研究慢性心理應(yīng)激致海馬的損傷效應(yīng)，并對鋅調(diào)節(jié)應(yīng)激反應(yīng)的作用及可能機制進行探討。通過建立整體和細(xì)胞水平的應(yīng)激模型，觀察心理應(yīng)激對不同鋅營養(yǎng)狀況大鼠行為以及心理應(yīng)激／皮質(zhì)酮對海馬神經(jīng)元的損傷效應(yīng)；并從Glu-NMDA受體通路及Ca²⁺-CaM體系變化的角度探討鋅調(diào)節(jié)應(yīng)激反應(yīng)及應(yīng)激損傷的可能機制。內(nèi)容涉及動物模型建立，生化指標(biāo)測定，放免測定，原位雜交，流式細(xì)胞術(shù)，膜片鉗技術(shù)，細(xì)胞培養(yǎng)及相關(guān)分子生物學(xué)方法。 實驗結(jié)果表明，光電應(yīng)激導(dǎo)致實驗大鼠曠場行為異常，在應(yīng)激程度相同的條件下，缺鋅動物表現(xiàn)更明顯，表明鋅營養(yǎng)狀況對機體應(yīng)激反應(yīng)有影響。應(yīng)激還導(dǎo)致海馬和皮層神經(jīng)元發(fā)生一定程度的凋亡，海馬損傷更為嚴(yán)重；在同等應(yīng)激條件下，缺鋅動物凋亡情況較對照嚴(yán)重，表明缺鋅使機體抵抗應(yīng)激損傷的能力減弱。鋅對皮質(zhì)酮所致體外培養(yǎng)大鼠海馬神經(jīng)元的損傷具有雙向調(diào)節(jié)作用：較低濃度鋅可增強神經(jīng)元對高水平糖皮質(zhì)激素的耐受性，減輕神經(jīng)元損傷的程度；而高濃度鋅則加重皮質(zhì)酮損傷海馬神經(jīng)元的效應(yīng)。 光電應(yīng)激導(dǎo)致海馬細(xì)胞[Ca²⁺]_i-CaM體系發(fā)生變化，缺鋅大鼠... 

【文章來源】：中國人民解放軍軍事科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：104 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中英文縮寫字表
前言
一、 材料與方法
    (一) 實驗設(shè)計
    (二) 在體實驗
        1 實驗動物分組和喂養(yǎng)
        2 心理應(yīng)激模型的建立及動物曠場行為測定
        3 海馬谷氨酸含量及海馬突觸體谷氨酸攝取測定
        4 海馬NMDA受體變化
        5 海馬細(xì)胞[Ca~(2+)]_i及CaM水平測定
        6 細(xì)胞凋亡的測定
        7 原位雜交檢測NR1、NR2A mRNA表達
    (三) 體外實驗
        1 大鼠海馬神經(jīng)元的原代培養(yǎng)
        2 培養(yǎng)上清中LDH和NO水平測定
        3 神經(jīng)元存活率、凋亡和壞死的測定
        4 RT-PCR檢測NR1、NR2A、NR2BmRNA表達
        5 海馬神經(jīng)元膜靜息電位的測量
    (四) 數(shù)據(jù)處理
二、 結(jié)果與討論
    (一) 應(yīng)激動物模型及其行為變化
        1 動物攝食量和體重變化
        2 血清皮質(zhì)醇水平變化
        3 動物曠場行為變化
        4 分析討論
    (二) 海馬神經(jīng)元凋亡和／或壞死
        1 海馬組織DNA ladder測定結(jié)果
        2 海馬組織TUNEL測定結(jié)果
        3 體外培養(yǎng)海馬神經(jīng)元存活率的變化
        4 培養(yǎng)上清中LDH、NO水平測定
        5 體外培養(yǎng)海馬神經(jīng)元的凋亡和壞死情況
        6 分析討論
    (三) 海馬Ca~(2+)-CaM體系的變化
        1 海馬細(xì)胞[Ca~(2+)]_i水平測定結(jié)果
        2 海馬細(xì)胞活性CaM水平測定結(jié)果
        3 分析討論
    (四) 海馬GIu-NMDA受體通路的變化
        1 海馬組織谷氨酸含量及海馬突觸體谷氨酸攝取變化
        2 體外培養(yǎng)海馬神經(jīng)元膜靜息電位的測量
        3 海馬NMDA受體結(jié)合實驗結(jié)果
        4 原位雜交檢測海馬NMDA受體亞基NR1、NR2A mRNA表達
        5 RT-PCR檢測體外培養(yǎng)海馬神經(jīng)元NR1、NR2A、NR2B mRNA表達
        6 分析討論
三、 結(jié)論
四、 參考文獻
五、 文獻綜述
    一、 鋅營養(yǎng)與腦功能及行為的關(guān)系研究-歷史和現(xiàn)狀
    二、 中樞神經(jīng)系統(tǒng)中鋅抑制NMDA受體反應(yīng)的機制
附: 在學(xué)期間發(fā)表的論文(全文)
致謝



本文編號：3423682