乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）是小型的嗜肝DNA病毒,能夠特異性地感染人肝實質(zhì)細胞。HBV的易感性可以歸于多個方面,包括細胞表面的受體以及細胞內(nèi)的蛋白或其他因子,目前對HBV易感性的了解還有待深入。本課題利用課題組原有的HBV 5c3c載體和糖基磷脂酰肌醇（glycosylphosphatidylinositol,GPI）的特性,構(gòu)建了重組HBV載體5c3c-CD59-Flag-GPI和5c3cT-Flag-GPI,轉(zhuǎn)染Huh7細胞后可以將Flag標簽錨定在細胞膜上,且可利用Flag抗體通過流式細胞術(shù)對其進行分選。在回補HBV包膜蛋白的情況下,5c3cT-Flag-GPI能包裝形成完整的重組HBV顆粒。本研究為后續(xù)優(yōu)化重組HBV的包裝效率,進而為HBV易感性研究提供工具并奠定基礎(chǔ)。 

【文章來源】：微生物與感染. 2019,14(04)

【文章頁數(shù)】：10 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 細胞系
        1.1.2 質(zhì)粒
        1.1.3 儀器和試劑
        1.1.4 引物合成
    1.2 方法
        1.2.1 細胞培養(yǎng)
        1.2.2 免疫熒光
        1.2.3 流式細胞術(shù) （針對6孔板的貼壁細胞）
        1.2.4 Southern印跡法
2 結(jié)果
    2.1 Flag-GPI表達載體的構(gòu)建
    2.2 Flag-GPI的細胞表面錨定驗證
    2.3 表達Flag-GPI的重組HBV具有復(fù)制能力
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]脂質(zhì)筏——病原微生物出入細胞的一種門戶[J]. 周一然,宋建國.  生命科學(xué). 2004(03)



本文編號：3117046