PH/RS小鼠模型中卵圓細(xì)胞增殖情況研究
發(fā)布時(shí)間:2021-09-25 00:51
目的:通過(guò)聯(lián)合應(yīng)用倒千里光堿(Retrorsine RS)和肝臟大部分切除術(shù)(Partial hepatectomy PH)建立RS/PH小鼠肝損傷模型。觀察小鼠肝損傷后RS對(duì)肝細(xì)胞增殖的影響作用和卵圓細(xì)胞增生情況,探討在肝損傷后卵圓細(xì)胞與肝臟再生的關(guān)系。方法:C57BL/6雌性小鼠40只,8周齡,隨機(jī)分為兩組: PH組和RS/PH組,每組20只。RS/PH組小鼠腹腔注射RS,70 mg/ kg,共注射2次,每次間隔2周;PH組動(dòng)物用生理鹽水代替RS。末次注射4周后,所有小鼠進(jìn)行肝臟2/3切除術(shù),分別于術(shù)后第3天、第7天和第14天處死動(dòng)物取肝臟組織。H-E染色檢查小鼠肝組織病理學(xué)變化、BrdU免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)肝細(xì)胞增殖情況,CK19、CD34和c-kit免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)卵圓細(xì)胞增生情況。結(jié)果:1.H-E染色發(fā)現(xiàn)RS/PH組小鼠肝臟出現(xiàn)肝細(xì)胞氣球樣變、肝細(xì)胞小灶狀壞死等病理表現(xiàn);而PH組僅出現(xiàn)少量病理變化。RS/PH組小鼠BrdU陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)在術(shù)后第3天明顯少于PH組(P<0.05),肝細(xì)胞增殖受抑制。2. H-E染色發(fā)現(xiàn)RS/PH組在匯管區(qū)小膽管周?chē)透涡∪~內(nèi)可見(jiàn)成簇或散在...
【文章來(lái)源】:廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)
【文章頁(yè)數(shù)】:45 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
術(shù)后14天PH組與RS/PH組小鼠術(shù)后肝臟表現(xiàn)A:PH組出現(xiàn)充血腫脹,出現(xiàn)少數(shù)散在瘀點(diǎn),結(jié)扎部位增生組織顏色較淡偏黃(箭頭處)
二、HE 染色法和免疫組織化學(xué)方法觀察小鼠肝臟再生情況(一)HE 染色法觀察結(jié)果2/3 肝臟切除術(shù)后即刻,PH 組和 RS/PH 組小鼠肝臟組織形態(tài)學(xué)觀察沒(méi)有明顯改變(術(shù)中死亡小鼠取材觀察)。術(shù)后第 3 天、第 7 天和 14 天,RS/PH組小鼠肝臟可見(jiàn)胞體腫大胞漿疏松、肝細(xì)胞氣球樣變,肝細(xì)胞小灶狀壞死;在匯管區(qū)、肝小葉中可見(jiàn)成簇或散在分布的卵圓細(xì)胞增生,細(xì)胞體積小,核深染,胞漿較少,核漿比例大(圖 2A~C)。PH 組僅見(jiàn)少量病理?yè)p傷表現(xiàn),如少量肝細(xì)胞氣球樣變、肝細(xì)胞壞死;并未出現(xiàn)卵圓細(xì)胞增生表現(xiàn)(圖2D)。
17圖 3 BrdU 摻入法觀察兩組小鼠肝細(xì)胞增殖 組術(shù)后第 3 天,肝小葉內(nèi)可見(jiàn)少量 BrdU 陽(yáng)性細(xì)胞,與周?chē)幮愿渭?xì)可見(jiàn)體積較小的陽(yáng)性細(xì)胞,核質(zhì)比例增大,呈卵圓形(紅色箭頭 組術(shù)后第 7 天,肝小葉內(nèi)見(jiàn)較多 BrdU 陽(yáng)性細(xì)胞(黑色箭頭);匯性細(xì)胞,體積較小,核質(zhì)比例增大,呈卵圓形(紅色箭頭)。(×4后第 3 天,可見(jiàn)陽(yáng)性肝細(xì)胞大量增殖。(×400)后第 7 天,陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)較第 7 天減少。(×400)
本文編號(hào):3408763
【文章來(lái)源】:廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)
【文章頁(yè)數(shù)】:45 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
術(shù)后14天PH組與RS/PH組小鼠術(shù)后肝臟表現(xiàn)A:PH組出現(xiàn)充血腫脹,出現(xiàn)少數(shù)散在瘀點(diǎn),結(jié)扎部位增生組織顏色較淡偏黃(箭頭處)
二、HE 染色法和免疫組織化學(xué)方法觀察小鼠肝臟再生情況(一)HE 染色法觀察結(jié)果2/3 肝臟切除術(shù)后即刻,PH 組和 RS/PH 組小鼠肝臟組織形態(tài)學(xué)觀察沒(méi)有明顯改變(術(shù)中死亡小鼠取材觀察)。術(shù)后第 3 天、第 7 天和 14 天,RS/PH組小鼠肝臟可見(jiàn)胞體腫大胞漿疏松、肝細(xì)胞氣球樣變,肝細(xì)胞小灶狀壞死;在匯管區(qū)、肝小葉中可見(jiàn)成簇或散在分布的卵圓細(xì)胞增生,細(xì)胞體積小,核深染,胞漿較少,核漿比例大(圖 2A~C)。PH 組僅見(jiàn)少量病理?yè)p傷表現(xiàn),如少量肝細(xì)胞氣球樣變、肝細(xì)胞壞死;并未出現(xiàn)卵圓細(xì)胞增生表現(xiàn)(圖2D)。
17圖 3 BrdU 摻入法觀察兩組小鼠肝細(xì)胞增殖 組術(shù)后第 3 天,肝小葉內(nèi)可見(jiàn)少量 BrdU 陽(yáng)性細(xì)胞,與周?chē)幮愿渭?xì)可見(jiàn)體積較小的陽(yáng)性細(xì)胞,核質(zhì)比例增大,呈卵圓形(紅色箭頭 組術(shù)后第 7 天,肝小葉內(nèi)見(jiàn)較多 BrdU 陽(yáng)性細(xì)胞(黑色箭頭);匯性細(xì)胞,體積較小,核質(zhì)比例增大,呈卵圓形(紅色箭頭)。(×4后第 3 天,可見(jiàn)陽(yáng)性肝細(xì)胞大量增殖。(×400)后第 7 天,陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)較第 7 天減少。(×400)
本文編號(hào):3408763
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