鼠精子抗原Sp17與IL-5融合蛋白的克隆表達(dá)及其免疫性避孕效研究
發(fā)布時(shí)間:2021-08-10 07:33
隨著基因重組技術(shù)的發(fā)展和人們對(duì)生殖分子生物學(xué)的深入認(rèn)識(shí),免疫性避孕疫苗的研究是將來避孕節(jié)育研究的重要方向,免疫性避孕疫苗可能成為控制人口過度增長(zhǎng)的理想措施。針對(duì)精子/睪丸抗原的免疫性避孕疫苗因可能適用于兩性,而一直受到研究者的青睞。目前在利用精子抗原開發(fā)避孕疫苗的研究中,雖然對(duì)某些特異性精子蛋白抗原及表位多肽進(jìn)行了免疫避孕效應(yīng)研究,但尚未取得滿意的結(jié)果。主要可能有以下兩個(gè)方面的原因造成:1、精子/睪丸抗原為自身蛋白,抗原性弱;2、生殖道粘膜免疫應(yīng)答水平低下,未能產(chǎn)生足夠有效的特異抗體滴度。因此,增強(qiáng)生殖道特異抗體反應(yīng)是提高精子抗原避孕效應(yīng)的一個(gè)新的切入點(diǎn)。而生殖道粘膜誘發(fā)抗精子蛋白特異抗體的關(guān)鍵則是尋找合適的靶抗原、免疫途徑和免疫佐劑。 精子蛋白抗原必須具備睪丸/精子特異性并參與精卵相互作用的特性。其中精子表面蛋白Sp17在人和各種哺乳動(dòng)物如兔、小鼠及靈長(zhǎng)類動(dòng)物中的精母細(xì)胞、精細(xì)胞和睪丸/精子中表達(dá),是一種高度保守的哺乳動(dòng)物蛋白。鼠、兔和人的Sp17有61%的同源性,而人與狒狒有97%的同源性。在受精過程中,sp17通過與卵細(xì)胞透明帶表面的糖蛋白、乙酰肝素和葡聚糖等結(jié)合參與頂體反...
【文章來源】:中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市
【文章頁數(shù)】:119 頁
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
sp7lRT一PcR產(chǎn)物的凝膠電泳分析
圖1.5pET/sP17雙酶切鑒定oub]eerstrietionen刃mesdigestionofPiddigestedby腸01/}介刀d111:2:Makrer:2.3kb,2.okb,0.skb測(cè)序,顯示重組質(zhì)粒含有完整的合(測(cè)序報(bào)告見Fig1.6),提示讀框正確,將其命名為pET/Sp
圖1.5pET/sP17雙酶切鑒定Fig1.5Doub]eerstrietionen刃mesdigestionofPET/SP171:ReeombinatedPlasmiddigestedby腸01/}介刀d111:2:Makrer:15kb,gkb,6kb,4.3kb,2.3kb,2.okb,0.skb四、基因序列測(cè)定對(duì)陽性重組質(zhì)粒進(jìn)行測(cè)序,顯示重組質(zhì)粒含有完整的小鼠Sp7l基因閱讀框,列與目的基因完全吻合(測(cè)序報(bào)告見Fig1.6),提示小鼠SP17基因成功克隆T一28(a+)表達(dá)載體中且閱讀框正確,將其命名為pET/Sp17。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]從基因水平對(duì)IL-5與IL-10在日本血吸蟲感染小鼠中作用的探討[J]. 田小軍,薛燕萍,黃敏君,諸欣平. 寄生蟲與醫(yī)學(xué)昆蟲學(xué)報(bào). 2001(04)
[2]TH1/TH2型細(xì)胞因子的免疫調(diào)節(jié)與妊娠[J]. 逯彩虹. 山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2001(05)
[3]IL-5在非復(fù)制重組痘苗病毒中的表達(dá)及其對(duì)重組病毒免疫效果的影響[J]. 郭斐,陸柔劍,孫朝暉,馬海倫,張穎妹,馬大龍,阮力. 病毒學(xué)報(bào). 2001(03)
[4]鼻腔應(yīng)用布地奈德對(duì)鼻息肉中IL-5表達(dá)的作用[J]. 張羅,韓德民,張勇,周兵. 耳鼻咽喉頭頸外科. 2001(01)
[5]實(shí)驗(yàn)性哮喘小鼠脾細(xì)胞培養(yǎng)上清液IL-5的測(cè)定及其意義[J]. 王美琴,鈕善福,白春學(xué),方曉惠,陳常慶,陳波. 上海免疫學(xué)雜志. 2000(05)
[6]DNA疫苗的分子佐劑研究進(jìn)展[J]. 晏菊芳,鮑朗. 國外醫(yī)學(xué)(免疫學(xué)分冊(cè)). 2000(04)
[7]哮喘患者誘導(dǎo)痰嗜酸性細(xì)胞陽離子蛋白、白細(xì)胞介素5水平的改變及其意義[J]. 徐輝,王建東,羅炎杰,程德云. 急診醫(yī)學(xué). 2000(03)
[8]以免疫球蛋白為基礎(chǔ)的避孕藥具研究/設(shè)想[J]. 黃宇烽,王一飛,趙金然,呂年青. 中華男科學(xué). 2000(01)
[9]雙價(jià)痢疾菌苗株免疫小鼠后GALT中ASC的觀測(cè)[J]. 石辛甫,高杰英,彭紅,陳志華,邢麗. 免疫學(xué)雜志. 1998(04)
本文編號(hào):3333759
【文章來源】:中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市
【文章頁數(shù)】:119 頁
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
sp7lRT一PcR產(chǎn)物的凝膠電泳分析
圖1.5pET/sP17雙酶切鑒定oub]eerstrietionen刃mesdigestionofPiddigestedby腸01/}介刀d111:2:Makrer:2.3kb,2.okb,0.skb測(cè)序,顯示重組質(zhì)粒含有完整的合(測(cè)序報(bào)告見Fig1.6),提示讀框正確,將其命名為pET/Sp
圖1.5pET/sP17雙酶切鑒定Fig1.5Doub]eerstrietionen刃mesdigestionofPET/SP171:ReeombinatedPlasmiddigestedby腸01/}介刀d111:2:Makrer:15kb,gkb,6kb,4.3kb,2.3kb,2.okb,0.skb四、基因序列測(cè)定對(duì)陽性重組質(zhì)粒進(jìn)行測(cè)序,顯示重組質(zhì)粒含有完整的小鼠Sp7l基因閱讀框,列與目的基因完全吻合(測(cè)序報(bào)告見Fig1.6),提示小鼠SP17基因成功克隆T一28(a+)表達(dá)載體中且閱讀框正確,將其命名為pET/Sp17。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]從基因水平對(duì)IL-5與IL-10在日本血吸蟲感染小鼠中作用的探討[J]. 田小軍,薛燕萍,黃敏君,諸欣平. 寄生蟲與醫(yī)學(xué)昆蟲學(xué)報(bào). 2001(04)
[2]TH1/TH2型細(xì)胞因子的免疫調(diào)節(jié)與妊娠[J]. 逯彩虹. 山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2001(05)
[3]IL-5在非復(fù)制重組痘苗病毒中的表達(dá)及其對(duì)重組病毒免疫效果的影響[J]. 郭斐,陸柔劍,孫朝暉,馬海倫,張穎妹,馬大龍,阮力. 病毒學(xué)報(bào). 2001(03)
[4]鼻腔應(yīng)用布地奈德對(duì)鼻息肉中IL-5表達(dá)的作用[J]. 張羅,韓德民,張勇,周兵. 耳鼻咽喉頭頸外科. 2001(01)
[5]實(shí)驗(yàn)性哮喘小鼠脾細(xì)胞培養(yǎng)上清液IL-5的測(cè)定及其意義[J]. 王美琴,鈕善福,白春學(xué),方曉惠,陳常慶,陳波. 上海免疫學(xué)雜志. 2000(05)
[6]DNA疫苗的分子佐劑研究進(jìn)展[J]. 晏菊芳,鮑朗. 國外醫(yī)學(xué)(免疫學(xué)分冊(cè)). 2000(04)
[7]哮喘患者誘導(dǎo)痰嗜酸性細(xì)胞陽離子蛋白、白細(xì)胞介素5水平的改變及其意義[J]. 徐輝,王建東,羅炎杰,程德云. 急診醫(yī)學(xué). 2000(03)
[8]以免疫球蛋白為基礎(chǔ)的避孕藥具研究/設(shè)想[J]. 黃宇烽,王一飛,趙金然,呂年青. 中華男科學(xué). 2000(01)
[9]雙價(jià)痢疾菌苗株免疫小鼠后GALT中ASC的觀測(cè)[J]. 石辛甫,高杰英,彭紅,陳志華,邢麗. 免疫學(xué)雜志. 1998(04)
本文編號(hào):3333759
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