SARS冠狀病毒（SARS-CoV）感染所引起的嚴(yán)重急性呼吸綜合征（SARS），2003年冬春之際在我國以及世界上多個國家和地區(qū)的爆發(fā)流行，對人類健康、經(jīng)濟(jì)發(fā)展和社會穩(wěn)定造成了嚴(yán)重的危害。早期、快速、準(zhǔn)確的診斷，對于SARS的預(yù)防和隔離至關(guān)重要。目前常用的診斷措施包括病毒分離培養(yǎng)、免疫學(xué)方法、基于PCR的檢測技術(shù)等等，但分別存在難以早期診斷、敏感度低、實施困難或假陽性高等缺陷。本課題研究采用基因芯片技術(shù)，探索對SARS冠狀病毒感染的早期、敏感、準(zhǔn)確和快速檢測。 基因芯片是近年來興起的基因檢測新技術(shù)。特別是最近迅速發(fā)展的長鏈寡核苷酸基因芯片技術(shù)（60-70 mer Oligo Microarray），為從基因水平高度特異性的檢測SARS-CoV提供了可能。本研究還采用一種全基因組的標(biāo)記方法，與基因芯片檢測的大規(guī)模、高通量特性相配合，為基因芯片在臨床診斷中的應(yīng)用做出了貢獻(xiàn)。 本研究首先確立了長鏈寡核苷酸基因芯片實驗的基本條件，通過采用幾種不同的基質(zhì)材料進(jìn)行點樣雜交，以獲得最適合長鏈寡核苷酸點樣的片基材料以及最適的點樣濃度和特異性。進(jìn)而確定了用于寡核苷酸芯片雜交檢測所需要的最佳探... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：99 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

種不同玻片固定率檢測結(jié)果

玻片為固定率以及雜交后信噪比最高的片基材料。abCd圖1一14種不同玻片固定率檢測結(jié)果Fig.l一1Resultofirnrnobili乙時ionratioexPerimentof4differentslidesa.pely一L一lysineeoatedslideb.Co而ngCMT-GAPSslidee.U一Version01190slided.TelechemSuPerAmineslide圖1一2四種不同玻片固定率檢測熒光強(qiáng)度、信號強(qiáng)度、背景值Fig.1一2Floreseentdensity，signalandbaekgroundofirnrnobiliZationratioexPerimentof4differentslidese.poly一L一lysineeoatedslideb.Co而ngCMT-GAPSslidee.U一Version01190slided.TeleehemSuPe。勺rnineslide

度探針點樣的pely一L一lysine處理玻片固定率檢測結(jié)果濃度分ZlJ為0.25林g/林L，0.5林g/林L，l林g/卜L，1.5林g/林L，2林g/卜L，2.5林留匹的70mer寡核普酸探針點樣后雜交后結(jié)果如圖1一3所示，探針濃度與熒光強(qiáng)度的相關(guān)關(guān)系曲線如圖1一所示。由圖中可以看出用poly一L一lysine做片基，探針的固定率有隨探針濃度增加而升高的趨勢，探針濃度在1林歲林L以下時，固定率非常低，在1林歲林L~2.5林創(chuàng)林L之間時，固定率顯著升高，并隨探針濃度的遞增呈逐步升高，在2.5抖留林L左右基本達(dá)到飽和。def圖1一36種不同濃度探針點樣固定率檢測結(jié)果Fig.l一3Hybridizationresultsof而eroaJ汀aysPriniedby6differentProbeeoncentrationa.2.5林g/林Lb.2抖g/林L，e.1.5林g/林L，d.1林g/林L，e.0.5林g/林L

【參考文獻(xiàn)】：
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