目的:觀察Blm解旋酶在衰老小鼠肝、脾及骨髓組織中的表達(dá)水平。方法:20只小鼠均分為正常對照組和衰老組,雌雄各半,采用D-gal致衰老的方法制備衰老小鼠模型;觀察小鼠生存狀態(tài)、監(jiān)測體質(zhì)量,檢測小鼠血清中超氧化物氣化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量和小鼠肝臟中凋亡相關(guān)蛋白Bax的表達(dá)量;利用蛋白質(zhì)印記法和石蠟切片免疫組織化學(xué)染色方法檢測小鼠肝臟、脾臟和骨髓中Blm蛋白的表達(dá)。結(jié)果:衰老模型組小鼠生存狀態(tài)變差,體質(zhì)量增長低于對照組小鼠;與對照組小鼠比較,血清SOD活性降低、MAD含量升高、Bax蛋白表達(dá)增多,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;衰老模型組小鼠的脾臟H-E切片邊緣區(qū)模糊,白髓與紅髓界限模糊;胸腺H-E切片顯示衰老模型組小鼠胸腺皮質(zhì)、髓質(zhì)界限模糊、胸腺細(xì)胞分布稀疏;衰老組小鼠Blm解旋酶在肝臟、脾臟和骨髓的表達(dá)均低于對照組小鼠,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論:Blm解旋酶在衰老小鼠體內(nèi)的表達(dá)降低,Blm解旋酶可能與衰老發(fā)生的機(jī)制相關(guān)。 

【文章來源】：貴州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2019,44(07)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

圖1兩組小鼠肝組織Bax蛋白表達(dá)(SP，×400)

注:A為對照組小鼠脾臟，B為衰老組小鼠脾臟，C為對照組小鼠胸腺，D為衰老組小鼠胸腺圖2兩組小鼠脾臟和胸腺組織學(xué)(SP，×400)Fig．2Histologyofspleenandthymusofmiceinthetwogroups注:A、B分別為衰老組和對照組小鼠肝臟Blm表達(dá)，C、D分別為衰老組和對照組小鼠脾臟Blm表達(dá)，E、F分別為衰老組和對照組小鼠骨髓Blm表達(dá)圖3免疫組織化學(xué)染色檢測小鼠肝臟、脾臟和骨髓中組織Blm的表達(dá)(SP，×400)Fig．3TheexpressionsofBlmproteinintheliver，spleenandbonemarrowofmicedetectedbyimmunohistochemistry保研究準(zhǔn)確、高效進(jìn)行的前提。研究證實(shí)，通過D-gal致衰老的造模方法所制備的衰老動物模型與自然衰老動物有較高相似性。D-半乳糖是一種小分子單糖，在體內(nèi)的量正常時(shí)是一種生理營養(yǎng)成分，可被氧化為葡萄糖，為機(jī)體提供能量［6－7］，但是，當(dāng)機(jī)體中D-半乳糖量過高時(shí)，氧化反應(yīng)會使D-半乳糖被氧化成醛糖和過氧化氫，產(chǎn)生超氧陰離子和氧自由基，從而導(dǎo)致機(jī)體生理功能發(fā)生改變。表現(xiàn)出與衰老相似的癥狀［8］。相關(guān)研究表明機(jī)體細(xì)胞內(nèi)半乳糖濃度升高，在酶的催化下還原成半乳糖醇，半乳糖醇不能被細(xì)胞代謝而堆積在細(xì)胞內(nèi)，細(xì)胞滲透壓發(fā)生改變，細(xì)胞出現(xiàn)功能障礙，加速衰老和凋亡［9］。人類ＲecQ解旋酶基因家族包括ＲecQL1、Ｒec-QL5、Blm、Wrn及ＲecQL45個(gè)成員，后三者的突變均導(dǎo)致了相關(guān)的疾病，依次為Bloom綜合征、Wer-ner綜合征和ＲTS綜合征［10－11］。Sharma等［12］發(fā)現(xiàn)，Blm解旋酶具有促進(jìn)細(xì)胞DNA復(fù)制、修復(fù)、重組以及維持基因組穩(wěn)定性的功能。對秀麗隱桿線蟲的研究發(fā)現(xiàn)，基因確實(shí)可以影響生物的衰老及壽命，衰老的發(fā)生機(jī)制并非由單一基因決定，可能是一個(gè)基因群［13］。細(xì)胞衰老是生物衰老的基本單位，是

注:A為對照組小鼠脾臟，B為衰老組小鼠脾臟，C為對照組小鼠胸腺，D為衰老組小鼠胸腺圖2兩組小鼠脾臟和胸腺組織學(xué)(SP，×400)Fig．2Histologyofspleenandthymusofmiceinthetwogroups注:A、B分別為衰老組和對照組小鼠肝臟Blm表達(dá)，C、D分別為衰老組和對照組小鼠脾臟Blm表達(dá)，E、F分別為衰老組和對照組小鼠骨髓Blm表達(dá)圖3免疫組織化學(xué)染色檢測小鼠肝臟、脾臟和骨髓中組織Blm的表達(dá)(SP，×400)Fig．3TheexpressionsofBlmproteinintheliver，spleenandbonemarrowofmicedetectedbyimmunohistochemistry保研究準(zhǔn)確、高效進(jìn)行的前提。研究證實(shí)，通過D-gal致衰老的造模方法所制備的衰老動物模型與自然衰老動物有較高相似性。D-半乳糖是一種小分子單糖，在體內(nèi)的量正常時(shí)是一種生理營養(yǎng)成分，可被氧化為葡萄糖，為機(jī)體提供能量［6－7］，但是，當(dāng)機(jī)體中D-半乳糖量過高時(shí)，氧化反應(yīng)會使D-半乳糖被氧化成醛糖和過氧化氫，產(chǎn)生超氧陰離子和氧自由基，從而導(dǎo)致機(jī)體生理功能發(fā)生改變。表現(xiàn)出與衰老相似的癥狀［8］。相關(guān)研究表明機(jī)體細(xì)胞內(nèi)半乳糖濃度升高，在酶的催化下還原成半乳糖醇，半乳糖醇不能被細(xì)胞代謝而堆積在細(xì)胞內(nèi)，細(xì)胞滲透壓發(fā)生改變，細(xì)胞出現(xiàn)功能障礙，加速衰老和凋亡［9］。人類ＲecQ解旋酶基因家族包括ＲecQL1、Ｒec-QL5、Blm、Wrn及ＲecQL45個(gè)成員，后三者的突變均導(dǎo)致了相關(guān)的疾病，依次為Bloom綜合征、Wer-ner綜合征和ＲTS綜合征［10－11］。Sharma等［12］發(fā)現(xiàn)，Blm解旋酶具有促進(jìn)細(xì)胞DNA復(fù)制、修復(fù)、重組以及維持基因組穩(wěn)定性的功能。對秀麗隱桿線蟲的研究發(fā)現(xiàn)，基因確實(shí)可以影響生物的衰老及壽命，衰老的發(fā)生機(jī)制并非由單一基因決定，可能是一個(gè)基因群［13］。細(xì)胞衰老是生物衰老的基本單位，是

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]漢防己甲素衍生物對三陰性乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞的抑制作用及其機(jī)制[J]. 吳翱蘭,張榮紅,黃晏軍,鄭藝,潘衛(wèi)東,劉杰麟.  腫瘤. 2016(12)
[2]RecQ酵母解旋酶:DNA修復(fù),基因組穩(wěn)定性和衰老的線索[J]. 李星慧,秦嬌琴,賈春媛,何本進(jìn),杜建財(cái),楊帆,原慧萍,朱小泉,唐雷,孫亮,張毓洪,楊澤.  中國老年保健醫(yī)學(xué). 2015(05)
[3]三種癌細(xì)胞株中Bloom綜合征解旋酶（BLM）的表達(dá)水平高于正常細(xì)胞[J]. 孟惠惠,許厚強(qiáng),劉金河,王時(shí)雄.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2014(06)
[4]D-半乳糖促小鼠衰老模型的衰老程度與自然生長鼠齡的比較[J]. 關(guān)萍,郭搏,王惠,張梅,馬世良,張立軍.  動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2013(01)



本文編號：3259005