發(fā)布時間：2021-04-03 04:04

　　目的：探討日本血吸蟲重組蛋白、核酸疫苗、重組鏈球菌活菌苗粘膜免疫誘導(dǎo)小鼠抗攻擊感染的保護力及尋找新的疫苗侯選分子的基因。 方法： 1、核酸疫苗及重組鏈球菌活菌苗按常規(guī)方法構(gòu)建。 2、保護試驗用動物為BALB/C和昆明系小鼠。分別用rSjFer和rSjGST-CA（佐劑為CTB），SjTs-1/pc、Sj31/VR1012、SjCA/pc和SjMf1/pc（佐劑為MPL），SjCA和Sj31表面表達(dá)重組活菌苗粘膜免疫3次。第3次免疫后2周，攻擊感染40±1條尾蚴，45 d剖殺動物，觀察減蟲率和減卵率。在初次免疫前和攻擊感染前尾靜脈采血并收集糞便或唾液，ELISA檢測抗體水平。 3、日本血吸蟲成蟲cDNA文庫免疫篩選用血清為重復(fù)感染兔血清。三輪篩所獲陽性克隆，經(jīng)輔助噬菌體自動剪切后，進行PCR檢測測序，生物信息學(xué)分析。 結(jié)果 1、小鼠免疫后血清中IgA和IgG及糞內(nèi)或唾液內(nèi)sIgA水平升高。rSjFer+CTB灌胃和滴鼻免疫的減蟲率分別為25.57％和33.35％，每克肝減卵率分別為34.75％和60.10％。rSjGST-CA+CTB滴鼻免疫的減蟲率為... 

【文章來源】：中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

純化的rsjFer的western一blotting鑒定結(jié)果

3念;界洛叢3娜腳丫婦圖3M蛋白質(zhì)標(biāo)志物純化的rSj’GST一CA的SDS一PAGE鑒定結(jié)果1rSj’GST一CA2bufferA中的上清3未加IPTG誘導(dǎo)的細(xì)菌裂解物4IPTG誘導(dǎo)后的細(xì)菌裂解物Fig.1SDS一PAGEanalysisofpurifiedrS’’GST一CAM.proteinmolecularweightstandards1.PartiallyPurifiedrSj’GST一CA2ThesuPe扭atantinbufferA3.BaeteriallysateunindueedbyIPTG.4BaeteriallysateindueedbyIPTG褪二重父_圖4純化的rSj’GST一CA和rS，’GST26的westem一blotting鑒定結(jié)果M.蛋白質(zhì)標(biāo)志物1.血吸蟲感染血清與rSj’GST26孵育2.血吸蟲感染血清與rS，’GsT一CA孵育3.陰性血清與rS，’GsT一cA孵育4.陰性血清與rSj’GST26孵育Fig.ZW七stem一blottinganalysisofrSj’GST一CAandrSj’GST26M.MarkerlrSj’GST一CAineubatedwithserafrommieeinfeeted初th5.j2

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【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[7]日本血吸蟲卵黃鐵蛋白基因免疫小鼠的保護性研究[J]. 周俊梅,余新炳,吳忠道,鄭亦男,卞國武.  中國血吸蟲病防治雜志. 2001(06)
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[9]DNA疫苗在小鼠體內(nèi)的組織分布及安全性研究[J]. 魏泉德,葉苓,徐勁,余新炳:.  中國人獸共患病雜志. 2001(05)
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本文編號：3116580