目的：單核/巨噬細(xì)胞的趨化運(yùn)動是機(jī)體免疫應(yīng)答、炎癥反應(yīng)、腫瘤轉(zhuǎn)移的重要環(huán)節(jié)。我們之前的研究已表明PKCζ是調(diào)節(jié)單核/巨噬細(xì)胞趨化運(yùn)動的關(guān)鍵分子。在對PKCζ進(jìn)行蛋白組學(xué)研究時(shí),采用質(zhì)譜分析的方法篩選并鑒定了一個(gè)PKCζ的新結(jié)合分子-C1QBP。我們前期研究發(fā)現(xiàn)應(yīng)用小RNA干擾技術(shù)C1QBP沉默可以抑制CSF-1誘導(dǎo)的單核/巨噬細(xì)胞的趨化運(yùn)動。由此提出：C1QBP可能通過調(diào)控PKCζ的活性來調(diào)節(jié)單核/巨噬細(xì)胞的趨化運(yùn)動。本研究擬建立C1QBP低表達(dá)細(xì)胞株,探討其對單核/巨噬細(xì)胞遷移、黏附能力的影響,初步明確C1QBP在單核/巨噬細(xì)胞趨化運(yùn)動中的作用機(jī)制。本研究初步闡明了C1QBP通過PKCζ調(diào)控單核/巨噬細(xì)胞趨化運(yùn)動的作用機(jī)理,對深入探討炎癥性疾病的發(fā)病機(jī)制和探索防治腫瘤的新措施具有重要意義。方法：1.用免疫共沉淀的方法檢測PKCζ與C1QBP的相互作用。2.用免疫熒光的方法檢測C1QBP與PKCζ在細(xì)胞中的定位情況。3.應(yīng)用StealthTM NA降低單核/巨噬細(xì)胞中C1QBP蛋白的表達(dá)水平,用Western Blotting驗(yàn)證其表達(dá)。4.應(yīng)用慢病毒載體介導(dǎo)的RNA干擾技術(shù)構(gòu)建C1Q... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語/符號說明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
1 對象和方法
    1.1 細(xì)胞系
    1.2 質(zhì)粒
    1.3 常規(guī)試劑和耗材
    1.4 各實(shí)驗(yàn)所需主要試劑及溶液的配制
    1.5 主要儀器設(shè)備
    1.6 實(shí)驗(yàn)方法
    1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 C1QBP及PKCζ在細(xì)胞中的表達(dá)
    2.2 C1QBP降表達(dá)對THP-1細(xì)胞趨化運(yùn)動的影響
    2.3 C1QBP降表達(dá)對THP-1細(xì)胞聚合能力的影響
    2.4 共聚焦顯微鏡觀察C1QBP及PKCζ在THP-1細(xì)胞中的表達(dá)及定位
    2.5 C1QBP與PKCζ在THP-1細(xì)胞中的相互作用
    2.6 利用慢病毒載體建立C1QBP穩(wěn)定降表達(dá)的細(xì)胞系RAW264.7
    2.7 C1QBP降表達(dá)減弱RAW264.7細(xì)胞遷移能力
    2.8 C1QBP與PKCζ在RAW264.7細(xì)胞中存在相互作用
    2.9 共聚焦顯微鏡觀察C1QBP及PKCζ在RAW細(xì)胞中的表達(dá)及定位
    2.10 C1QBP表達(dá)降低減弱RAW264.7細(xì)胞趨化運(yùn)動
    2.11 C1QBP表達(dá)降低減弱RAW264.7細(xì)胞黏附能力
    2.12 C1QBP表達(dá)降低對相關(guān)信號蛋白磷酸化水平的影響
3 討論
4 小結(jié)
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號：3073846