目的：研究臍帶間充質(zhì)干細胞（UC-MSCs）的衰老對其免疫調(diào)控能力的影響。并利用轉(zhuǎn)基囚技術(shù)使臍帶間充質(zhì)干細胞（UC-MSCs）過表達吲哚胺2,3雙加氧酶-1（IDO-1）或環(huán)加氧酶-2（COX-2）,研究其對MSCs免疫抑制功能的影響。方法：1.運用組織塊貼壁法從臍帶中獲得間充質(zhì)干細胞（MSCs）,并在常氧條件下進行傳代培養(yǎng),通過細胞染色觀察傳代過程中MSCs形態(tài)及核質(zhì)比的變化。2.分別選取第5代（對照組）及第13代（衰老組）MSCs進行研究,運用細胞衰老特異性β-半乳糖苷酶檢測試劑盒進行衰老檢測。對照組及衰老組MSCs分別與外周血單個核細胞（PBMC）共培養(yǎng),同時采用CCK-8細胞計數(shù)試劑盒檢測MSCs（?）寸淋巴細胞增殖能力的影響。3.通過實時定量PCR方法檢測免疫調(diào)控相關(guān)基因在對照組與衰老組MSCs中的表達情況。4.分別構(gòu)建含靶基因IDO-1、COX-2的真核表達重組質(zhì)粒pEGFP-N3/IDO-1及pEGFP-N3/COX-2,運用電轉(zhuǎn)染方法將其轉(zhuǎn)染入MSCs中,并通過Western Blot方法驗證重組質(zhì)粒中靶基因的表達情況。5.轉(zhuǎn)染后MSCs分別記為IDO-1+組、COX-... 

【文章來源】：山東大學山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
目錄
CONTENTS
中文摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 間充質(zhì)干細胞的衰老對其免疫調(diào)控能力的影響
    材料和方法
    結(jié)果
    討論
第二部分 過表達IDO-1和COX-2對間充質(zhì)干細胞免疫調(diào)控能力的影響
    材料和方法
    結(jié)果
    討論
結(jié)論
附圖表
參考文獻
致謝
在學期間發(fā)表文章
學位論文評閱及答辯情況表


【參考文獻】：
期刊論文
[1]人骨髓和臍帶來源間充質(zhì)干細胞體外支持造血能力的比較研究[J]. 劉蒙,楊少光,劉鵬霞,杜偉廷,顧東生,盧士紅,邢文,韓忠朝.  中國實驗血液學雜志. 2009(05)



本文編號：3217042