目的：本課題通過細(xì)胞實(shí)驗(yàn)觀察三七總皂苷（PNS）對骨髓基質(zhì)細(xì)胞（BMSCs）是否具有增殖作用。通過兔骨性關(guān)節(jié)炎（OA）模型觀察在OA發(fā)生時,PNS對關(guān)節(jié)軟骨是否具有保護(hù)作用。方法：1.體外實(shí)驗(yàn)：抽取兔BMSCs,培養(yǎng)至第三代,將細(xì)胞調(diào)整密度,接種至96孔板,行PNS干預(yù),分為空白對照組、低濃度用藥組、高濃度用藥組。通過MTT法檢測PNS對兔BMSCs增殖能力的影響。2.體內(nèi)試驗(yàn)：選取雌性新西蘭大白兔21只,隨機(jī)分為3組,每組7只,A組為高濃度藥物治療組；B組為低濃度治療組；C組為空白對照組。通過前交叉韌帶切斷法構(gòu)建骨性關(guān)節(jié)炎模型。手術(shù)后第二周行膝關(guān)節(jié)內(nèi)注射療法治療。治療組注射PNS,對照組注射等量生理鹽水,每周2次,每次注射劑量為每公斤體重0.1ml。第七周將兩組家兔處死,通過X線和CT觀察關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)和骨贅的形成。將膝關(guān)節(jié)取下,通過印度墨水染色評價股骨髁部位軟骨變化情況,分為4級。結(jié)果：經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,體外實(shí)驗(yàn)證明,兩組細(xì)胞增殖效率有顯著差異,用藥組對BMSCs具有明顯增殖作用（P<0.05）；體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證明,兩組股骨髁在印度墨水染色分級上無明顯差異（P>0.05）。結(jié)論：體外實(shí)... 

【文章來源】：南京中醫(yī)藥大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
符號及縮略語
前言
第一部分 文獻(xiàn)綜述
    1. OA發(fā)病機(jī)制的中西醫(yī)研究進(jìn)展
        1.1 OA的流行病學(xué)
        1.2 OA的致病因素
        1.3 OA的病理學(xué)改變
        1.4 中醫(yī)對OA發(fā)病的認(rèn)識
        1.5 小結(jié)與展望
    2. 植物化合物對軟骨的保護(hù)作用研究進(jìn)展
        2.1 促進(jìn)成軟骨分化
        2.2 抑制關(guān)節(jié)軟骨降解
        2.3 抑制金屬蛋白酶活性
        2.4 抑制軟骨肉瘤
        2.5 結(jié)語與展望
    3. 三七活性成分對運(yùn)動系統(tǒng)作用研究進(jìn)展
        3.1 抗炎及抗氧化作用
        3.2 保護(hù)軟骨作用
        3.3 抗疲勞作用
        3.4 提高成骨分化
        3.5 促進(jìn)韌帶修復(fù)
        3.6 提高BMSCs的歸巢
        3.7 小結(jié)與展望
第二部分 實(shí)驗(yàn)研究
    實(shí)驗(yàn)一、PNS對免BMSCs的增殖作用
        1 實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
            1.1 實(shí)驗(yàn)動物
            1.2 主要藥物及試劑
            1.3 主要儀器及設(shè)備
        2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.1 BMSCs的分離、原代培養(yǎng)及傳代培養(yǎng)
                2.1.1 準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)材料和試劑
                2.1.2 原代BMSCs的分離、培養(yǎng)
                2.1.3 建立BMSCs細(xì)胞系
            2.2 MTT法檢測PNS對BMSCs增殖的影響
                2.2.1 配制MTT溶液
                2.2.2 細(xì)胞接種
                2.2.3 MTT檢測細(xì)胞活性及增殖
        3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
        4 結(jié)果
    實(shí)驗(yàn)二、PNS對兔OA模型關(guān)節(jié)軟骨的作用
        1 實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
            1.1 實(shí)驗(yàn)動物
            1.2 主要試劑和藥品
            1.3 主要器械和設(shè)備
        2 關(guān)節(jié)內(nèi)給藥治療兔膝OA模型
            2.1 兔OA模型的構(gòu)建
                2.1.1 樣本分組
                2.1.2 OA模型構(gòu)建
            2.2 膝關(guān)節(jié)內(nèi)注射PNS
        3 影像學(xué)檢查
        4 觀察關(guān)節(jié)軟骨表面損傷
            4.1 大體觀察
            4.2 印度墨水染色
        5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
        6 結(jié)果
            6.1 影像學(xué)檢查
            6.2 軟骨表面損傷評價
第三部分 討論
第四部分 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀碩士學(xué)位期間取得的學(xué)術(shù)成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]三七總皂苷白蛋白微球注射液的初步穩(wěn)定性研究[J]. 楊姍,陳汝玲,吳靜瀾,代政敏.  貴州科學(xué). 2021(02)



本文編號：3209352