構(gòu)建表達Flag-GPI的重組乙型肝炎病毒載體
發(fā)布時間:2021-04-03 20:39
乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)是小型的嗜肝DNA病毒,能夠特異性地感染人肝實質(zhì)細胞。HBV的易感性可以歸于多個方面,包括細胞表面的受體以及細胞內(nèi)的蛋白或其他因子,目前對HBV易感性的了解還有待深入。本課題利用課題組原有的HBV 5c3c載體和糖基磷脂酰肌醇(glycosylphosphatidylinositol,GPI)的特性,構(gòu)建了重組HBV載體5c3c-CD59-Flag-GPI和5c3cT-Flag-GPI,轉(zhuǎn)染Huh7細胞后可以將Flag標簽錨定在細胞膜上,且可利用Flag抗體通過流式細胞術(shù)對其進行分選。在回補HBV包膜蛋白的情況下,5c3cT-Flag-GPI能包裝形成完整的重組HBV顆粒。本研究為后續(xù)優(yōu)化重組HBV的包裝效率,進而為HBV易感性研究提供工具并奠定基礎(chǔ)。
【文章來源】:微生物與感染. 2019,14(04)
【文章頁數(shù)】:10 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 細胞系
1.1.2 質(zhì)粒
1.1.3 儀器和試劑
1.1.4 引物合成
1.2 方法
1.2.1 細胞培養(yǎng)
1.2.2 免疫熒光
1.2.3 流式細胞術(shù) (針對6孔板的貼壁細胞)
1.2.4 Southern印跡法
2 結(jié)果
2.1 Flag-GPI表達載體的構(gòu)建
2.2 Flag-GPI的細胞表面錨定驗證
2.3 表達Flag-GPI的重組HBV具有復(fù)制能力
3 討論
【參考文獻】:
期刊論文
[1]脂質(zhì)筏——病原微生物出入細胞的一種門戶[J]. 周一然,宋建國. 生命科學(xué). 2004(03)
本文編號:3117046
【文章來源】:微生物與感染. 2019,14(04)
【文章頁數(shù)】:10 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 細胞系
1.1.2 質(zhì)粒
1.1.3 儀器和試劑
1.1.4 引物合成
1.2 方法
1.2.1 細胞培養(yǎng)
1.2.2 免疫熒光
1.2.3 流式細胞術(shù) (針對6孔板的貼壁細胞)
1.2.4 Southern印跡法
2 結(jié)果
2.1 Flag-GPI表達載體的構(gòu)建
2.2 Flag-GPI的細胞表面錨定驗證
2.3 表達Flag-GPI的重組HBV具有復(fù)制能力
3 討論
【參考文獻】:
期刊論文
[1]脂質(zhì)筏——病原微生物出入細胞的一種門戶[J]. 周一然,宋建國. 生命科學(xué). 2004(03)
本文編號:3117046
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