發(fā)布時間：2017-04-23 05:08

  本文關(guān)鍵詞：microRNAs在犬心衰模型中的變化及肝素對其影響的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景及目的：心力衰竭（心衰）是各種心血管疾病的嚴(yán)重階段和發(fā)展到晚期的共同轉(zhuǎn)歸，心衰5年內(nèi)死亡率接近50%。心力衰竭的發(fā)生機(jī)制已有研究，但對于心衰預(yù)防、早期診斷的研究仍相對較少。microRNAs（miRNAs）是一種高度保守的內(nèi)源性小分子非編碼RNA，在心衰發(fā)生和進(jìn)展過程中在多個方面發(fā)揮著重要作用,但miRNAs能否用于心衰的預(yù)防和早期診斷目前尚沒有相關(guān)研究。本研究利用右心室快速起搏制作犬心衰模型，分別檢測犬左心室組織及起搏各時間點(diǎn)血漿中幾種與心衰相關(guān)miRNAs的變化,尋找潛在的心衰生物學(xué)指標(biāo)及治療靶點(diǎn)。方法：采用完全隨機(jī)分組設(shè)計(jì)，將12只雜種犬分為對照組與起搏組，每組6只。植入起搏器，，起搏組以240~260次/min頻率刺激右心室，對照組起搏器未起搏。送回動物房飼養(yǎng)，每日傷口處酒精擦拭，術(shù)后3天注射抗生素，預(yù)防感染。分別于術(shù)后1天、1周、2周時用EDTA-抗凝管于前肢隱靜脈取血5~6ml。在術(shù)后2周時測定犬血流動力學(xué)指標(biāo)，處死取左心室心尖部組織。利用RT-qPCR的方法分別檢測不同時間點(diǎn)血漿及左心室組織中的miR-21、miR-133a、miR-328、miR-423、miR-499的含量。 結(jié)果：起搏組與對照組相比左心室組織中的miR-328與miR-499相對表達(dá)量明顯下降，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；在循環(huán)血漿中，miR-21、miR-133a、miR-423a、miR-499在起搏1天時其相對表達(dá)量明顯升高且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)，隨著起搏時間的延長，這4種miRNAs的相對表達(dá)量逐漸降低，其中miR423a、miR-499相對表達(dá)量下降明顯，在起搏2周時與對照組相比其差異已無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。miR-21相對表達(dá)量下降較平緩，在起搏2周時與對照組相比其差異仍具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。在循環(huán)血漿中miR-328在起搏1天時其相對表達(dá)量明顯降低且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)，隨著起搏時間的延長，未發(fā)生明顯的變化。 結(jié)論：血漿miR-328水平在本心衰模型中能夠反映其在心肌組織中的變化，并且有可能成為潛在的心衰治療靶點(diǎn)；miR-21、miR-133a、miR-423a、miR-499有可能成為心衰潛在的心衰生物指標(biāo)。 背景及目的：隨著介入治療在心血管領(lǐng)域的不斷開展，使得肝素成為治療心血管疾病中應(yīng)用最廣泛試劑之一。既往有多篇文章報道肝素可以明顯抑制PCR擴(kuò)增效率，這種特性對研究miRNA與心血管疾病的關(guān)系造成巨大阻礙，所以搞清楚肝素能影響miRNA的具體范圍和機(jī)制對其研究具有重要意義。在本研究中我們主要模擬介入環(huán)境觀察肝素是否會對血漿和組織miRNA提取及PCR擴(kuò)增效率產(chǎn)生影響。 方法：將雜種犬9只,雌雄不分,隨機(jī)分為兩組,對照組(n=5)和實(shí)驗(yàn)組(n=4)，實(shí)驗(yàn)組于右側(cè)股靜脈穿刺置管，連接內(nèi)盛肝素的注射器,回抽見血后推入肝素1ml6000U，再推入肝素鹽水2ml，十分鐘后用更換注射器從鞘管內(nèi)抽取靜脈血10ml，棄用。再次更換注射器重新從鞘管內(nèi)抽取6ml靜脈血置于EDTA-抗凝管中；對照組犬用新注射器直接從股靜脈取血6ml置于EDTA-抗凝管中。用放血休克法處死犬，取犬左心室心尖部組織，應(yīng)用RT-qPCR法檢測實(shí)驗(yàn)組和對照組中血漿和組織的miRNA。 結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組與對照組比較血漿miRNA Ct值明顯增高，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），并且實(shí)驗(yàn)組中的所有樣品均呈現(xiàn)非特異性擴(kuò)增，并且擴(kuò)增曲線相同；組織miRNACt值無明顯變化，實(shí)驗(yàn)組中所有樣品均呈特異性擴(kuò)增。 結(jié)論：靜脈注射肝素短時間內(nèi)對血漿miRNA的PCR擴(kuò)增效率造成明顯影響，對組織miRNA提取及PCR擴(kuò)增效率無明顯影響。
【關(guān)鍵詞】：心力衰竭 microRNA 循環(huán)microRNA 心衰模型 肝素 miRNA RT-qPCR
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R541.6;R-332
【目錄】：

• 第一部分 組織與血漿中 microRNAs 在犬心衰模型中的變化5-25
• 中文摘要5-7
• Abstract7-8
• 前言8-10
• 實(shí)驗(yàn)方案10-14
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果14-21
• 討論21-24
• 結(jié)論24-25
• 第二部分 肝素對組織與血漿 microRNAs 表達(dá)的影響25-41
• 中文摘要25-26
• Abstract26-27
• 前言27-28
• 實(shí)驗(yàn)方案28-34
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果34-38
• 討論38-40
• 結(jié)論40-41
• 參考文獻(xiàn)41-44
• 論文綜述44-51
• 參考文獻(xiàn)48-51
• 致謝51-52
• 個人簡歷52-53

【共引文獻(xiàn)】

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中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

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  本文關(guān)鍵詞：microRNAs在犬心衰模型中的變化及肝素對其影響的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：321866