Hep G2、Bel-7402細(xì)胞裸鼠皮下移植性肝癌模型的實(shí)驗(yàn)研究
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【摘要】:背景 肝癌是臨床上最常見的惡性腫瘤之一,其中肝細(xì)胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是肝癌中最常見的類型,占到病例總數(shù)的70%~80%。為了深入研究肝癌的發(fā)病機(jī)理,探索新的治療方法,建立科學(xué)的肝癌動(dòng)物模型是實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵。 本課題擬通過(guò)比較Hep G2、Bel-7402兩種人肝癌細(xì)胞在不同條件下行裸鼠皮下移植時(shí)成瘤率的不同,以及兩種細(xì)胞成瘤后腫瘤形態(tài)、腫瘤體積變化規(guī)律及AFP表達(dá)方面的差異,從中選擇一種合適的腫瘤細(xì)胞,并探索其最佳的成瘤條件,為進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)提供數(shù)據(jù)。 目的 1.比較Hep G2、Bel-7402兩種人肝癌細(xì)胞在不同條件下行裸鼠皮下移植時(shí)成瘤率與成瘤潛伏期的差別。 2.比較Hep G2、Bel-7402兩種細(xì)胞荷瘤鼠皮下腫瘤生長(zhǎng)速度的差別,并歸納其腫瘤增長(zhǎng)規(guī)律。 3.比較Hep G2、Bel-7402兩種細(xì)胞荷瘤鼠腫瘤大體形態(tài)學(xué)差異,檢測(cè)血清AFP濃度并做腫瘤組織的病理、免疫組化分析。 方法 1.將90只BALB/c裸鼠按照腫瘤細(xì)胞懸液的濃度及鼠齡隨機(jī)平均分成9組,其中8組分別皮下注射Hep G2細(xì)胞和Bel-7402細(xì)胞,第9組為對(duì)照組。比較Hep G2、Bel-7402這兩種人肝癌細(xì)胞在不同條件下成瘤率與成瘤潛伏期的差別。 2.Hep G2、Bel-7402兩種細(xì)胞裸鼠皮下成瘤后每周用游標(biāo)卡尺測(cè)量瘤體大小。腫瘤體積的計(jì)算公式V=π ab2/6(V:體積,a:腫瘤長(zhǎng)徑,b:腫瘤短徑)。 3.裸鼠成瘤后,利用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)裸鼠血清AFP濃度,觀察Hep G2、Bel-7402兩種細(xì)胞形成的裸鼠皮下腫瘤大體形態(tài)的差異,將切下的腫瘤組織行免疫組化法檢測(cè)AFP及Hep Par1表達(dá)。 結(jié)果 1.當(dāng)Hep G2細(xì)胞懸液濃度達(dá)到5.0×107/ml,4~8周齡和8~12周齡的裸鼠均能得到很高的成瘤率(均為100%)。而對(duì)于Bel-7402細(xì)胞,細(xì)胞懸液濃度必須達(dá)到5.0×107/ml,且僅在4~8周齡的裸鼠皮下注射才能得到較高的成瘤率(80%)。 2. Hep G2、Bel-7402兩種細(xì)胞在同等條件下裸鼠個(gè)體間的出瘤時(shí)間并不恒定,Hep G2細(xì)胞平均成瘤時(shí)間為19.4±5.2天;而Bel-7402細(xì)胞平均成瘤時(shí)間為34.3±15.7天。 3. Hep G2細(xì)胞裸鼠皮下腫瘤的典型表現(xiàn)為多發(fā)的節(jié)結(jié)樣突起,腫瘤組織內(nèi)部由多個(gè)白色的節(jié)結(jié)樣團(tuán)塊組成。Bel-7402細(xì)胞皮下腫瘤的表面則為較平滑,腫瘤組織內(nèi)部周邊較韌,瘤體中心則主要是豆腐渣樣壞死組織。 4.兩種細(xì)胞荷瘤鼠成瘤后第4周查血清AFP均陰性。免疫組化檢測(cè)Hep G2細(xì)胞腫瘤HepPar1表達(dá)呈陽(yáng)性、Bel-7402細(xì)胞腫瘤Hep Par1表達(dá)呈陰性;而兩種細(xì)胞AFP表達(dá)均為陰性。 結(jié)論 1.建立裸鼠肝癌動(dòng)物模型時(shí),Hep G2細(xì)胞較Bel-7402細(xì)胞更易裸鼠皮下成瘤。 2.Hep G2細(xì)胞較Bel-7402細(xì)胞成瘤潛伏期更短,,并且成瘤后腫瘤增長(zhǎng)速度更快。 3.Hep G2細(xì)胞、Bel-7402兩種細(xì)胞AFP表達(dá)均呈陰性。
【關(guān)鍵詞】:肝細(xì)胞癌 動(dòng)物模型 甲胎蛋白 Hep G2細(xì)胞 Bel-7402細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】:山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R735.7;R-332
【目錄】:
- 摘要5-7
- ABSTRACT7-9
- 插圖、附表清單9-10
- 中英文縮略詞表10-11
- 前言11-13
- 第一部分 Hep G2、Bel-7402 兩種人肝癌細(xì)胞在不同條件下裸鼠皮下移植性肝癌模型成瘤結(jié)果分析13-27
- 材料與方法13-18
- 結(jié)果18-23
- 討論23-27
- 第二部分 Hep G2、Bel-7402 兩種人肝癌細(xì)胞荷瘤鼠血清 AFP 濃度及其腫瘤組織的病理、免疫組化分析27-37
- 材料與方法27-29
- 結(jié)果29-33
- 討論33-37
- 結(jié)論37-38
- 參考文獻(xiàn)38-41
- 綜述41-48
- 參考文獻(xiàn)45-48
- 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況48-49
- 致謝49-50
- 個(gè)人簡(jiǎn)歷50
【參考文獻(xiàn)】
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本文關(guān)鍵詞:Hep G2、Bel-7402細(xì)胞裸鼠皮下移植性肝癌模型的實(shí)驗(yàn)研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號(hào):324524
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