本文關(guān)鍵詞：腫瘤壞死因子TNF-a參與紅核痛覺信號(hào)通路調(diào)控的機(jī)制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：腦組織紅核（red nucleus，RN）基團(tuán)腫瘤壞死因子α（tumor necrosisfactor-alpha，TNF-α）對于病理性疼痛的進(jìn)展有十分重要的意義。本研究主要探討核因子（NF-κB）、胞外調(diào)節(jié)激酶（ERK）、p38促分裂原活化蛋白激酶（MAPK）及c-Jun氨基端激酶（JNK）在TNF-α誘導(dǎo)的機(jī)械性疼痛中所扮演的角色，進(jìn)而探討紅核腫瘤壞死因子TNF-a參與痛覺信號(hào)通路調(diào)控的機(jī)制。 方法： 1.大鼠紅核插管術(shù) 將正常大鼠固定于腦立體定位儀上，參照大鼠腦定位圖譜確定：一側(cè)紅核，前囟后5.9mm；矢狀縫旁開1.0mm；顱表深6.9mm進(jìn)行紅核插管，術(shù)后2天給紅核基團(tuán)進(jìn)行反復(fù)微量注射鼠源性重組TNF-α（每天20ng，持續(xù)3d）干預(yù)，給藥3d后的第2d，大鼠對側(cè)腳掌誘導(dǎo)出疼痛，而同側(cè)未出現(xiàn)疼痛癥狀，且對側(cè)腳掌疼痛維持24h后消失。在同一紅核基團(tuán)再次注射20ng TNF-α，30min內(nèi)誘導(dǎo)出機(jī)械性疼痛，表明大鼠疼痛模型成功。 2.行為學(xué)及痛覺異常的測定 在實(shí)驗(yàn)前三天讓所有大鼠熟悉實(shí)驗(yàn)環(huán)境，實(shí)驗(yàn)開始后將其放在金屬網(wǎng)上蓋上有機(jī)玻璃罩，先適應(yīng)20分鐘左右后，然后用標(biāo)準(zhǔn)化的von Frey尼龍絲刺激注射了TNF-a的大鼠紅核對側(cè)的腳掌外側(cè)腳趾及邊緣,使von Frey尼龍絲彎成S形或C形持續(xù)7秒左右后,觀察其反應(yīng)，大鼠如果在測定時(shí)間內(nèi)有迅速縮足或舔爪反應(yīng)為陽性反應(yīng)。同樣利用相同方法刺激未注射TNF-α大鼠，則無上述反應(yīng)。 3.大鼠給藥及免疫組化 建立好的模型大鼠用微量注射器通過紅核給藥，將NF-KB、ERK、P38MAPK及JNK的抑制劑分別注入核團(tuán)后觀察大鼠誘發(fā)機(jī)械性疼痛起始和維持階段的行為學(xué)變化，同時(shí)通過免疫組化方法進(jìn)一步測定腦組織NF-KB、ERK、P38MAPK及JNK的表達(dá)量。 4.統(tǒng)計(jì)分析：統(tǒng)計(jì)分析采用Sigmastat2.03軟件的Two way RM ANOVA（Bonferroni t-test）方法。雙因素方差分析用以分析不同組別的藥物作用并對其進(jìn)行多重比較分析，P 0.05被認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)顯著性。 結(jié)果：免疫組化結(jié)果顯示：微量注射TNF-α后1h和4h其紅核組織中NF-κB、磷酸化ERK均顯著增加；但磷酸化JNK僅在微量注射TNF-α4h后才顯著增加，而1h后無顯著增加；與其相反，磷酸化p38MAPK在微量注射TNF-α1h后增加而在4h后卻沒有明顯變化。通過行為學(xué)觀察證明，在對大鼠紅核基團(tuán)注射TNF-α30min后，給予NF-κB抑制劑PDTC，ERK抑制劑PD98059和p38MAPK抑制劑SB203580能夠在30min便可抑制TNF-α誘導(dǎo)的機(jī)械性疼痛。然而，，JNK抑制劑SP600125在給藥后1h才能阻止TNF-α誘導(dǎo)的機(jī)械性疼痛。在注射TNF-α4h后，再注射抑制劑PDTC、PD98059或SP600125（不包括SB203580），能夠明顯抑制TNF-α誘導(dǎo)的機(jī)械性疼痛。 結(jié)論：TNF-α通過紅核基團(tuán)誘發(fā)的神經(jīng)病理性疼痛中扮演著重要的角色，NF-κB、ERK及p38MAPK三條途徑在TNF-α誘導(dǎo)的機(jī)械性疼痛的起始階段發(fā)揮著重要作用，而TNF-α誘導(dǎo)的機(jī)械性疼痛的維持階段主要依賴于NF-κB，ERK及JNK途徑活化而得以進(jìn)行，但這一過程中不包括p38MAPK途徑。
【關(guān)鍵詞】：紅核 腫瘤壞死因子 核因子 大鼠
【學(xué)位授予單位】：青海大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R392
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-11
• 第1章 引言11-13
• 第2章 實(shí)驗(yàn)材料和方法13-18
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料13-15
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物13
• 2.1.2 主要試劑13-14
• 2.1.3 主要儀器14
• 2.1.4 主要溶液配制14-15
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法15-18
• 2.2.1 動(dòng)物分組15
• 2.2.2 核團(tuán)導(dǎo)管插入術(shù)15
• 2.2.3 疼痛模型的制備15
• 2.2.4 行為學(xué)及痛覺異常的測定方法15-16
• 2.2.5 免疫組化16-17
• 2.2.6 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析17-18
• 第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果18-32
• 3.1 重復(fù)微量注射 TNF-Α誘發(fā)機(jī)械性疼痛的效果18-20
• 3.2 NF-ΚB 對 TNF-Α誘導(dǎo)產(chǎn)生的機(jī)械性疼痛中的影響20-22
• 3.3 ERK 對 TNF-α誘導(dǎo)的機(jī)械性疼痛中的影響22-25
• 3.4 P38 MAPK 對 TNF-Α誘發(fā)的機(jī)械性疼痛中的影響25-28
• 3.5 JNK 對 TNF-Α誘發(fā)的機(jī)械性疼痛中的影響28-32
• 第4章 討論32-34
• 第5章 結(jié)論34-35
• 參考文獻(xiàn)35-39
• 致謝39-40
• 附錄40-41
• 作者簡介41

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 劉敏芝;劉先國;劉佰運(yùn);;紅核的鎮(zhèn)痛作用和加強(qiáng)電針鎮(zhèn)痛的作用[J];針刺研究;1991年01期

2 黃民;劉敏芝;李曉瑩;;紅核的鎮(zhèn)痛作用及其機(jī)制的初步探討[J];針刺研究;1992年03期

  本文關(guān)鍵詞：腫瘤壞死因子TNF-a參與紅核痛覺信號(hào)通路調(diào)控的機(jī)制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：337974