背景:人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞具有多向分化能力,相關(guān)研究表明Scleraxis和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子均能夠促進(jìn)人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞向人韌帶成纖維細(xì)胞定向分化。目的:探討Scleraxis聯(lián)合堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子促進(jìn)人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞向人韌帶成纖維細(xì)胞分化的效果。方法:經(jīng)遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn),術(shù)前簽署知情同意書,取足月產(chǎn)胎盤羊膜組織,兩步酶消化法分離人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞,倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài);蘇木精-伊紅染色觀察新鮮人羊膜結(jié)構(gòu);取第3代人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞分4組進(jìn)行培養(yǎng):①單純?nèi)搜蚰らg充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)組;②人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)Slclerxis基因慢病毒感染組;③人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)組;④人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)Scleraxis和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子聯(lián)合誘導(dǎo)組。細(xì)胞培養(yǎng)3d開(kāi)始采用CCK-8法檢測(cè)各組細(xì)胞增殖能力;細(xì)胞培養(yǎng)14 d后,實(shí)時(shí)熒光定量PCR評(píng)價(jià)各組細(xì)胞向人韌帶成纖維細(xì)胞定向分化的效果。結(jié)果與結(jié)論:①第3代人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞呈長(zhǎng)梭形、渦旋狀貼壁生長(zhǎng);②新鮮人羊膜呈明顯的分層結(jié)構(gòu),共分為5層:上皮層、基底層、致密層、纖維母細(xì)胞層和海綿層;③人羊膜... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)組織工程研究. 2019,23(29)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【文章目錄】：
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文題釋義:
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 設(shè)計(jì)
    1.2 時(shí)間及地點(diǎn)
    1.3 材料
    1.4 實(shí)驗(yàn)方法
        1.4.1 人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞的分離與培養(yǎng)
        1.4.2 人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞的傳代
        1.4.3 蘇木精-伊紅染色觀察羊膜結(jié)構(gòu)
        1.4.4 慢病毒包裝載體的構(gòu)建與包裝
        1.4.5 實(shí)驗(yàn)分組
        1.4.6慢病毒滴度測(cè)定及感染人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞
        1.4.7 堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞
        1.4.8 CCK-8檢測(cè)細(xì)胞活性
        1.4.9實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)慢病毒感染人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞后Scleraxis的表達(dá)及韌帶成纖維細(xì)胞相關(guān)基因的表達(dá)
    1.5 主要觀察指標(biāo)
    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果Results
    2.1 人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞的形態(tài)
    2.2 倒置顯微鏡下羊膜的結(jié)構(gòu)
    2.3慢病毒包裝載體的構(gòu)建、包裝與滴度檢測(cè)結(jié)果
    2.4 病毒感染人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞
    2.5堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞
    2.6 CCK-8檢測(cè)人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞活性
    2.7 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)慢病毒感染人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞后Scleraxis的表達(dá)及韌帶成纖維細(xì)胞相關(guān)基因的表達(dá)
3 討論Discussion


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化腱細(xì)胞的研究[J]. 陳志達(dá),蔡弢藝,吳進(jìn),林斌,葉永賢.  中國(guó)骨與關(guān)節(jié)損傷雜志. 2017(08)
[2]人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性及免疫抑制作用的比較[J]. 洪佳瓊,高雅,宋潔,卓偉彬,孫海濤,平寶紅.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志. 2016(03)
[3]體外誘導(dǎo)人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞向韌帶細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 金瑛,李豫皖,張承昊,吳術(shù)紅,陳代雄,劉毅.  中國(guó)修復(fù)重建外科雜志. 2016(02)
[4]人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特征及向多巴胺能神經(jīng)元樣細(xì)胞的分化[J]. 周文然,李新,王文波,謝燕霞,唐娜,閻影.  中國(guó)組織工程研究. 2014(23)
[5]間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性及其分化潛能[J]. 丁志,楊松林.  中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2011(01)



本文編號(hào)：3066304