目的探討同種異體脂肪干細胞復(fù)合脫鈣骨基質(zhì)對橈骨臨界骨缺損兔模型的價值。方法納入18只成年雄性大白兔,切取雙上肢橈骨干中段部分骨質(zhì),制備雙側(cè)上肢橈骨臨界骨缺損模型。將18只兔子隨機分為對照組、實驗組1和實驗組2。對照組未予任何干預(yù),實驗組1在骨缺損部位植入脫鈣骨基質(zhì),實驗組2在骨缺損部位植入同種異體脂肪干細胞復(fù)合脫鈣骨基質(zhì)。第8、12周時行X線、病理切片和解剖學(xué)檢查,明確骨缺損的修復(fù)效果。結(jié)果骨缺損修復(fù)后,8、12周時對橈骨行X線檢查,對照組骨缺損修復(fù)差; 8周時實驗組1部分修復(fù),12周時大部分修復(fù),但仍有1只兔子存在小塊骨缺損;8周時實驗組2大部分修復(fù),12周時全部修復(fù),實驗組2可見髓腔通暢。8、12周時,實驗組1和實驗組2的Lane-Sandhu組織學(xué)評分均顯著高于對照組,實驗組2的Lane-Sandhu組織學(xué)評分均顯著高于實驗組1（P <0. 05）。造模12周后,對照組骨缺損區(qū)多為纖維組織,實驗組1有編織骨形成,但骨小梁紊亂;實驗組2有板成骨形成,骨小梁排列緊密有序。結(jié)論同種異體脂肪干細胞復(fù)合脫鈣骨基質(zhì)對橈骨臨界骨缺損兔模型有一定的價值。 

【文章來源】：實用臨床醫(yī)藥雜志. 2019,23(19)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

脂肪干細胞的培養(yǎng)及傳代(放大倍數(shù)100倍)A、B、C、D依次表示原代脂肪干細胞第

DIO染液(1mmol/L)，將稀釋后的染液重懸第3代rADSCs，調(diào)整細胞濃度為1×106cells/mL，混勻后在CO2培養(yǎng)箱中孵育20min，1000轉(zhuǎn)/min離心10min，去上清液，以新鮮生長培養(yǎng)液重懸細胞;調(diào)整細胞密度為3×105cells/mL，接種于脫鈣骨材料表面(同一批次)，于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4h后，加入生長培養(yǎng)液;第2天更換成骨誘導(dǎo)液培養(yǎng)，分別于接種3、7d后采用熒光顯微鏡與共聚焦顯微鏡觀察細胞在三維支架上的生長情況，見圖2。A:誘導(dǎo)3d的表現(xiàn)B:誘導(dǎo)7d的表現(xiàn)圖2激光共聚焦顯微鏡觀察DIO標記的細胞接種至脫鈣骨支架材料上成骨誘導(dǎo)3、7d的表現(xiàn)(放大倍數(shù)40倍)將第3代rADSCs以3×105cells/mL密度接種于脫鈣骨材料上(同一批次)，培養(yǎng)箱孵育4h后加入GM，第2天更換為成骨誘導(dǎo)液。以生長培養(yǎng)液作為對照組。分別于接種1、3、5、7、9、12、15d后收集材料上的細胞，以Hoechst33258DNA定量方法對rADSCs進行細胞計數(shù)，對未接種細胞的脫鈣骨材料進行相同的處理，所測值作為空白對照，并從各檢測值中減去。利用測得熒光強度的吸光度(OD)值來反映細胞的生長趨勢，即OD值越大代表細胞生長趨勢越好。見圖3。1．7干預(yù)方式對照組未予任何干預(yù)，實驗組1在骨缺損部位植入脫鈣骨基質(zhì)，實驗組2在骨缺損部位植入同種異體脂肪干細胞復(fù)合脫鈣骨基質(zhì)。第8、12周時行X線、病理切片和解剖學(xué)檢查，明確骨缺A:未接種在脫鈣骨材料上的細胞;B:已接種在脫鈣骨材料上的細胞圖3細胞在三維材料上的增殖曲線損的修復(fù)效果。1．8觀察指標Lane-Sandhu組織學(xué)評分標準評分、放射學(xué)評第

量方法對rADSCs進行細胞計數(shù)，對未接種細胞的脫鈣骨材料進行相同的處理，所測值作為空白對照，并從各檢測值中減去。利用測得熒光強度的吸光度(OD)值來反映細胞的生長趨勢，即OD值越大代表細胞生長趨勢越好。見圖3。1．7干預(yù)方式對照組未予任何干預(yù)，實驗組1在骨缺損部位植入脫鈣骨基質(zhì)，實驗組2在骨缺損部位植入同種異體脂肪干細胞復(fù)合脫鈣骨基質(zhì)。第8、12周時行X線、病理切片和解剖學(xué)檢查，明確骨缺A:未接種在脫鈣骨材料上的細胞;B:已接種在脫鈣骨材料上的細胞圖3細胞在三維材料上的增殖曲線損的修復(fù)效果。1．8觀察指標Lane-Sandhu組織學(xué)評分標準評分、放射學(xué)評第19期閆海等:同種異體脂肪干細胞復(fù)合脫鈣骨基質(zhì)在橈骨臨界骨缺損兔模型中的價值·3·


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