惡性腫瘤是目前人類死亡的主要原因之一。人類對腫瘤的早期診斷和有效治療缺乏特異性是惡性腫瘤對人類生存產(chǎn)生巨大威脅的主要原因。目前所發(fā)現(xiàn)并用于早期臨床診斷的腫瘤標志物與正常細胞相比還沒有質(zhì)的區(qū)別,只是量的不同,缺乏真正的特異性;手術(shù)切除、放療和化療的聯(lián)合應(yīng)用是目前臨床上治療腫瘤的主要手段,雖然手術(shù)切除是去除實體瘤組織的有效方法,但在切除腫瘤組織的同時把一部分正常組織也擴大切除了,對人體創(chuàng)傷大,并且還有復發(fā)和轉(zhuǎn)移的危險,術(shù)后仍需放療和化療,但是,不論是放射性同位素還是化療藥物對于腫瘤細胞和正常細胞都不加區(qū)分的一起殺死,因此在治療腫瘤的同時也對人體造成了極大的損害,并且由于不能使用較大劑量而嚴重影響放療和化療的效果。當前惡性腫瘤早期診斷和有效治療方面存在的諸多不利因素的一個根本原因是人們對正常細胞和惡性腫瘤細胞之間差異的理解缺乏足夠的知識。 SELEX（Systematic evolution of ligands by exponential enrichment）技術(shù)是20世紀90年代發(fā)展起來的一種生物文庫技術(shù),該技術(shù)的目的就是利用人工合成的隨機寡核苷酸文庫篩選某一靶分子的特異寡核苷... 

【文章來源】：中國人民解放軍軍事科學院北京市

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

ssDNA和dsDN^在，M尿素12../，

變性PAGE中的電泳行為是不同的，ssDN結(jié)構(gòu)，泳動速度比dsDNA文庫慢。卜DNA2:85bP3:85bP.1、ssDNA和dsDN^在，M尿素12../變性p^G這一特點，用不對稱PCR的方法首先擴得到ssDNA文庫，用于下一輪篩選。一輪篩選并擴增與蛋白結(jié)合的配基后，分不對稱PCR擴增35個循環(huán)，7M尿素12板量，不對稱PCR擴增并切膠純化。

圖IJ、原庫10個陽性克陡洲序圈譜分析測序結(jié)果發(fā)現(xiàn):文庫兩端固定引物退火序列均正確，隨機序列中A、T、C、G四種堿基的含量與理論值(各占25%)接近，分別為:A24.86%，T:27.03%，C:21.08%，G:27.03%。10個陽性克隆中的隨機序列見圖1.4。1、CTCGGGAG(關(guān)右丁入幾TTTCCTTGACG2、CAATAATAGCATTCCCTAAGCCTGT3、士幾幾NCGTTCTTACGGAGTGCGCTGG4、CGATACCTGTTTCTT口蚊粉T及C入5、GGTTCGTTAGACCTGTAAACGAATA6、幾C公國獻公(通勿已燦杖公J心GCTGGGCG，、CG于CA側(cè)燦蚊從孟TGTCGTTAGGCTGA8、蕊里蕊了了CCGTTCAGTA勿以翔枕場漢丁GC，、見人TTAAAGTGCCC陽U以該州刃妓犯GA10、CGTACCCGCAATC己燦瓏湯自盆祀TTC圖1.4、原庫10個陽性克隴中的健機序列

【參考文獻】：
期刊論文
[1]適配體及其在生物醫(yī)藥和診斷分析方面的應(yīng)用[J]. 董海燕,王杰,張婷,馬季,韓龍宇,涂小煌,賈力.  藥物分析雜志. 2016(03)

博士論文
[1]主要DSP毒素免疫學檢測方法及沿海市售海產(chǎn)品污染調(diào)查[D]. 林超.吉林大學 2014

碩士論文
[1]應(yīng)用雙向熱循環(huán)消減SELEX技術(shù)篩選肺癌血清核酸適配體[D]. 陳聰盈.蘭州理工大學 2019
[2]滅活溶藻弧菌適配子的SELEX篩選及其應(yīng)用研究[D]. 湯學敏.集美大學 2013
[3]哈維氏弧菌適配子的SELEX篩選及分析[D]. 郝聚敏.集美大學 2012



本文編號：3132807