本文關(guān)鍵詞：重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)脂肪干細(xì)胞分化的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究目的 本實(shí)驗(yàn)?zāi)康脑谟谔接懖煌瑵舛戎亟M人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(Recombinant Human FGF-basic, rh-bFGF)對(duì)體外培養(yǎng)的人脂肪源干細(xì)胞(human adipose-derived stem cells, hAS Cs)誘導(dǎo)分化為脂肪細(xì)胞的影響,通過(guò)觀察hASCs誘導(dǎo)分化為脂肪細(xì)胞中新形成脂滴出現(xiàn)的時(shí)間、新形成脂肪細(xì)胞的增殖速率和成熟脂滴表面定位蛋白CIDEC的表達(dá)量,從而尋找體外促進(jìn)hASCs向脂肪細(xì)胞分化所需加入rh-bFGF的最佳濃度。 材料與方法 1.鄭大五附院健康抽脂患者獲得脂肪混懸液,采用膠原酶消化的方法,分離、提取hASCs,進(jìn)行體外培養(yǎng)、擴(kuò)增,在顯微鏡下進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)的觀察,臺(tái)盼藍(lán)染色后對(duì)hASCs進(jìn)行計(jì)數(shù),應(yīng)用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞表型的鑒定。將傳至第三代的細(xì)胞進(jìn)行成脂誘導(dǎo)并用油紅O染色對(duì)其進(jìn)行鑒定。 2. hASCs傳至第三代時(shí),分四組進(jìn)行成脂誘導(dǎo),將加入Ong/ml rh-bFGF的設(shè)為對(duì)照組,將加入10ng/mlrh-bFGF,20ng/ml rh-bFGF,40ng/ml rh-bFGF設(shè)為實(shí)驗(yàn)組。各組分別用油紅O染色連續(xù)監(jiān)測(cè)脂滴出現(xiàn)時(shí)間,并比較其差異是否有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3.各組分別于加入不同濃度的rh-bFGF之后的12h、24h、48h用MTT比色法檢測(cè)hASCs誘導(dǎo)分化為脂肪細(xì)胞的細(xì)胞增殖率。 4.各組在成脂誘導(dǎo)的14d時(shí),運(yùn)用western印跡法檢測(cè)成熟脂滴定位蛋白CIDEC的蛋白表達(dá)量,并比較其差異。 結(jié)果 1.體外提取、培養(yǎng)的hASCs光鏡下觀察成梭形,流式細(xì)胞儀鑒定其表型均符合hASCs標(biāo)準(zhǔn),成脂誘導(dǎo)第7天后鏡下觀察到大小不一的脂滴,油紅O染色呈陽(yáng)性。 2.各組在油紅O染色時(shí)定性記錄脂滴出現(xiàn)時(shí)間,實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組之間平均出現(xiàn)脂滴時(shí)間比較p0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。實(shí)驗(yàn)組各組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其中40ng/ml rh-bFGF出現(xiàn)脂滴平均時(shí)間為(11.5±1.9)h。 3.各組分別加入不同濃度rh-bFGF后的12h、24h、48h,MTT比色法檢測(cè)新形成脂肪細(xì)胞的增殖率。其中40ng/ml rh-bFGF的吸光度平均值為0.522±0.100。 4. Western印跡法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組新形成脂滴表面定位蛋白CIDEC的表達(dá)量并進(jìn)行比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。 結(jié)論 實(shí)驗(yàn)組能縮短體外hASCs分化為脂肪細(xì)胞的時(shí)間和促進(jìn)成脂細(xì)胞的增殖,脂滴表面蛋白CIDEC表達(dá)量隨著實(shí)驗(yàn)組濃度升高而持續(xù)增加。其中以40ng/ml rh-bFGF為最佳濃度。
【關(guān)鍵詞】：脂肪干細(xì)胞 重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子 脂肪細(xì)胞 誘導(dǎo)分化
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R329
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 中英文~.略詞對(duì)照表10-11
• 前言11-14
• 材料和方法14-23
• 結(jié)果23-26
• 討論26-30
• 參考文獻(xiàn)30-33
• 附圖33-43
• 綜述43-62
• 參考文獻(xiàn)56-62
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷、在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與研究成果62-63
• 致謝63

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 李衛(wèi)華;孫志成;王文;李淑艷;;堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)人前脂肪細(xì)胞增殖和分化的影響[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2009年45期

2 王陽(yáng),戚可名,馬越波,劉珍君,趙玉明,王友彬,霍孟華,石蕾,童成國(guó),丁玉虎;我院自體脂肪顆粒注射移植十年回顧[J];中華整形外科雜志;2002年02期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 李煩繁;CIDEC在人脂肪細(xì)胞分化中的作用及其機(jī)制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2010年

  本文關(guān)鍵詞：重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)脂肪干細(xì)胞分化的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：312983