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人下頜下腺干/祖細胞分離培養(yǎng)

發(fā)布時間:2021-10-09 10:09
  目的:本課題通過體外分離、培養(yǎng)來源于胎兒下頜下腺的干/祖細胞,并對其表面標記及生物學(xué)特征進行研究。為進一步將這些干/祖細胞誘導(dǎo)分化為內(nèi)胚層來源的腺體功能細胞(胰腺、肝臟、唾液腺)的實驗研究打下基礎(chǔ)。方法:①機械法+酶消化法進行人胎兒下頜下腺來源細胞的分離、純化,然后進行原代培養(yǎng)。②體外選擇性培養(yǎng)胎兒原代下頜下腺細胞形成的集落,獲得下頜下腺類上皮細胞集落。經(jīng)選擇性消化該集落,有限稀釋法純化獲得下頜下腺類上皮單克隆細胞,并將其命名為(human Submandibular Gland Progenitor cells,hSGPs)。③繪制hSGPs生長曲線,觀察其增殖情況。④進行CK19、Laminin免疫熒光染色;流式細胞學(xué)檢測膜蛋白表面標記CD29、Thy-1(CD90.1)和c-Kit(CD117)。⑤對長期培養(yǎng)的hSGPs進行核型分析,了解其染色體形態(tài)、結(jié)構(gòu)及數(shù)量。結(jié)果:①通過機械+酶消化法獲得的hSMGs主要為三角形、多邊形和不規(guī)則細胞,包括少量類腺泡上皮細胞。在培養(yǎng)12天后見3個生長明顯的細胞集落形成。②將原代形成的細胞集落選擇性消化傳代培養(yǎng),9天后見1個集落呈鋪路石樣排列,細... 

【文章來源】:遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁數(shù)】:43 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

人下頜下腺干/祖細胞分離培養(yǎng)


hSCPs免疫熒Fig.5Immunofluoreseenee

生長曲線,生長曲線,顯帶


圖7hSGPs和hs姍s生長曲線圖比較Fig.7TheeomParisionOfeellgrowtheurveofhSGP8andhSMGs顯帶方法檢測核型hSCPsG顯帶方法顯示:在檢測的30個細胞中除2個具有45條染有絲分裂染色體組均為2n=46,性染色體為XX,占全部受檢細胞倍體數(shù)目與國內(nèi)文獻11’]報道的中國人正常染色體數(shù)目92.4%一致。體的2個細胞經(jīng)配對后證實缺乏的染色體互相不一,故推測缺失的片過程中失去或由于有絲分裂中偶然發(fā)生的事故所致。(圖8)今飛籠,凈只洽;萬、林、.。、"J抽、).認,I弓洲之個。,之,勺‘石二二獷萬艱入另的臼之竺若不盆備幾

【參考文獻】:
期刊論文
[1]中國人的有絲分裂染色體組型[J]. 吳旻,凌麗華.  解剖學(xué)報. 1966(03)



本文編號:3426155

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