B19病毒屬細(xì)小病毒屬，是動物病毒中結(jié)構(gòu)最簡單的一種單鏈、線狀DNA病毒，于1975年被發(fā)現(xiàn)，隨后被證實是已知的細(xì)小病毒屬中唯一致人類疾病的病毒，可引起傳染性紅斑、關(guān)節(jié)炎、粒細(xì)胞減少癥等，甚至引起嚴(yán)重的血液系統(tǒng)疾病。其主要經(jīng)呼吸道、血液途徑和母嬰垂直傳播，可引起社區(qū)局部流行、院內(nèi)感染和暴發(fā)性流行，并在全球普遍存在。1990年首次證實我國存在該病毒感染，隨后的研究發(fā)現(xiàn)該病毒是我國兒童急性再障危象、急性血小板減少性紫癜及孕婦非免疫性流產(chǎn)等疾病的重要病因之一，并與先天性心臟病、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）發(fā)病相關(guān)。同時，我國婦女和兒童血清中保護性抗體水平低，易發(fā)生該病毒感染。尤其免疫功能低下或缺陷患者可發(fā)生持續(xù)感染、重癥血液病和慢性貧血，危及生命。 B19病毒基因約5.6kb，由一個內(nèi)含子和位于兩端的重復(fù)序列組成。在B19病毒基因組內(nèi)有兩個大的開放讀框，編碼非結(jié)構(gòu)蛋白（NS）和兩個衣殼蛋白（VP1和VP2）。B19病毒序列存在變異。NS基因最為保守，在病毒的復(fù)制中起重要的作用，VP1和VP2表現(xiàn)出較大的變異性，約為2～3％。根據(jù)酶切圖譜的不同，將病毒分為4型。中國西安的 ... 

【文章來源】：中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：124 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖IVP卜pQE3O原核表達(dá)載體構(gòu)建示意圈

圖ZvPI一pRSETA原核表達(dá)載體構(gòu)建示意圖.3重組體的鑒定.3.1酶切鑒定為證實目的基因片段是否插入正確，分別對VPI一pQE0和VPI一pRSETA重組體進行BamHI、Sall和BamHI、Pstl酶切，通過瓊脂糖凝膠電泳證實經(jīng)雙酶切分別切出分子約480bp和3.4kb，480bp和2.gkb的片段，與插入片段子量相符，說明目的基因插入正確(圖3)

圖3vpl一pqE30和vpl一pRsETA重組體酶切鑒定圖1:VPI一pRSETA經(jīng)BamHI、P，tl雙酶切2:VPI一PRSETA3;Vpl一pQE30經(jīng)BamHI、Sa1T雙酶切4:VPI一pQE305;pUC19一VPI經(jīng)BamHI、Sall雙酶切，6:PUC19一VP17:marker重組體陽性克隆序列測定I一pQE30和vP一pRsETA重組體陽性克隆遞海鼎安生物科技有限公司進行序列測定，測序列完全正確(圖4，5，6，7)。TAACAAATCCAGATGGGTTCTGCAGGTCATTACTGAACAGGAGTCCAAGCTCAGCTAATTAAGCTTGGCT

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]我國再障患兒血清中人細(xì)小病毒B19 NS基因序列測定及變異分析（英文）[J]. 張國成,蘇國平,孫新,許東亮,陳彩平,湯雪晴.  中國當(dāng)代兒科雜志. 2003(01)
[2]人細(xì)小病毒B19中國株VP1蛋白獨特區(qū)基因片段序列變異分析[J]. 采華,張國成,許東亮,李飚.  第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2002(16)
[3]我國人細(xì)小病毒B19VP1和VP2部分基因序列測定及變異分析[J]. 張國成,孫新,許東亮,采華,李飚,陳星琪.  第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2002(04)
[4]國人細(xì)小病毒B19感染相關(guān)疾病譜[J]. 張國成,許東亮,王曉明,張笑飛,錢新宏,鄭躍杰,李飚.  第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 1999(06)



本文編號：3230816