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Hep G2、Bel-7402細胞裸鼠皮下移植性肝癌模型的實驗研究

發(fā)布時間:2017-04-24 16:07

  本文關(guān)鍵詞:Hep G2、Bel-7402細胞裸鼠皮下移植性肝癌模型的實驗研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:背景 肝癌是臨床上最常見的惡性腫瘤之一,其中肝細胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是肝癌中最常見的類型,占到病例總數(shù)的70%~80%。為了深入研究肝癌的發(fā)病機理,探索新的治療方法,建立科學(xué)的肝癌動物模型是實驗的關(guān)鍵。 本課題擬通過比較Hep G2、Bel-7402兩種人肝癌細胞在不同條件下行裸鼠皮下移植時成瘤率的不同,以及兩種細胞成瘤后腫瘤形態(tài)、腫瘤體積變化規(guī)律及AFP表達方面的差異,從中選擇一種合適的腫瘤細胞,并探索其最佳的成瘤條件,為進一步實驗提供數(shù)據(jù)。 目的 1.比較Hep G2、Bel-7402兩種人肝癌細胞在不同條件下行裸鼠皮下移植時成瘤率與成瘤潛伏期的差別。 2.比較Hep G2、Bel-7402兩種細胞荷瘤鼠皮下腫瘤生長速度的差別,并歸納其腫瘤增長規(guī)律。 3.比較Hep G2、Bel-7402兩種細胞荷瘤鼠腫瘤大體形態(tài)學(xué)差異,檢測血清AFP濃度并做腫瘤組織的病理、免疫組化分析。 方法 1.將90只BALB/c裸鼠按照腫瘤細胞懸液的濃度及鼠齡隨機平均分成9組,其中8組分別皮下注射Hep G2細胞和Bel-7402細胞,第9組為對照組。比較Hep G2、Bel-7402這兩種人肝癌細胞在不同條件下成瘤率與成瘤潛伏期的差別。 2.Hep G2、Bel-7402兩種細胞裸鼠皮下成瘤后每周用游標(biāo)卡尺測量瘤體大小。腫瘤體積的計算公式V=π ab2/6(V:體積,a:腫瘤長徑,b:腫瘤短徑)。 3.裸鼠成瘤后,利用化學(xué)發(fā)光法檢測裸鼠血清AFP濃度,觀察Hep G2、Bel-7402兩種細胞形成的裸鼠皮下腫瘤大體形態(tài)的差異,將切下的腫瘤組織行免疫組化法檢測AFP及Hep Par1表達。 結(jié)果 1.當(dāng)Hep G2細胞懸液濃度達到5.0×107/ml,4~8周齡和8~12周齡的裸鼠均能得到很高的成瘤率(均為100%)。而對于Bel-7402細胞,細胞懸液濃度必須達到5.0×107/ml,且僅在4~8周齡的裸鼠皮下注射才能得到較高的成瘤率(80%)。 2. Hep G2、Bel-7402兩種細胞在同等條件下裸鼠個體間的出瘤時間并不恒定,Hep G2細胞平均成瘤時間為19.4±5.2天;而Bel-7402細胞平均成瘤時間為34.3±15.7天。 3. Hep G2細胞裸鼠皮下腫瘤的典型表現(xiàn)為多發(fā)的節(jié)結(jié)樣突起,腫瘤組織內(nèi)部由多個白色的節(jié)結(jié)樣團塊組成。Bel-7402細胞皮下腫瘤的表面則為較平滑,腫瘤組織內(nèi)部周邊較韌,瘤體中心則主要是豆腐渣樣壞死組織。 4.兩種細胞荷瘤鼠成瘤后第4周查血清AFP均陰性。免疫組化檢測Hep G2細胞腫瘤HepPar1表達呈陽性、Bel-7402細胞腫瘤Hep Par1表達呈陰性;而兩種細胞AFP表達均為陰性。 結(jié)論 1.建立裸鼠肝癌動物模型時,Hep G2細胞較Bel-7402細胞更易裸鼠皮下成瘤。 2.Hep G2細胞較Bel-7402細胞成瘤潛伏期更短,,并且成瘤后腫瘤增長速度更快。 3.Hep G2細胞、Bel-7402兩種細胞AFP表達均呈陰性。
【關(guān)鍵詞】:肝細胞癌 動物模型 甲胎蛋白 Hep G2細胞 Bel-7402細胞
【學(xué)位授予單位】:山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R735.7;R-332
【目錄】:
  • 摘要5-7
  • ABSTRACT7-9
  • 插圖、附表清單9-10
  • 中英文縮略詞表10-11
  • 前言11-13
  • 第一部分 Hep G2、Bel-7402 兩種人肝癌細胞在不同條件下裸鼠皮下移植性肝癌模型成瘤結(jié)果分析13-27
  • 材料與方法13-18
  • 結(jié)果18-23
  • 討論23-27
  • 第二部分 Hep G2、Bel-7402 兩種人肝癌細胞荷瘤鼠血清 AFP 濃度及其腫瘤組織的病理、免疫組化分析27-37
  • 材料與方法27-29
  • 結(jié)果29-33
  • 討論33-37
  • 結(jié)論37-38
  • 參考文獻38-41
  • 綜述41-48
  • 參考文獻45-48
  • 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況48-49
  • 致謝49-50
  • 個人簡歷50

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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本文編號:324524

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