目的:建立穩(wěn)定可重復(fù)的骨骼肌細(xì)胞離體胰島素抵抗模型,促進(jìn)胰島素抵抗病理機(jī)制的探索及藥物的研發(fā)與篩選。方法:采用小鼠骨骼肌成肌細(xì)胞C2C12為研究對(duì)象,分別以正常分化液及含40和60 mmol/L葡萄糖的分化液誘導(dǎo)分化,每天用相差顯微鏡觀察不同濃度葡萄糖處理對(duì)細(xì)胞匯聚、融合和形成多核肌管的影響;分別在分化1、3、5和7 d后應(yīng)用2-NBDG法檢測(cè)不同處理對(duì)細(xì)胞基礎(chǔ)糖攝取和胰島素刺激糖攝取的影響;在分化5 d和7 d后應(yīng)用Western blot法檢測(cè)不同干預(yù)對(duì)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)子4（glucose transporter 4,GLUT4）蛋白表達(dá)的影響;分化5 d后應(yīng)用免疫熒光組化法檢測(cè)不同干預(yù)對(duì)GLUT4蛋白分布的影響。結(jié)果:形態(tài)學(xué)結(jié)果顯示,經(jīng)60 mmol/L葡萄糖（高糖）處理3 d后明顯抑制C2C12細(xì)胞的生長(zhǎng)分化;葡萄糖攝取結(jié)果表明高糖處理5 d和7 d后均明顯抑制C2C12的基礎(chǔ)糖攝取和胰島素刺激的糖攝�。≒<0.01）,且處理5 d后胰島素刺激的糖攝取與基礎(chǔ)糖攝取的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性（P>0.05）; Western blot檢測(cè)結(jié)果表明高糖處理5 d和7 d后,胰島素刺... 

【文章來源】：中國(guó)病理生理雜志. 2019,35(09)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

＊＊P＜0．01vsPBSgroup;

0.01)，見圖4。以上結(jié)果提示高糖干預(yù)5d明顯降低C2C12細(xì)胞膜GLUT4表達(dá)量，且存在劑量依賴性，以60mmol/L葡萄糖干預(yù)抑制效果最明顯，說明60mmol/L葡萄糖干預(yù)不僅導(dǎo)致細(xì)胞中GLUT4蛋白表達(dá)降低，同時(shí)抑制GLUT4蛋白向細(xì)胞膜的轉(zhuǎn)運(yùn)，抑制C2C12細(xì)胞葡萄糖的攝取。Figure2．ThechangesofglucoseuptakeintheC2C12cellstreatedwithglucoseatdifferentconcentrations．Mean±SD．n=6．*P＜0．05，＊＊P＜0．01vsPBSgroup;##P＜0．01vscontrolgroup．圖2不同濃度葡萄糖干預(yù)不同時(shí)長(zhǎng)對(duì)C2C12細(xì)胞葡萄糖攝取能力的影響Figure3．ThechangesofGLUT4proteinexpressionintheC2C12cellstreatedwithglucoseatdifferentconcentrationsfor5d(A)and7d(B)respectively．Mean±SD．n=6．*P＜0．05，＊＊P＜0．01vsPBSgroup．圖3不同濃度葡萄糖干預(yù)不同時(shí)長(zhǎng)對(duì)C2C12細(xì)胞GLUT4蛋白表達(dá)的影響·5271·

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]紅景天苷上調(diào)HIF-1α減輕高糖誘導(dǎo)的大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞損傷[J]. 謝瑞燕,方雪玲,Hamze I.RAGE,崔彤霞,朱偉平.  中國(guó)病理生理雜志. 2019(02)
[2]胰島素抵抗細(xì)胞模型建立研究現(xiàn)況[J]. 薛玲,石巖.  遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2018(10)
[3]基于HepG2細(xì)胞胰島素抵抗模型探討miR-7-5p對(duì)Itch基因的靶向作用[J]. 吳亞柳,馬玉,于曼麗,王文棟,郝敏,常曉彤.  中國(guó)病理生理雜志. 2018(07)
[4]大數(shù)據(jù)視閾下糖尿病患者管理模式探析[J]. 閆冠韞,陳洪恩,李舜,王長(zhǎng)義,尹梅.  中國(guó)全科醫(yī)學(xué). 2018(09)
[5]DIZE對(duì)糖尿病心肌病大鼠心功能的保護(hù)作用[J]. 楊旻,曹新冉,王園園,王曉瓊,于詩然,董波,高靖.  中國(guó)病理生理雜志. 2018(01)
[6]HepG2細(xì)胞胰島素抵抗模型建立影響因素研究[J]. 劉迪迪,邱軍強(qiáng),程翠林,王振宇.  食品與藥品. 2018(01)
[7]2型糖尿病與肌萎縮研究進(jìn)展[J]. 王繼,周越.  中國(guó)運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)雜志. 2017(07)
[8]胰島素抵抗細(xì)胞模型建立及藥物評(píng)價(jià)的研究進(jìn)展[J]. 張澤生,李雨蒙,張夢(mèng)娜,高山,郭擎,孫艷偉.  中國(guó)食品添加劑. 2016(10)
[9]不同濃度紅景天苷對(duì)成肌細(xì)胞體外分化的影響及機(jī)制初探[J]. 羅維,張鵬,艾磊,周越,陳曉萍.  體育科學(xué). 2015(09)



本文編號(hào)：3117669