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青石棉誘導(dǎo)BEAS-2B細(xì)胞產(chǎn)生活性氧及EGF受體、MAPK級聯(lián)激活的研究

發(fā)布時間:2021-08-28 19:10
  研究背景 石棉可引起嚴(yán)重的職業(yè)病如間皮瘤和肺癌,是一種確認(rèn)的職業(yè)性致癌物之一。我國石棉資源豐富、品種齊全,但個體作坊或不規(guī)范的生產(chǎn)車間石棉粉塵含量常超過國標(biāo)(2mg/m3),因此石棉仍然威脅我國接觸工人健康的一種潛在性致癌因素。在所有的石棉中,青石棉的毒性高于溫石棉,由其導(dǎo)致的惡性病變發(fā)病機理復(fù)雜,了解甚少,但細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生的ROS和EGFR、MAPK級聯(lián)激活可能發(fā)揮重要作用。 過量的ROS可引起氧化損傷,導(dǎo)致生物膜大分子不飽和脂肪酸發(fā)生過氧化,引起炎性反應(yīng)并產(chǎn)生炎性早期因子IL-8。二價金屬離子轉(zhuǎn)運子NRAMP2可轉(zhuǎn)運二價金屬如鐵、鋅、錳、銅等,研究青石棉作用于呼吸道上皮細(xì)胞的表達(dá)狀況,可了解青石棉中鐵在氧化過程中的作用,并據(jù)此推論Fe2+和Fe3+相互轉(zhuǎn)化中,即電子傳遞過程中對產(chǎn)生ROS的影響。絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)是細(xì)胞內(nèi)重要的信號傳導(dǎo)級聯(lián),用青石棉刺激肺泡Ⅱ型上皮和間皮細(xì)胞后,可激活細(xì)胞MAPK級聯(lián)高表達(dá);同時又發(fā)現(xiàn)MAPK級聯(lián)信號依賴EGF受體的磷酸化;阻斷EGF受體活性,即可以抑制ERK、MEK的表... 

【文章來源】:鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:117 頁

【學(xué)位級別】:博士

【部分圖文】:

青石棉誘導(dǎo)BEAS-2B細(xì)胞產(chǎn)生活性氧及EGF受體、MAPK級聯(lián)激活的研究


正常人支氣管上皮BEAS一2B細(xì)染色Fig卜1.DHEStammginnon,albbronehalePithelialBEAS一ZBeells圖卜2青石棉刺激昵As一2B細(xì)胞2h染色Fig.l一2DHEst幽ing認(rèn)BEAS一ZBst面

表達(dá)水平,青石棉,劑量,熒光探針


3.DCF熒光探針可檢測細(xì)胞內(nèi)主要由凡02和0環(huán)氧化產(chǎn)生的ROSDCF熒光探針檢測結(jié)果如圖1一5所示,熒光光度值(OD)隨青石棉劑量增加而上升,125pg/耐青石棉所致的0D值達(dá)到最高,之后的隨劑量而下降;1000pg/ml的青石棉所致吸光光度值一直低下,可能與高劑量石棉毒性有關(guān):所有劑量間和不同時段內(nèi)的oD值無明顯差異(P>0.05)。圖卜5.不同劑量、不同時間青石棉刺激BEAS一28細(xì)胞后。CF的00值Figl一5.DCFODabsorptioninBEAS一2Bee1lsindueedbyeroeido1itebydifferentdoseanddifferenttime(田in)4.青石棉誘導(dǎo)BEAs訟B細(xì)胞跨膜轉(zhuǎn)運因子N側(cè)山PZ的表達(dá)及其soD的阻斷作用western免疫印跡實驗結(jié)果顯示,100pg/耐的青石棉刺激BEAs一2B細(xì)胞24h可引起NRAMPZ一IRE的升高,SOD可抑制NRA淤2一IRE的轉(zhuǎn)運作用(圖卜6A、卜6B);類似NRAMPZ一工RE的表達(dá),青石棉也可誘導(dǎo)NRA淤2扛RE(圖1一7A、卜7B)表達(dá)升高

青石棉,蛋白,條帶


圖6B.青石棉誘導(dǎo)NRAMPZ一IRE蛋白的表達(dá)及其Son的阻斷作用(蛋白條帶值)Fig6B.CroeidoliteindueedNRAMPZ一IREandtheSODbloekingeffeCt

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]青石棉誘導(dǎo)A549細(xì)胞ERK1/2、MEK1/2的表達(dá)[J]. 王新朝,吳逸明,李卓煒,James M.Samet,Andrew J.Ghio.  鄭州大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2004(02)
[2]亞硒酸鈉對青石棉誘發(fā)大鼠間皮瘤的阻斷作用與血漿過氧化脂質(zhì)關(guān)系的研究[J]. 楊建華,羅素瓊,劉學(xué)澤.  華西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 1994(01)



本文編號:3369085

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