目的:本課題通過(guò)體外分離、培養(yǎng)來(lái)源于胎兒下頜下腺的干/祖細(xì)胞,并對(duì)其表面標(biāo)記及生物學(xué)特征進(jìn)行研究。為進(jìn)一步將這些干/祖細(xì)胞誘導(dǎo)分化為內(nèi)胚層來(lái)源的腺體功能細(xì)胞（胰腺、肝臟、唾液腺）的實(shí)驗(yàn)研究打下基礎(chǔ)。方法:①機(jī)械法+酶消化法進(jìn)行人胎兒下頜下腺來(lái)源細(xì)胞的分離、純化,然后進(jìn)行原代培養(yǎng)。②體外選擇性培養(yǎng)胎兒原代下頜下腺細(xì)胞形成的集落,獲得下頜下腺類上皮細(xì)胞集落。經(jīng)選擇性消化該集落,有限稀釋法純化獲得下頜下腺類上皮單克隆細(xì)胞,并將其命名為（human Submandibular Gland Progenitor cells,hSGPs）。③繪制hSGPs生長(zhǎng)曲線,觀察其增殖情況。④進(jìn)行CK19、Laminin免疫熒光染色;流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)膜蛋白表面標(biāo)記CD29、Thy-1（CD90.1）和c-Kit（CD117）。⑤對(duì)長(zhǎng)期培養(yǎng)的hSGPs進(jìn)行核型分析,了解其染色體形態(tài)、結(jié)構(gòu)及數(shù)量。結(jié)果:①通過(guò)機(jī)械+酶消化法獲得的hSMGs主要為三角形、多邊形和不規(guī)則細(xì)胞,包括少量類腺泡上皮細(xì)胞。在培養(yǎng)12天后見3個(gè)生長(zhǎng)明顯的細(xì)胞集落形成。②將原代形成的細(xì)胞集落選擇性消化傳代培養(yǎng),9天后見1個(gè)集落呈鋪路石樣排列,細(xì)... 

【文章來(lái)源】：遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁(yè)數(shù)】：43 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

hSCPs免疫熒Fig.5Immunofluoreseenee

圖7hSGPs和hs姍s生長(zhǎng)曲線圖比較Fig.7TheeomParisionOfeellgrowtheurveofhSGP8andhSMGs顯帶方法檢測(cè)核型hSCPsG顯帶方法顯示:在檢測(cè)的30個(gè)細(xì)胞中除2個(gè)具有45條染有絲分裂染色體組均為2n=46，性染色體為XX，占全部受檢細(xì)胞倍體數(shù)目與國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)11’]報(bào)道的中國(guó)人正常染色體數(shù)目92.4%一致。體的2個(gè)細(xì)胞經(jīng)配對(duì)后證實(shí)缺乏的染色體互相不一，故推測(cè)缺失的片過(guò)程中失去或由于有絲分裂中偶然發(fā)生的事故所致。(圖8)今飛籠，凈只洽;萬(wàn)、林、.。、"J抽、).認(rèn)，I弓洲之個(gè)。，之，勺‘石二二獷萬(wàn)艱入另的臼之竺若不盆備幾

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]中國(guó)人的有絲分裂染色體組型[J]. 吳旻,凌麗華.  解剖學(xué)報(bào). 1966(03)



本文編號(hào)：3426155