流感病毒（Influenza Virus）能夠引起人和動物呼吸道傳染病。世界衛(wèi)生組織首先以病毒蛋白為依據(jù)，將其分為甲、乙、丙三種類型，再根據(jù)病毒表面結(jié)構(gòu)蛋白血凝素（Hemagglutinin，HA）和神經(jīng)氨酸酶（Neuraminidase，NA）的不同分為種類繁多的血清亞型。迄今已經(jīng)發(fā)現(xiàn)17種HA亞型，NA亞型有10種。H1，H3亞型主要引起人、豬、禽的流行性感冒，并且每年因疾病流行給人類帶來巨大的經(jīng)濟損失。流感病毒抗原表位變異快，血清亞型眾多，新型疫苗制備困難加大。將流感病毒表面的亞型優(yōu)勢表位被篩選組合，構(gòu)建可預防多種亞型流感的多表位核酸疫苗。目的在于抵御傳播快、變異快，血清型多的流感流行。將已構(gòu)建的多表位核酸疫苗質(zhì)粒（pVAX1-H3-EHA-H1HA1new，pVAX1-H3-H1HAnew，pVAX1-EHA），進行了發(fā)酵條件摸索及工藝建立。結(jié)果表明，兩種多表位核酸疫苗質(zhì)粒最佳發(fā)酵條件為：培養(yǎng)體系20L，接種子液2L，37℃培養(yǎng)9h，最佳溶氧量是30%，最佳PH值為7.25。培養(yǎng)過程中流速補加葡萄糖可顯著延長大腸桿菌生長的對數(shù)生長期，獲得較高菌量，增加量為0.3Kg。將菌體應用... 

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發(fā)酵過程中不同時間提取質(zhì)粒pVAX-H3HA-EHA-H1HA1new電泳圖

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13圖1.2 發(fā)酵過程中不同時間提取質(zhì)粒pVAX-H3HA-EHA-H1HA1 new電泳圖Fig. 1.2 The electrophoresis of recombinant plasmid pVAX-H3HA-EHA-H1HA1 newobtained at different time during formation同時間菌體密度小提質(zhì)粒電泳圖圖 1.1 不同發(fā)酵時間宿主菌菌體密度Figure 1.1 the density of host bacteria at different fermentation time

位細胞裂解物干重中 RNA、蛋白質(zhì)、粒 DNA 只占＜3%[84]。質(zhì)粒 DNA 的含的細胞系、所借助的克隆載體的類型、了在提取和純化質(zhì)粒過程中選擇技術手大量流失考慮在內(nèi)。 要比質(zhì)粒 DNA 大的多，質(zhì)粒 DNA 只來了很大的困難。所以十分有必要探索高純化效率而操作手段又不至過于復雜 2.2 色譜柱純化過程中核酸成分形成的洗脫k of the nucleic acid component is formed in thcolumn chromatography RNA 的洗脫峰; 2. 目的質(zhì)粒 DNA 的洗脫峰0 50 100 150 ml體積/Volume


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