目的探討同種異體脂肪干細(xì)胞復(fù)合脫鈣骨基質(zhì)對(duì)橈骨臨界骨缺損兔模型的價(jià)值。方法納入18只成年雄性大白兔,切取雙上肢橈骨干中段部分骨質(zhì),制備雙側(cè)上肢橈骨臨界骨缺損模型。將18只兔子隨機(jī)分為對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組1和實(shí)驗(yàn)組2。對(duì)照組未予任何干預(yù),實(shí)驗(yàn)組1在骨缺損部位植入脫鈣骨基質(zhì),實(shí)驗(yàn)組2在骨缺損部位植入同種異體脂肪干細(xì)胞復(fù)合脫鈣骨基質(zhì)。第8、12周時(shí)行X線、病理切片和解剖學(xué)檢查,明確骨缺損的修復(fù)效果。結(jié)果骨缺損修復(fù)后,8、12周時(shí)對(duì)橈骨行X線檢查,對(duì)照組骨缺損修復(fù)差; 8周時(shí)實(shí)驗(yàn)組1部分修復(fù),12周時(shí)大部分修復(fù),但仍有1只兔子存在小塊骨缺損;8周時(shí)實(shí)驗(yàn)組2大部分修復(fù),12周時(shí)全部修復(fù),實(shí)驗(yàn)組2可見(jiàn)髓腔通暢。8、12周時(shí),實(shí)驗(yàn)組1和實(shí)驗(yàn)組2的Lane-Sandhu組織學(xué)評(píng)分均顯著高于對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組2的Lane-Sandhu組織學(xué)評(píng)分均顯著高于實(shí)驗(yàn)組1（P <0. 05）。造模12周后,對(duì)照組骨缺損區(qū)多為纖維組織,實(shí)驗(yàn)組1有編織骨形成,但骨小梁紊亂;實(shí)驗(yàn)組2有板成骨形成,骨小梁排列緊密有序。結(jié)論同種異體脂肪干細(xì)胞復(fù)合脫鈣骨基質(zhì)對(duì)橈骨臨界骨缺損兔模型有一定的價(jià)值。 

【文章來(lái)源】：實(shí)用臨床醫(yī)藥雜志. 2019,23(19)

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【部分圖文】：

脂肪干細(xì)胞的培養(yǎng)及傳代(放大倍數(shù)100倍)A、B、C、D依次表示原代脂肪干細(xì)胞第

DIO染液(1mmol/L)，將稀釋后的染液重懸第3代rADSCs，調(diào)整細(xì)胞濃度為1×106cells/mL，混勻后在CO2培養(yǎng)箱中孵育20min，1000轉(zhuǎn)/min離心10min，去上清液，以新鮮生長(zhǎng)培養(yǎng)液重懸細(xì)胞;調(diào)整細(xì)胞密度為3×105cells/mL，接種于脫鈣骨材料表面(同一批次)，于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4h后，加入生長(zhǎng)培養(yǎng)液;第2天更換成骨誘導(dǎo)液培養(yǎng)，分別于接種3、7d后采用熒光顯微鏡與共聚焦顯微鏡觀察細(xì)胞在三維支架上的生長(zhǎng)情況，見(jiàn)圖2。A:誘導(dǎo)3d的表現(xiàn)B:誘導(dǎo)7d的表現(xiàn)圖2激光共聚焦顯微鏡觀察DIO標(biāo)記的細(xì)胞接種至脫鈣骨支架材料上成骨誘導(dǎo)3、7d的表現(xiàn)(放大倍數(shù)40倍)將第3代rADSCs以3×105cells/mL密度接種于脫鈣骨材料上(同一批次)，培養(yǎng)箱孵育4h后加入GM，第2天更換為成骨誘導(dǎo)液。以生長(zhǎng)培養(yǎng)液作為對(duì)照組。分別于接種1、3、5、7、9、12、15d后收集材料上的細(xì)胞，以Hoechst33258DNA定量方法對(duì)rADSCs進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，對(duì)未接種細(xì)胞的脫鈣骨材料進(jìn)行相同的處理，所測(cè)值作為空白對(duì)照，并從各檢測(cè)值中減去。利用測(cè)得熒光強(qiáng)度的吸光度(OD)值來(lái)反映細(xì)胞的生長(zhǎng)趨勢(shì)，即OD值越大代表細(xì)胞生長(zhǎng)趨勢(shì)越好。見(jiàn)圖3。1．7干預(yù)方式對(duì)照組未予任何干預(yù)，實(shí)驗(yàn)組1在骨缺損部位植入脫鈣骨基質(zhì)，實(shí)驗(yàn)組2在骨缺損部位植入同種異體脂肪干細(xì)胞復(fù)合脫鈣骨基質(zhì)。第8、12周時(shí)行X線、病理切片和解剖學(xué)檢查，明確骨缺A:未接種在脫鈣骨材料上的細(xì)胞;B:已接種在脫鈣骨材料上的細(xì)胞圖3細(xì)胞在三維材料上的增殖曲線損的修復(fù)效果。1．8觀察指標(biāo)Lane-Sandhu組織學(xué)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)評(píng)分、放射學(xué)評(píng)第

量方法對(duì)rADSCs進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，對(duì)未接種細(xì)胞的脫鈣骨材料進(jìn)行相同的處理，所測(cè)值作為空白對(duì)照，并從各檢測(cè)值中減去。利用測(cè)得熒光強(qiáng)度的吸光度(OD)值來(lái)反映細(xì)胞的生長(zhǎng)趨勢(shì)，即OD值越大代表細(xì)胞生長(zhǎng)趨勢(shì)越好。見(jiàn)圖3。1．7干預(yù)方式對(duì)照組未予任何干預(yù)，實(shí)驗(yàn)組1在骨缺損部位植入脫鈣骨基質(zhì)，實(shí)驗(yàn)組2在骨缺損部位植入同種異體脂肪干細(xì)胞復(fù)合脫鈣骨基質(zhì)。第8、12周時(shí)行X線、病理切片和解剖學(xué)檢查，明確骨缺A:未接種在脫鈣骨材料上的細(xì)胞;B:已接種在脫鈣骨材料上的細(xì)胞圖3細(xì)胞在三維材料上的增殖曲線損的修復(fù)效果。1．8觀察指標(biāo)Lane-Sandhu組織學(xué)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)評(píng)分、放射學(xué)評(píng)第19期閆海等:同種異體脂肪干細(xì)胞復(fù)合脫鈣骨基質(zhì)在橈骨臨界骨缺損兔模型中的價(jià)值·3·


本文編號(hào)：3306584