神經(jīng)毒性來達(dá)到神經(jīng)保護(hù)的作用,已有研究結(jié)果提示應(yīng)激引起突觸變化的機(jī)制也可能與a7nAChRs的激活有關(guān),而且a7nAChRs很可能與Glu、5-HT存在一定關(guān)系。然而,在慢性不可預(yù)見性應(yīng)激性抑郁發(fā)生中海馬a7nAChRs是否發(fā)揮作用,其作用是否是通過調(diào)節(jié)5-HT和Glu釋放及其受體系統(tǒng)來實(shí)現(xiàn)并不清楚。為證明這一問題,本研究通過建立慢性應(yīng)激性抑郁模型,雙側(cè)海馬微量注射a7nAChRs激動劑SSR180711和拮抗劑甲基牛扁亭堿(Methyllycaconitine, MLA),觀測了大鼠體重變化率,通過其糖水消耗率、懸尾不動時(shí)間及敞箱實(shí)驗(yàn)結(jié)果等來觀察動物的行為表現(xiàn),并運(yùn)用蛋白印跡法(Western-blot, WB)檢測了海馬內(nèi)a7AChRs及Glu的N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid, NMDA)受體NR1、NR2B亞基的表達(dá),高效液相色譜分析(High-performance liquid chromatography, HPLC)方法檢測了海馬Glu及5-HT含量,酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)方法檢測了a7AChRs受體磷酸化水平。研究結(jié)果如下： ①與對照組大鼠相比,CUMS組大鼠的體重變化率、糖水消耗率、修飾得分、水平運(yùn)動和垂直得分明顯降低,懸尾不動時(shí)間明顯升高,且差異極顯著(n=12,p0.01)。海馬a7AChRs表達(dá)量明顯升高(n=6,p0.05),磷酸化水平極顯著升高(n=6,p0.01),5-HT表達(dá)無顯著性降低,但Glu水平極顯著升高(n=6,p0.01), NMD A受體的NR1(n=6, p0.05)、NR2B (n=6, P0.01)亞基表達(dá)下降。 ②CUMS大鼠海馬微量注射a7nAChRs激動劑SSR180711或拮抗劑MLA,動物體重變化率、糖水偏好率、修飾得分、水平運(yùn)動得分和垂直得分與CUMS組大鼠相比均顯著或極顯著升高(n=12,p0.05,p0.01),懸尾不動時(shí)間極顯著降低(n=12,p0.01)。注射α7nAChRs拮抗劑MLA,可以極顯著降低由應(yīng)激引起的海馬Glu含量的升高(p0.01),顯著或極顯著增加NR1(p0.05)和NR2B(p0.01)的表達(dá),而5-HT水平無顯著性變化。注射a7nAChRs激動劑SSR180711后,極顯著地增加了5-HT水平(p0.01),Glu含量和NR1、NR2B亞基表達(dá)量均無顯著性變化； ③正常大鼠海馬注射a7nAChRs激動劑SSR180711或拮抗劑MLA對動物的正常行為表現(xiàn)均無影響。與對照組相比,CON/SSR180711組5-HT的含量極顯著性升高(p0.0J),Glu水平顯著升高(p0.05), NR1、NR2B表達(dá)顯著降低(p0.05);正常大鼠注射拮抗劑MLA有降低Glu同時(shí)升高NMDA受體NR1、NR2B亞基表達(dá)量的趨勢(0.08p0.05)。 研究結(jié)果表明,海馬a7nAChRs參與了應(yīng)激性抑郁的發(fā)生。CUMS使海馬a7AchRs表達(dá)增加及磷酸化水平提高,導(dǎo)致Glu過量釋放及NR1、NR2B表達(dá)不足很可能是引起抑郁樣行為發(fā)生的原因之一。海馬a7nAChRs激動劑SSR180711和拮抗劑MLA可分別通過調(diào)節(jié)Glu系統(tǒng)和5-HT系統(tǒng)而發(fā)揮其抗抑郁效應(yīng)。MLA可以通過抑制由應(yīng)激引起的Glu釋放,增加NR1、NR2B亞型的表達(dá)從而達(dá)到抗抑郁的效果,而激動劑SSR180711則通過極顯著性升高大鼠海馬5-HT水平達(dá)到抗抑郁的效果。
【關(guān)鍵詞】：慢性不可預(yù)見性溫和應(yīng)激 抑郁 海馬 α7AChRs
【學(xué)位授予單位】：陜西師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R749.4;R-332
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-10
• 縮略詞表10-12
• 第一部分 文獻(xiàn)綜述12-34
• 1. 抑郁癥的現(xiàn)狀、危害及研究的意義12-13
• 2. 應(yīng)激與抑郁癥13-14
• 3. 海馬與抑郁癥14-16
• 4. 抑郁癥的發(fā)生機(jī)制16-22
• 4.1 神經(jīng)遞質(zhì)及受體學(xué)說16-18
• 4.2 細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)異常18-19
• 4.3 細(xì)胞因子假說19-21
• 4.4 神經(jīng)可塑性假說21-22
• 5. 慢性不可預(yù)見性應(yīng)激模型及其評價(jià)指標(biāo)22-25
• 5.1 慢性不可預(yù)見性應(yīng)激模型(Chronic unpredictable mild stress,CUMS)22-23
• 5.2 評價(jià)指標(biāo)23-25
• 6. 選題背景和意義25-34
• 6.1 5-羥色胺與抑郁癥的關(guān)系25-27
• 6.2 谷氨酸及受體與抑郁癥的關(guān)系27-30
• 6.3 煙堿型乙酰膽堿及受體與抑郁的關(guān)系30-34
• 第二部分 研究報(bào)告34-58
• 1. 材料和儀器34-36
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動物及分組34
• 1.2 實(shí)驗(yàn)藥品34-35
• 1.3 實(shí)驗(yàn)儀器35-36
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法36-43
• 2.1 腦立體定位36-37
• 2.2 實(shí)驗(yàn)動物分組和海馬微量注射37
• 2.3 慢性不可預(yù)見性應(yīng)激(CUMS)抑郁模型的建立37
• 2.4 行為學(xué)指標(biāo)的檢測37-39
• 2.5 Western blot實(shí)驗(yàn)39-41
• 2.6 酶聯(lián)免疫吸附劑測定41-42
• 2.7 高效液相色譜分析(HPLC)42-43
• 3. 數(shù)據(jù)處理方法43-44
• 4. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果44-53
• 4.1 行為學(xué)測試結(jié)果44-48
• 4.2 Western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果48-50
• 4.3 ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果50-51
• 4.4 高效液相色譜實(shí)驗(yàn)結(jié)果51-53
• 5. 討論53-58
• 第三部分 總結(jié)58-60
• 參考文獻(xiàn)60-72
• 致謝72-74
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果74

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 劉晶;鄒桂欣;賈冬;;HPLC-UV法測定給藥小鼠腦組織中5-羥色胺含量[J];中國臨床藥理學(xué)雜志;2011年08期

2 張峻嶺;;抑郁癥研究現(xiàn)狀及影響因素分析[J];中外醫(yī)療;2008年25期

  本文關(guān)鍵詞：慢性應(yīng)激性抑郁樣行為發(fā)生中海馬α7AchRs的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：344435