發(fā)布時(shí)間：2021-07-28 10:33

　　SARS冠狀病毒（SARS-CoV）感染所引起的嚴(yán)重急性呼吸綜合征（SARS），2003年冬春之際在我國以及世界上多個(gè)國家和地區(qū)的爆發(fā)流行，對(duì)人類健康、經(jīng)濟(jì)發(fā)展和社會(huì)穩(wěn)定造成了嚴(yán)重的危害。早期、快速、準(zhǔn)確的診斷，對(duì)于SARS的預(yù)防和隔離至關(guān)重要。目前常用的診斷措施包括病毒分離培養(yǎng)、免疫學(xué)方法、基于PCR的檢測技術(shù)等等，但分別存在難以早期診斷、敏感度低、實(shí)施困難或假陽性高等缺陷。本課題研究采用基因芯片技術(shù)，探索對(duì)SARS冠狀病毒感染的早期、敏感、準(zhǔn)確和快速檢測。 基因芯片是近年來興起的基因檢測新技術(shù)。特別是最近迅速發(fā)展的長鏈寡核苷酸基因芯片技術(shù)（60-70 mer Oligo Microarray），為從基因水平高度特異性的檢測SARS-CoV提供了可能。本研究還采用一種全基因組的標(biāo)記方法，與基因芯片檢測的大規(guī)模、高通量特性相配合，為基因芯片在臨床診斷中的應(yīng)用做出了貢獻(xiàn)。 本研究首先確立了長鏈寡核苷酸基因芯片實(shí)驗(yàn)的基本條件，通過采用幾種不同的基質(zhì)材料進(jìn)行點(diǎn)樣雜交，以獲得最適合長鏈寡核苷酸點(diǎn)樣的片基材料以及最適的點(diǎn)樣濃度和特異性。進(jìn)而確定了用于寡核苷酸芯片雜交檢測所需要的最佳探... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：99 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

種不同玻片固定率檢測結(jié)果

玻片為固定率以及雜交后信噪比最高的片基材料。abCd圖1一14種不同玻片固定率檢測結(jié)果Fig.l一1Resultofirnrnobili乙時(shí)ionratioexPerimentof4differentslidesa.pely一L一lysineeoatedslideb.Co而ngCMT-GAPSslidee.U一Version01190slided.TelechemSuPerAmineslide圖1一2四種不同玻片固定率檢測熒光強(qiáng)度、信號(hào)強(qiáng)度、背景值Fig.1一2Floreseentdensity，signalandbaekgroundofirnrnobiliZationratioexPerimentof4differentslidese.poly一L一lysineeoatedslideb.Co而ngCMT-GAPSslidee.U一Version01190slided.TeleehemSuPe。勺rnineslide

度探針點(diǎn)樣的pely一L一lysine處理玻片固定率檢測結(jié)果濃度分ZlJ為0.25林g/林L，0.5林g/林L，l林g/卜L，1.5林g/林L，2林g/卜L，2.5林留匹的70mer寡核普酸探針點(diǎn)樣后雜交后結(jié)果如圖1一3所示，探針濃度與熒光強(qiáng)度的相關(guān)關(guān)系曲線如圖1一所示。由圖中可以看出用poly一L一lysine做片基，探針的固定率有隨探針濃度增加而升高的趨勢，探針濃度在1林歲林L以下時(shí)，固定率非常低，在1林歲林L~2.5林創(chuàng)林L之間時(shí)，固定率顯著升高，并隨探針濃度的遞增呈逐步升高，在2.5抖留林L左右基本達(dá)到飽和。def圖1一36種不同濃度探針點(diǎn)樣固定率檢測結(jié)果Fig.l一3Hybridizationresultsof而eroaJ汀aysPriniedby6differentProbeeoncentrationa.2.5林g/林Lb.2抖g/林L，e.1.5林g/林L，d.1林g/林L，e.0.5林g/林L

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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