柯薩奇病毒（Coxsackievirus,CV）屬于小RNA病毒科,腸道病毒屬的成員,自1948年發(fā)現(xiàn)以來,在人群中的感染普遍存在,是近年來引起關(guān)注的人類病毒性心肌炎的一種主要病原之一,而且在國內(nèi)外人群中的發(fā)病呈上升趨勢(shì)。CV可分為A、B兩個(gè)型,即CVA和CVB,其中,CVB又有6個(gè)血清型（CVB1^CVB6）。除人類外,CVB還可感染猩猩和比格犬等動(dòng)物,并導(dǎo)致死亡。2005年,本課題組對(duì)臨床死亡的金絲猴進(jìn)行系統(tǒng)的診斷,證實(shí)其死于CVB3感染,這是國內(nèi)外首次有該病原感染金絲猴死亡的報(bào)道。多數(shù)資料報(bào)道CVB3具有嗜心肌性,主要侵犯心肌并造成其損傷,但是,有的毒株還可導(dǎo)致胰腺、腎臟、神經(jīng)以及子宮等組織器官損傷,也有部分毒株甚至沒有致病性。由此可見,不同的分離毒株感染后其致病性不盡相同。為了明確川金絲猴源CVB3（CVB3/SGM-05）這一新分離毒株的致病特性,本研究以BALB/C小鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,開展相關(guān)的致病性研究。本研究以新生BALB/C小鼠的心臟為材料,分離培養(yǎng)其心肌細(xì)胞,經(jīng)形態(tài)學(xué)觀察及其心肌生長特性鑒定,確定已成功建立了一種原代心肌細(xì)胞培養(yǎng)方法。為研究具有嗜心肌... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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倒置相差顯微鏡觀察原代心肌細(xì)胞培養(yǎng)3天后(×40)

37圖1.1 倒置相差顯微鏡觀察原代心肌細(xì)胞培養(yǎng)2天后 (×10)Fig 1.1 The myocardial cells of mice has been primarily culture for 2 days. ×10圖1.2 倒置相差顯微鏡觀察原代心肌細(xì)胞培養(yǎng)3天后 (×40)Fig.1.2 The myocardial cells of mouse has been primarily culture for 3 days. ×401.2.2 CVB3/SGM-05 毒株的毒力測(cè)定CVB3/SGM-05 接種 Vero 細(xì)胞測(cè)定的 TCID50為 0.1ml 10-7.1稀釋的病毒液。1.2.3 CVB3/SGM-05 感染 BALB/C 小鼠原代心肌細(xì)胞的觀察BALB/C 小鼠原代心肌細(xì)胞在接種 CVB3/SGM-05 毒株后 15h 左右即可見到部分細(xì)胞圓縮、脫落，有的心肌細(xì)胞的節(jié)律性搏動(dòng)減弱或停止；約 20h 后，變形細(xì)胞增多；32h左右 80%以上的細(xì)胞出現(xiàn) CPE（圖 1.3），細(xì)胞搏動(dòng)停止，培養(yǎng)液中懸浮大量的脫落壞死細(xì)胞。

38圖1.3 接種CVB3/SGM-05的BALB/C小鼠原代心肌細(xì)胞出現(xiàn)明顯的細(xì)胞病變Fig. 1.3 The CPE of CVB3/SGM-05 in myocardial cells from BALB/C mice (×40)對(duì)照孔未接種病毒的心肌細(xì)胞保持貼壁生長，細(xì)胞形態(tài)完整，未發(fā)現(xiàn)有明顯變化（圖1.4）。圖1.4 對(duì)照BALB/C小鼠原代心肌細(xì)胞生長正常Fig. 1.4 The control of myocardial cells of mice (×40)收集 32h 后的病變細(xì)胞培養(yǎng)液，離心處理后電鏡負(fù)染觀察可見大量的直徑約 25nm左右的小 RNA 病毒樣病毒粒子（圖 1.5，箭頭所示為病毒粒子）。

【參考文獻(xiàn)】：
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