發(fā)布時(shí)間：2021-06-01 06:30

　　目的 通過蛋白質(zhì)組學(xué)研究探討高氧暴露后幼鼠Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞（AECⅡ）的損傷機(jī)制。方法 將早產(chǎn)SD大鼠原代AECⅡ細(xì)胞分為常氧組和高氧組,分別置于常氧（21%O2）和高氧（95%O2）中培養(yǎng)24 h,于倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變,用蛋白質(zhì)免疫印跡試驗(yàn)（Western Blot）檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）表達(dá)水平,以保證高氧模型的成功建立；收集AECⅡ細(xì)胞總蛋白,采用串聯(lián)質(zhì)譜標(biāo)簽（TMT）標(biāo)記定量蛋白質(zhì)組技術(shù)檢測(cè)其蛋白譜,以高氧暴露后差異倍數(shù)（FC）>1.5、P<0.05雙標(biāo)準(zhǔn)篩選差異蛋白,并對(duì)其進(jìn)行生物信息學(xué)分析；依據(jù)分析結(jié)果,將AECⅡ細(xì)胞分為常氧組、高氧組及高氧+MW167組〔細(xì)胞置于含95%O2的氧艙前30 min加入10 μmol/L的γ泌肽酶抑制劑MW167〕,培養(yǎng)24 h后,用CCK-8細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒檢測(cè)細(xì)胞活性,用實(shí)時(shí)熒光定量反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（qRT-PCR）檢測(cè)Notch通路下游蛋白毛狀蛋白（Hes1）和促凋亡蛋白Bax的mRNA表達(dá)。結(jié)果 ①光鏡下觀察,常氧組細(xì)胞明顯增殖、延展... 

【文章來源】：中華危重病急救醫(yī)學(xué). 2019,(04)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]高氧環(huán)境下肺細(xì)胞形態(tài)及功能變化[J]. 汪娟,黃棟,莫連芹,馬秀,黃穎.  中華危重病急救醫(yī)學(xué). 2018 (08)



本文編號(hào)：3209852