本文關(guān)鍵詞：分子生態(tài)學(xué)技術(shù)在益生菌功能評價(jià)的應(yīng)用研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：腸道菌群是構(gòu)筑腸道粘膜屏障的主要組成部分,在維持腸道功能及機(jī)體的健康方面發(fā)揮著重要的生理意義。益生菌具有通過生物拮抗糾正微生態(tài)失衡達(dá)到治療腸道菌群失調(diào)的功效,且可以避免抗生素應(yīng)用的副作用,具有極大的發(fā)展?jié)摿�。目�?益生菌在消化道內(nèi)的作用機(jī)理尚不明確,單純通過體外微生物培養(yǎng),很難全面認(rèn)識某種益生菌的作用。本實(shí)驗(yàn)以植物乳桿菌為目標(biāo)益生菌,通過連續(xù)5天大劑量抗生素頭孢地尼處理昆明小鼠建立腸道菌群失調(diào)動物模型,運(yùn)用現(xiàn)代分子生態(tài)學(xué)技術(shù)PCR-DGGE結(jié)合傳統(tǒng)培養(yǎng)法觀察和分析了此目標(biāo)菌株對腸道菌群失調(diào)的調(diào)整作用。并監(jiān)測了植物乳桿菌作用過程中腸道菌群的變化情況。結(jié)果：(1)腸道菌群失調(diào)模型的制備：連續(xù)5天大劑量抗生素頭孢地尼處理,且停用抗生素一周檢測腸道細(xì)菌乳桿菌、雙歧桿菌、腸桿菌、腸球菌及厭氧總菌數(shù)量均下降,與正常對照組相比,具有極顯著性差異(P0.01),模型制備成功；(2)植物乳桿菌對腸道菌群失調(diào)的調(diào)節(jié)作用：在成功制備動物模型基礎(chǔ)上,植物乳桿菌治療組乳桿菌、腸桿菌、厭氧總菌、腸球菌有較明顯的恢復(fù),雙歧桿菌雖也有恢復(fù)但增長幅度不及其他菌；DGGE圖譜分析表明,植物乳桿菌組與正常對照組具有一定程度的相似性。植物乳桿菌組多樣性指數(shù)與自然恢復(fù)組相比,具有明顯差異；說明植物乳桿菌對抗生素誘導(dǎo)的腸道菌群失調(diào)具有一定的調(diào)節(jié)作用。(3)植物乳桿菌對腸道菌群的調(diào)節(jié)過程：隨著植物乳桿菌飼喂時間的延長,小鼠腸道菌群豐富度呈現(xiàn)逐漸增加的演替過程,至飼喂第四天腸道菌群多樣性與正常小鼠基本一致。DGGE圖譜測序結(jié)果表明植物乳桿菌調(diào)節(jié)小鼠腸道菌群失調(diào)的作用主要表現(xiàn)在兩個方面：選擇性地增加有益菌如 Bacteroides stercoris、Bacteroides uniformis strain等的量；抑制致病菌如(Clostridium clostridioforme、Pseudomonas stutzeri等的生長。(4) PCR-DGGE法在分析復(fù)雜的腸道菌群影響方面,是一種快速、有效的分子生物學(xué)方法,尤其在監(jiān)測微生態(tài)區(qū)系的菌群動態(tài)變化方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢。
【關(guān)鍵詞】：腸道微生態(tài) 頭孢地尼 菌群失調(diào) 植物乳桿菌 變性梯度凝膠電泳
【學(xué)位授予單位】：天津科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R371
【目錄】：

• 摘要4-5
• ABSTRACT5-9
• 1 前言9-19
• 1.1 腸道菌群9-12
• 1.1.1 腸道菌群的構(gòu)成9-10
• 1.1.2 腸道菌群的分類10
• 1.1.3 腸道菌群的生理作用10-11
• 1.1.4 腸道菌群的微生態(tài)失調(diào)11-12
• 1.2 益生菌12-13
• 1.2.1 益生菌的概念12
• 1.2.2 益生菌的作用12-13
• 1.3 分子生態(tài)學(xué)方法在腸道微生物群落分析中的應(yīng)用13-16
• 1.3.1 傳統(tǒng)的微生物學(xué)方法13
• 1.3.2 生物標(biāo)記法13-14
• 1.3.3 生理學(xué)的方法——BIOLOG ECO微孔板14
• 1.3.4 基于PCR的微生物分子生態(tài)學(xué)技術(shù)14-16
• 1.4 腸道微生態(tài)的分子生態(tài)學(xué)技術(shù)研究進(jìn)展16-18
• 1.5 研究的目的和意義18-19
• 2 材料與方法19-26
• 2.1 試驗(yàn)材料19-20
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)菌株19
• 2.1.2 抗生素19
• 2.1.3 實(shí)驗(yàn)動物19
• 2.1.4 主要試劑19
• 2.1.5 儀器設(shè)備19-20
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法20-26
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)小鼠分組與抗生素誘導(dǎo)的腸道菌群失調(diào)動物模型的建立20
• 2.2.2 植物乳桿菌對抗生素誘導(dǎo)小鼠腸道菌群失調(diào)的調(diào)節(jié)作用20
• 2.2.3 糞便樣本的采集及檢測指標(biāo)20-21
• 2.2.4 腸道細(xì)菌微生物區(qū)系的PCR-DGGE分析21-26
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析26-41
• 3.1 小鼠腸道菌群失調(diào)動物模型的建立26
• 3.2 植物乳桿菌對抗生素誘導(dǎo)的小鼠腸道菌群失調(diào)的調(diào)整作用26-41
• 3.2.1 各組小鼠體重26-27
• 3.2.2 各組小鼠日攝食量的變化27
• 3.2.3 小鼠糞便活菌計(jì)數(shù)27-28
• 3.2.4 小鼠糞便細(xì)菌微生物區(qū)系的PCR-DGGE分析28-41
• 4 討論41-48
• 4.1 抗生素頭孢地尼制備腸道菌群失調(diào)動物模型41-42
• 4.2 糞便DNA的提取42-43
• 4.3 益生菌對腸道菌群失調(diào)的調(diào)節(jié)作用43-46
• 4.4 DGGE譜帶亮度上的差異46
• 4.5 16S RDNA基因和DGGE技術(shù)應(yīng)用46-48
• 5 結(jié)論48-49
• 5.1 腸道菌群失調(diào)動物模型的制備48
• 5.2 植物乳桿菌對腸道菌群失調(diào)的調(diào)節(jié)作用48
• 5.3 植物乳桿菌對腸道菌群紊亂調(diào)節(jié)作用過程的監(jiān)測48
• 5.4 現(xiàn)代分子生態(tài)學(xué)技術(shù)PCR-DGGE技術(shù)48-49
• 6 展望49-50
• 7 參考文獻(xiàn)50-56
• 8 攻讀碩士期間發(fā)表論文情況56-57
• 9 致謝57-58
• 附錄58-60

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：328576