目的探討人滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞（SMSCs）向軟骨誘導(dǎo)分化的條件及分子機制,為半月板組織工程修復(fù)提供基礎(chǔ)。方法選取膝關(guān)節(jié)創(chuàng)傷患者5例,關(guān)節(jié)鏡下取滑膜組織4～8片,每片約1 mm×3 mm×1 mm,加入含10%胎牛血清的低糖培養(yǎng)基進行原代及傳代培養(yǎng),以單克隆培養(yǎng)法獲得純化的滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞系,后采用流式細(xì)胞儀進行干細(xì)胞表型鑒定,并向完全培養(yǎng)基加轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）、地塞米松（DEX）、維生素C（VC）進行軟骨誘導(dǎo)分化,采用免疫組化法檢測誘導(dǎo)后Ⅱ型膠原（COLⅡ）的表達(dá)情況。結(jié)果含10%胎牛血清的低糖DMEM培養(yǎng)基最有利于細(xì)胞生長,采用單克隆培養(yǎng)法可獲得純化較高的細(xì)胞;流式鑒定細(xì)胞表型:細(xì)胞表達(dá)CD44、CD90,不表達(dá)CD34、CD45;免疫組化法檢測未經(jīng)誘導(dǎo)的細(xì)胞形態(tài)基本保持梭形,而誘導(dǎo)14 d后逐漸由小梭形變?yōu)槎嘟切?可見大量棕色顆粒,COLⅡ陽性表達(dá)。結(jié)論人SMSCs優(yōu)化生長條件:含10%胎牛血清的低糖DMEM培養(yǎng)基最有利于細(xì)胞生長,采用單克隆培養(yǎng)法可獲得純化較高細(xì)胞,且分離純化的細(xì)胞免疫原性較低,適用于同種異基因體之間移植,可作為半月板組織工程修復(fù)的種子細(xì)胞。 

【文章來源】：中國醫(yī)師雜志. 2019,21(09)

【文章頁數(shù)】：4 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要儀器設(shè)備及試劑
    1.2 實驗方法
        1.2.1 人SMSCs的取材、分離、培養(yǎng)、傳代
        1.2.2 分子表型鑒定及增殖動力分析
        1.2.3 體外條件下TGF-β1誘導(dǎo)SMSCS向軟骨細(xì)胞譜系分化
        1.2.4 免疫組化染色檢測誘導(dǎo)后軟骨細(xì)胞標(biāo)志性產(chǎn)物
2 結(jié)果
    2.1 原代滑膜細(xì)胞的生長特征
    2.2 單克隆培養(yǎng)法結(jié)果
    2.3 SMSCs增殖能力
    2.4 滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞表型鑒定
    2.5 SMSCs向軟骨細(xì)胞誘導(dǎo)分化檢測
3 討論



本文編號：3200666