本文關(guān)鍵詞：ATF6腺病毒的構(gòu)建及對(duì)軟骨細(xì)胞凋亡的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的 構(gòu)建攜人ATF6基因的重組腺病毒Ad-ATF6和siATF6，并探討其對(duì)軟骨細(xì)胞凋亡的影響。為進(jìn)一步研究ATF6基因的生物學(xué)功能奠定基礎(chǔ)，為與ERS相關(guān)的軟骨發(fā)育疾病提供一定的參考價(jià)值。 方法 利用AdEasy TM腺病毒載體系統(tǒng)，構(gòu)建重組腺病毒Ad-ATF6和siATF6，RT-PCR和Western blot在軟骨細(xì)胞ATDC5中檢測(cè)感染效果。Ad-ATF6分別感染軟骨細(xì)胞ATDC5和C28I2，F(xiàn)CM檢測(cè)細(xì)胞的增殖和凋亡；siATF6感染經(jīng)TM處理的SW1353細(xì)胞，F(xiàn)CM、MTT和Westernblot檢測(cè)ERS時(shí)細(xì)胞的凋亡情況；BMP2誘導(dǎo)ATDC5和C3H10T1/2細(xì)胞分化過程中，用Ad-ATF6和siATF6感染細(xì)胞，F(xiàn)CM、免疫組化、TUNEL和Western blot等檢測(cè)軟骨細(xì)胞分化過程中的凋亡情況。 結(jié)果 成功獲得高滴度的重組腺病毒Ad-ATF6和siATF6；Ad-ATF6處理組的ATDC5細(xì)胞和C28I2細(xì)胞凋亡率明顯增加（P0.05）、增殖率明顯降低（P0.05）；TM+siATF6處理組SW1353細(xì)胞凋亡率明顯高于TM+Ad-ATF6處理組（P0.05）；BMP2誘導(dǎo)ATDC5和C3H10T1/2細(xì)胞及骨組織分化過程中，Ad-ATF6處理組凋亡明顯高于siATF6處理組（P0.05）。 結(jié)論 非ERS狀態(tài)下，，過量的ATF6會(huì)誘導(dǎo)軟骨細(xì)胞的凋亡，抑制其增殖；ERS狀態(tài)下，ATF6能夠幫助細(xì)胞恢復(fù)正常狀態(tài)，抑制細(xì)胞的凋亡，促進(jìn)其增殖；BMP2誘導(dǎo)軟骨分化過程中，ATF6能夠促進(jìn)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)的凋亡。
【關(guān)鍵詞】：ATF6 重組腺病毒 軟骨細(xì)胞 凋亡
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R373
【目錄】：

• 英漢縮略詞名詞對(duì)照5-7
• 摘要7-9
• ABSTRACT9-11
• 前言11-12
• 第一部分 Ad-ATF6 腺病毒的構(gòu)建和鑒定12-22
• 1 材料與方法12-19
• 2 結(jié)果19-21
• 3 小結(jié)21-22
• 第二部分 siATF6 腺病毒的構(gòu)建與鑒定22-27
• 1 材料與方法22-24
• 2 結(jié)果24-26
• 3 小結(jié)26-27
• 第三部分 ATF6 對(duì)軟骨細(xì)胞凋亡的研究27-35
• 1 材料與方法27-29
• 2 結(jié)果29-33
• 3 小結(jié)33-35
• 第四部分 ATF6 對(duì)軟骨分化過程中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)凋亡的研究35-44
• 1 材料與方法35-38
• 2 結(jié)果38-42
• 3 小結(jié)42-44
• 全文總結(jié)44-45
• 參考文獻(xiàn)45-47
• 文獻(xiàn)綜述47-54
• 參考文獻(xiàn)50-54
• 致謝54-55
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文55-56

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本文編號(hào)：315295