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卵巢衰老相關(guān)基因的功能驗(yàn)證和機(jī)制探討

發(fā)布時(shí)間:2021-02-24 00:15
  背景與目的隨著卵巢的衰老,女性不僅喪失生育能力,更并發(fā)嚴(yán)重的圍絕經(jīng)期癥狀如潮熱、泌尿生殖道萎縮癥狀以及心腦血管系統(tǒng)、神經(jīng)精神系統(tǒng)等疾病和骨折的高發(fā)風(fēng)險(xiǎn),對(duì)女性身心健康造成重大危害。前期通過(guò)基因芯片篩選出一系列卵巢衰老關(guān)鍵基因,在基因和蛋白水平對(duì)相關(guān)基因的表達(dá)進(jìn)行驗(yàn)證,并通過(guò)體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)對(duì)相關(guān)基因作用機(jī)制進(jìn)行深入探討。方法參考早期芯片結(jié)果以及文獻(xiàn)中衰老相關(guān)基因,通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR和Western blot驗(yàn)證相關(guān)基因的表達(dá);通過(guò)小鼠卵巢囊內(nèi)siRNA注射,下調(diào)關(guān)鍵基因表達(dá),以及體外關(guān)鍵基因?qū)?yīng)單克隆抗體、重組蛋白調(diào)控關(guān)鍵基因?qū)?yīng)下游細(xì)胞信號(hào)通路;通過(guò)HE染色、TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling)、western blot、酶聯(lián)熒光分析(enzyme linked fluoreseent assay,ELFA)、實(shí)時(shí)定量PCR、免疫熒光檢測(cè)關(guān)鍵基因?qū)π∈舐殉仓新雅萁M成、顆粒細(xì)胞凋亡、分化和激素分泌的影響,以及卵巢關(guān)鍵功能基因及蛋白的表達(dá);運(yùn)用光學(xué)顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡觀察關(guān)鍵基因?qū)β殉仓新雅萁M成、顆粒細(xì)胞凋亡以及功能蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果(1)... 

【文章來(lái)源】:華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:126 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
前言
    參考文獻(xiàn)
第一部分 卵巢衰老相關(guān)基因 898a 的表達(dá)驗(yàn)證和功能探討
    一 898a 在小鼠卵泡發(fā)育和卵巢衰老過(guò)程中表達(dá)
        摘要
        Abstract
        前言
        1. 材料和方法
        2. 結(jié)果
        3. 討論
        參考文獻(xiàn)
    二 體內(nèi)下調(diào) 898a 導(dǎo)致卵泡閉鎖增加始基卵泡耗竭加速
        摘要
        Abstract
        前言
        1.材料和方法
        2. 結(jié)果
        3. 討論
        參考文獻(xiàn)
    三 898a 通過(guò)抑制顆粒細(xì)胞終末分化維持 AMH 表達(dá)
        摘要
        Abstract
        前言
        1. 材料和方法
        2. 結(jié)果
        3. 討論
        參考文獻(xiàn)
第二部分 Peroxiredoxins mRNA 在小鼠卵泡發(fā)育和卵巢衰老過(guò)程中表達(dá)
    一 Peroxiredoxin ⅠmRNA 在小鼠卵泡發(fā)育和卵巢衰老過(guò)程中表達(dá)
        中文摘要
        英文摘要
        前言
        1 材料和方法
        2 結(jié)果
        3 討論
        參考文獻(xiàn)
    二 Peroxiredoxin Ⅲ mRNA 在小鼠卵泡發(fā)育和卵巢衰老過(guò)程中表達(dá)
        摘要
        Abstract
        前言
        1. 材料和方法
        2. 結(jié)果
        3. 討論
        參考文獻(xiàn)
    三 Peroxiredoxin Ⅳ mRNA 在小鼠卵泡發(fā)育和卵巢衰老過(guò)程中表達(dá)
        摘要
        Abstract
        前言
        1. 材料和方法
        2. 結(jié)果
        3. 討論
        參考文獻(xiàn)
    四 Peroxiredoxin Ⅴ mRNA 在小鼠卵泡發(fā)育和卵巢衰老過(guò)程中表達(dá)
        摘要
        Abstract
        前言
        1.材料和方法
        2.結(jié)果
        3.討論
        參考文獻(xiàn)
    五 Peroxiredoxin Ⅵ mRNA 在小鼠卵泡發(fā)育和卵巢衰老過(guò)程中表達(dá)
        摘要
        Abstract
        前言
        1.材料和方法
        2.結(jié)果
        3.討論
        參考文獻(xiàn)
第三部分 Neuropilin-1 在小鼠卵泡發(fā)育和卵巢衰老過(guò)程中表達(dá)
    一 Neuropilin-1 mRNA 在不同動(dòng)情周期及周齡階段小鼠卵巢中的表達(dá)
        摘要
        Abstract
        前言
        1 材料和方法
        2 結(jié)果
        3 討論
        參考文獻(xiàn)
    二 Neuropilin-1mRNA 在新生小鼠及促性腺激素預(yù)處理不同時(shí)間點(diǎn)小鼠卵巢中的表達(dá)
        摘要
        Abstract
        前言
        1. 材料和方法
        2 結(jié)果
        3 討論
        參考文獻(xiàn)
綜述一 卵泡的發(fā)生、成熟與退化
    參考文獻(xiàn)
綜述二 免疫細(xì)胞衰老在卵巢衰老過(guò)程中的作用
    參考文獻(xiàn)
附錄 研究生階段發(fā)表論文
致謝



本文編號(hào):3048470

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