目的:血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）主要由血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌，通過結(jié)合HMGB1，激活蛋白C，降低凝血酶的活性而發(fā)揮抗炎、抗凝的活性。TM有三個(gè)結(jié)構(gòu)域：EGF樣結(jié)構(gòu)域——通過促進(jìn)蛋白C的形成，發(fā)揮抗凝的作用，另外兩個(gè)結(jié)構(gòu)域糖基化氧結(jié)構(gòu)域、N端樣結(jié)構(gòu)域（TM-N）功能尚不明確，本文對其結(jié)構(gòu)域之一TM-N行基礎(chǔ)性研究，設(shè)置TM-N參與不同的炎癥反應(yīng)，了解TM-N在不同炎癥反應(yīng)中所起的作用及作用機(jī)制。方法：1．LPS及HMGB1+LPS刺激RAW264.7細(xì)胞，分別加入TM-N共培養(yǎng)2．免疫熒光檢測0h、2h時(shí)核因子NF-κB被激活的量3．RT-PCR檢測0h、3h、6h時(shí)IL-6mRNA表達(dá)的量的變化4．ELISA測定0h、1.5h、4h、8h.時(shí)細(xì)胞上清液中TNF-α, IL-1分泌的量結(jié)果：1．HMGB1+LPS刺激組同LPS刺激組相比較，HMGB1+LPS組6h時(shí)IL-6mRNA表達(dá)（2.637±1.073）明顯高于LPS組（0.376±0.156）；該組8hTNF-α（916.52±38.31）及IL-1（1396.47±135.08）均高于LPS組（分別是490.60±87.70和751.3... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級別】：碩士

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中文摘要
Abstract
第一章 前言
第二章 材料與方法
    1.實(shí)驗(yàn)所需試劑來源
    2.實(shí)驗(yàn)試劑的配置
    3.實(shí)驗(yàn)設(shè)備與儀器
    4.細(xì)胞復(fù)蘇、培養(yǎng)、傳代
    5.細(xì)胞的分組與加樣
    6.RT-PCR檢測IL-6-mRNA的表達(dá)
    7.ELISA檢測細(xì)胞上清液中TNF-α及IL-1的表達(dá)
    8.免疫熒光檢測 NF-KB
    9.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
第三章 結(jié)果
    1.RT-PCR檢測IL-6 mRNA的轉(zhuǎn)錄水平
    2.ELISA檢測上清液中IL-1的含量
    3.ELISA檢測細(xì)胞上清液中TNF-α
    4. 免疫熒光檢測NF-κB的激活
第四章 討論
參考文獻(xiàn)
高遷移率族蛋白的綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]NF-κB、HMGB1在重癥急性胰腺炎腸黏膜損傷中的時(shí)點(diǎn)表達(dá)及其意義[J]. 卿伯華,曾之耀,王湘英,駱永富,李振華,張興文,盧義展.  世界華人消化雜志. 2011(33)
[2]COPD患者HMGB1與肺功能的相關(guān)性分析[J]. 章俊強(qiáng),梅曉冬.  臨床肺科雜志. 2011(10)
[3]重組HMGB1-A盒蛋白對小鼠單核細(xì)胞的抗炎作用[J]. 劉婷,賀永文,陳西柳.  中國免疫學(xué)雜志. 2010(04)
[4]HIV感染者/AIDS病人高遷移率族蛋白1的表達(dá)及其臨床意義[J]. 王敏,范學(xué)工,黃維亮,徐丹.  生命科學(xué)研究. 2009(06)
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[6]腸屏障功能障礙與重癥急性胰腺炎[J]. 劉曉臣,彭燕.  世界華人消化雜志. 2006(32)
[7]自身免疫性肝病與自身抗體[J]. 王培之.  臨床薈萃. 2005(04)
[8]多發(fā)傷與全身炎癥反應(yīng)綜合征及多器官功能障礙綜合征的關(guān)系[J]. 王曉蓉,林錫芳,潘景業(yè),陳俊.  溫州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2002(01)
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博士論文
[1]HMGB1酸性尾端抗菌相關(guān)功能位點(diǎn)解析及以該分子為靶點(diǎn)的抗炎措施研究[D]. 龔薇.第三軍醫(yī)大學(xué) 2009
[2]HMGB1在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎及實(shí)驗(yàn)性關(guān)節(jié)炎中的作用及～（99）Tc-MDP的干預(yù)研究[D]. 左曉霞.中南大學(xué) 2006



本文編號：3118385