本研究旨在探討β-聯(lián)蛋白在促進(jìn)外周血間充質(zhì)干細(xì)胞（PBMSCs）的存活和擴(kuò)增中的作用。采取SD大鼠外周血,分離培養(yǎng)得到PBMSCs,隨機(jī)將細(xì)胞分3組:未處理組（CON）、β-聯(lián)蛋白激動劑組（WAY-262611,WAY）和β-聯(lián)蛋白抑制劑組（XAV-939,XAV）。體外培養(yǎng)90 d,觀察各組細(xì)胞增生和凋亡情況。應(yīng)用Western印跡和ELISA方法觀察細(xì)胞衰老標(biāo)記性蛋白質(zhì)p16和p21表達(dá)情況,以及β-聯(lián)蛋白信號通路分子表達(dá)情況。外周血經(jīng)過3代培養(yǎng),可獲得純度較高的PBMSCs,體外培養(yǎng)40 d即發(fā)生衰老和凋亡,但WAY-262611可延長細(xì)胞存活時間至90 d以上,增加其體外增殖率1. 08倍（P<0. 05）,明顯提高細(xì)胞增殖能力（P<0. 05）;使WAY組p21和p16蛋白含量較CON組減少72. 1%和68. 4%（兩者均P<0. 05）,較XAV組減低92. 9%和93. 3%（兩者均P<0. 05）。與CON組比較,WAY組衰老細(xì)胞數(shù)減少61. 4%（P<0. 05）,而XAV組則增加53. 3%（P<0. 05）; WAY組細(xì)胞凋亡... 

【文章來源】：中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報. 2019,35(08)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 大鼠創(chuàng)傷模型的構(gòu)建
    1.3 外周血間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)和收集
    1.4 外周血間充質(zhì)干細(xì)胞分組、干預(yù)和培養(yǎng)
    1.5 細(xì)胞表型鑒定
    1.6 生長曲線測定
    1.7 CCK-8檢測細(xì)胞增殖
    1.8 Annexin V/PI雙染色法檢測細(xì)胞凋亡
    1.9 Western印跡檢測
    1.1 0 酶聯(lián)免疫吸附試驗 (ELISA)
    1.1 1 衰老相關(guān)的β-半乳糖苷酶 (β-galactosidase) 活性測定
    1.1 2 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 外周血間充質(zhì)干細(xì)胞形態(tài)觀察和表型鑒定
    2.2 β-聯(lián)蛋白促進(jìn)外周血間充質(zhì)干細(xì)胞生長和增殖
    2.3 β-聯(lián)蛋白抑制外周血間充質(zhì)干細(xì)胞衰老和凋亡
    2.4 激活β-聯(lián)蛋白信號通路促進(jìn)外周血間充質(zhì)干細(xì)胞中抗凋亡信號分子表達(dá)
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]β-catenin慢病毒載體轉(zhuǎn)染大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的實驗研究[J]. 申坤靈,樊毫軍,丁輝,呂琪,劉子泉,董文龍.  武警后勤學(xué)院學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2014(06)



本文編號：3350135