目的探討大鼠腦皮質(zhì)未成熟星形膠質(zhì)細(xì)胞的分離、鑒定及原代培養(yǎng)技術(shù)。方法采用差速貼壁法清除成纖維細(xì)胞及酶消化去除少突膠質(zhì)細(xì)胞污染,應(yīng)用免疫熒光進(jìn)行細(xì)胞鑒定。取不同時(shí)間點(diǎn)的細(xì)胞在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化,雙重免疫熒光染色觀察細(xì)胞生長(zhǎng)過程的分化狀態(tài)。結(jié)果細(xì)胞形態(tài)觀察提示:6¹4 d細(xì)胞呈均勻扁平多角狀,16 d后部分細(xì)胞肥大增生,呈成熟狀態(tài)。免疫組化染色顯示:GFAP（+）細(xì)胞達(dá)97%。免疫熒光雙重標(biāo)記發(fā)現(xiàn):16 d后細(xì)胞表達(dá)vimentin和nestin這兩種蛋白減弱。結(jié)論本實(shí)驗(yàn)技術(shù)可獲得純度高,形態(tài)和功能良好,表達(dá)穩(wěn)定的大鼠腦皮質(zhì)未成熟星形膠細(xì)胞。 

【文章來源】：中華臨床醫(yī)師雜志(電子版). 2015,9(11)

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未成熟星形膠質(zhì)細(xì)胞ci

·2146·中華臨床醫(yī)師雜志(電子版)2015年6月第9卷第11期ChinJClinicians(ElectronicEdition),June1,2015,Vol.9,No.11二、不同時(shí)間點(diǎn)大鼠腦皮質(zhì)未成熟星形膠質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)學(xué)觀察在顯微鏡下觀察傳代培養(yǎng)6～14d內(nèi)細(xì)胞形態(tài)相近，為扁平、多角狀，胞質(zhì)豐富。16d后發(fā)現(xiàn)部分星形膠質(zhì)細(xì)胞部分開始肥大增生，呈成熟狀態(tài)（圖2）。三、GFAP、vimentin和GFAP、nestin雙重免疫熒光檢測(cè)在GFAP、vimentin和GFAP、nestin雙重免疫熒光染色中可見GFAP、vimentin和GFAP、nestin在6～14d陽性表達(dá)，16d后vimentin、nestin表達(dá)減弱。見圖3，4。討論近年來，隨著各種細(xì)胞學(xué)研究技術(shù)的進(jìn)步，各種細(xì)胞提取分離技術(shù)日趨成熟，但是未成熟星形膠質(zhì)細(xì)胞的提取及鑒定還存在很多難題。首先是未成熟星形膠質(zhì)細(xì)胞容易對(duì)機(jī)械損傷產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)，不但細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)變化明顯，而且蛋白質(zhì)的分泌也會(huì)產(chǎn)生相應(yīng)的變化[4-5]。目前解決此難題的辦法只能

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]脂多糖體外刺激對(duì)未成熟星形膠質(zhì)細(xì)胞氧化損傷的機(jī)制研究[D]. 李亞紅.浙江大學(xué) 2013
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本文編號(hào)：3139673

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