基于Aptamer/二氧化硅熒光納米探針的金黃色葡萄球菌檢測研究
發(fā)布時(shí)間:2021-04-01 07:18
金黃色葡萄球菌是一種革蘭氏陽性菌,是人類化膿感染中最常見的病原菌。美國疾病控制中心報(bào)告,由金黃色葡萄球菌引起的感染占第二位,僅次于大腸桿菌。近年來,很多快速、靈敏檢測金黃色葡萄球菌的方法在生物醫(yī)學(xué)分析領(lǐng)域中發(fā)揮了重要作用,尤其是一些利用抗體-抗原識別原理發(fā)展的生物傳感方法,如原子力顯微鏡法、酶聯(lián)免疫吸附法、表面等離子體共振法及熒光免疫測定法等。然而基于抗體-抗原識別原理發(fā)展的金黃色葡萄球菌生物傳感方法由于抗體的難合成、不易修飾、生物活性不穩(wěn)定且成本高等而導(dǎo)致其存在一定的局限性。核酸適配體(Aptamer)作為一種新型特異性識別分子具有高穩(wěn)定性、高選擇性,且穩(wěn)定性好、合成簡便、容易標(biāo)記、適用性廣等優(yōu)點(diǎn),為發(fā)展快速、靈敏的金黃色葡萄球菌檢測方法提供了新的思路。然而目前報(bào)道的基于Aptamer特異性識別的金黃色葡萄球菌檢測方法主要是電化學(xué)傳感法和熒光光譜測定法,這些方法操作復(fù)雜,且不能實(shí)現(xiàn)高通量檢測。雙色流式細(xì)胞術(shù)能對細(xì)胞或者其他生物粒子進(jìn)行定性、定量分析。與傳統(tǒng)的檢測方法相比,具有免洗和速度快等優(yōu)點(diǎn),成為當(dāng)代先進(jìn)的細(xì)胞、生物粒子定量分析技術(shù)之一。同時(shí),融合介電電泳原理和微流控芯片技術(shù)發(fā)展介...
【文章來源】:湖南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:69 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
PCR法檢測金黃色葡萄球菌[51】利用PCR擴(kuò)增技術(shù)最大特點(diǎn)是DNA能在短時(shí)間內(nèi)擴(kuò)增大量的目標(biāo),因此具
1.2.3抗原抗體識別法抗體指機(jī)體的免疫系統(tǒng)在抗原的刺激下,由B淋巴細(xì)胞或記憶細(xì)胞增殖分化成的裝細(xì)胞所產(chǎn)生的、可與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白,即所有抗體都是免疫球蛋白。利用該抗體-抗原的識別,許多生物傳感方法已被開發(fā)用于病原菌的檢測,包括原子力顯微鏡測量[57],酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)[58],表面等離子體共振[59],基于突光免疫測定法[69],電化學(xué)傳感[61]等等,雖然對細(xì)菌檢測的抗原-抗體檢測體系不需要提取DNA或破裂細(xì)胞,但因抗體由蛋白質(zhì)組成,存在不易合成、穩(wěn)定性差、成本高、易分解等缺點(diǎn),因而限制了其廣泛應(yīng)用。此外,抗體分子識別研究需要建立一個(gè)多層次、多角度和系統(tǒng)的抗體研究平臺(tái)[62]?贵w分子與抗原分子在特定片段、特定位置之間的互相吻合和匹配的過程叫免疫識別和結(jié)合?贵w-抗原特異性相互作用完全基于一級序列折疊后的三級結(jié)構(gòu),對應(yīng)的蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)特征揭示了該特異性分子識別機(jī)制[63]。
圖1.3Aptamer探針用于生物傳感器檢測核酸序列[73】已成功蹄選出越來越多病原菌的Aptamer,如金黃色葡萄球菌、大腸a、沙門氏菌等[78],為發(fā)展基于Aptamer識別的病原菌微生物檢測技術(shù)的基礎(chǔ)。2009年,Shao等人蹄選得到了金黃色葡萄球菌的Aptamer[79],種新的金黃色葡萄球菌識別分子,并且初步用于金黃色葡萄球菌成像術(shù)研究。然而,到目前為止,利用Aptamer特異性識別檢測金黃色葡法仍然是少見的。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]適配體生物傳感器在病原微生物檢測中的應(yīng)用[J]. 王一嫻,葉尊忠,斯城燕,應(yīng)義斌. 分析化學(xué). 2012(04)
[2]2006—2010年我國食源性疾病暴發(fā)簡介[J]. 龐璐,張哲,徐進(jìn). 中國食品衛(wèi)生雜志. 2011(06)
[3]2003-2007年中國1060起細(xì)菌性食源性疾病流行病學(xué)特征分析[J]. 毛雪丹,胡俊峰,劉秀梅. 中國食品衛(wèi)生雜志. 2010(03)
[4]1998-2002年美國食源性疾病暴發(fā)監(jiān)測[J]. 徐進(jìn),付萍. 中國食品衛(wèi)生雜志. 2009(05)
[5]美國食源性疾病監(jiān)測預(yù)警系統(tǒng)及其特點(diǎn)[J]. 李世敏. 中國衛(wèi)生監(jiān)督雜志. 2005(06)
本文編號:3112920
【文章來源】:湖南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:69 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
PCR法檢測金黃色葡萄球菌[51】利用PCR擴(kuò)增技術(shù)最大特點(diǎn)是DNA能在短時(shí)間內(nèi)擴(kuò)增大量的目標(biāo),因此具
1.2.3抗原抗體識別法抗體指機(jī)體的免疫系統(tǒng)在抗原的刺激下,由B淋巴細(xì)胞或記憶細(xì)胞增殖分化成的裝細(xì)胞所產(chǎn)生的、可與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白,即所有抗體都是免疫球蛋白。利用該抗體-抗原的識別,許多生物傳感方法已被開發(fā)用于病原菌的檢測,包括原子力顯微鏡測量[57],酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)[58],表面等離子體共振[59],基于突光免疫測定法[69],電化學(xué)傳感[61]等等,雖然對細(xì)菌檢測的抗原-抗體檢測體系不需要提取DNA或破裂細(xì)胞,但因抗體由蛋白質(zhì)組成,存在不易合成、穩(wěn)定性差、成本高、易分解等缺點(diǎn),因而限制了其廣泛應(yīng)用。此外,抗體分子識別研究需要建立一個(gè)多層次、多角度和系統(tǒng)的抗體研究平臺(tái)[62]?贵w分子與抗原分子在特定片段、特定位置之間的互相吻合和匹配的過程叫免疫識別和結(jié)合?贵w-抗原特異性相互作用完全基于一級序列折疊后的三級結(jié)構(gòu),對應(yīng)的蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)特征揭示了該特異性分子識別機(jī)制[63]。
圖1.3Aptamer探針用于生物傳感器檢測核酸序列[73】已成功蹄選出越來越多病原菌的Aptamer,如金黃色葡萄球菌、大腸a、沙門氏菌等[78],為發(fā)展基于Aptamer識別的病原菌微生物檢測技術(shù)的基礎(chǔ)。2009年,Shao等人蹄選得到了金黃色葡萄球菌的Aptamer[79],種新的金黃色葡萄球菌識別分子,并且初步用于金黃色葡萄球菌成像術(shù)研究。然而,到目前為止,利用Aptamer特異性識別檢測金黃色葡法仍然是少見的。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]適配體生物傳感器在病原微生物檢測中的應(yīng)用[J]. 王一嫻,葉尊忠,斯城燕,應(yīng)義斌. 分析化學(xué). 2012(04)
[2]2006—2010年我國食源性疾病暴發(fā)簡介[J]. 龐璐,張哲,徐進(jìn). 中國食品衛(wèi)生雜志. 2011(06)
[3]2003-2007年中國1060起細(xì)菌性食源性疾病流行病學(xué)特征分析[J]. 毛雪丹,胡俊峰,劉秀梅. 中國食品衛(wèi)生雜志. 2010(03)
[4]1998-2002年美國食源性疾病暴發(fā)監(jiān)測[J]. 徐進(jìn),付萍. 中國食品衛(wèi)生雜志. 2009(05)
[5]美國食源性疾病監(jiān)測預(yù)警系統(tǒng)及其特點(diǎn)[J]. 李世敏. 中國衛(wèi)生監(jiān)督雜志. 2005(06)
本文編號:3112920
本文鏈接:http://sikaile.net/yixuelunwen/shiyanyixue/3112920.html
最近更新
教材專著